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禽呼腸孤病毒(一)



錄入時間:2009-7-3 10:18:39 來源:青島betway必威西汉姆联

 1. 病毒特征禽呼腸孤病毒具有典型的呼腸孤病毒形態,純化的禽呼腸孤病毒隻含有RNA和蛋白質,平均 含量分別為187%和813%。RNA中既有ss又有ds,其中ssRNA約占RNA總量的30%。禽株RNA 的含量高於哺乳動物株(14%),這種差別歸因於禽株含有ssRNA。根據SDSPAGE電泳遷移率的不同,可將禽呼腸孤病毒的10個RNA節段分為三類,依次為L、M 和S。其中大節段L(L1、L2和L3)分子量為24×103~27×103kDa;中節段M (M1、M2和M3)分子量為13×103~17×103kDa;小節段S(S1、S2、S3和S4)分子量為0.68×103~1.2×103kDa,與哺乳動物 株比較稍有差異,但禽株S1的分子量遠遠大於哺乳動物株。不同分離株(包括不同血清型 和同型不同毒株)的dsRNA核酸電泳遷移有明顯多樣性,但與致病力無相關性。嗜關節性的S 1133株及其無致病力的疫苗株P100,它們的dsRNA節段在SDSPAGE中的遷移型式完 全相同, 但蛋白質卻有差別,推測蛋白質的改變與毒力強弱和生長特性有關。應用更靈敏 的核酸雜交試驗表明疫苗株P100的dsRNA至少有4個節段發生了變化。不同於哺乳動物呼腸孤病毒,禽呼腸孤病毒不能凝集雞、火雞、鴨、鵝、人O型、牛、綿羊 、兔、豚鼠、大鼠或小鼠的紅細胞。隻有兩個例外報道。禽呼腸孤病毒對熱有抵抗力,能耐受60℃ 8~10小時,56℃ 22~24小時,37℃ 15~16周, 22℃ 48~51周,4℃3年以上,-20℃ 4年以上,-63℃10年以上。半純化病毒於60℃ 5小時 條件下尚不能完全滅活,MgCl2能增強病毒對熱的穩定性,但濃度太大反而促進其滅活。 對乙醚不敏感,對氯仿輕度敏感,對pH3有抵抗力,室溫下過氧化氫作用1小時不能使其滅活 ;2%苯酚部分滅活病毒,2%甲醛在低溫(4℃)無效。對2%來蘇爾、3%福爾馬林、DNA代謝抑 製物、放線菌素D、阿糖胞苷、5氟2脫氧尿嘧啶有抵抗力。70%乙醇和05%有機 碘可滅活病毒。
[BT4]2. 抗原性禽呼腸孤病毒各毒株之間具有共同的群特異抗原,而與哺乳動物株和納爾遜海灣病毒無交叉 ,這種共同的沉澱抗原可用瓊擴或補結試驗檢測。使用血清學方法可對呼腸孤病毒進行分類 ,或根據對雞的相關致病性分群。Kawamura等將日本禽呼腸孤病毒77個株應用蝕斑減數試驗 分為5個血清型,Wood等(1980)統計了來自美國、英國、德國和日本呼腸孤病毒的相關性 ,雖然在異源型毒株間有很 大程度的交叉中和關係,但仍發現了11個血清型。至目前為止憑借中和試驗將 禽呼腸孤病毒分為11個血清型。由於交叉反應大量存在,因此有些群隻能作為亞型而不作為獨立血清型。Hieronymus 等(1983)將5個吸收不良綜合征的分離物分為3個血清型,而Robertson和Wilcox (1984)將10個澳大利亞分離物分為三個有很大程度交叉反應的群。顯然, 呼腸孤病毒經常以抗原亞型,而不是以獨特的血清型存在。
[BT4]3 培養禽呼腸孤病毒很容易從禽源細胞培養物中分離。常用的細胞培養是禽原代細胞 ,包括雞胚成纖維細胞、肝、肺、腎、巨噬細胞和睾丸細胞。最常用的是雛雞 腎細胞(2~6周齡),分離火雞株時可用火雞腎細胞。Barta(1984)等一些學 者認為,做蝕斑和分離病毒時,應選擇雞胚肝細胞。用各種方法分離本病毒的 比較結果表明,以雞肝細胞最敏感,其次為雞腎細胞,而成纖維細胞敏感性最 差。感染呼腸孤病毒的雞源細胞培養物能夠形成合胞體(一般在合胞體形成前 細胞內產生空泡),細胞漿內有包涵體(初期嗜酸性,後變嗜堿性)。某些毒株亦可適應於許多哺乳動物細胞係,如在綠猴腎(Vero)、乳倉鼠腎(BHK21 )、貓腎(CRFK)、Georgia牛腎(GBK),兔腎(RK)和豬腎(PK)細胞內生 長,但大多數毒株隻有在Vero細胞中產生CPE。經卵黃囊或絨毛尿囊膜接種,呼腸孤病毒容易在雞胚內生長。初次分離選用卵 黃囊接種,一般在接種後3~5天雞胚死亡,胚體因皮下出血而呈淡紫色。 絨毛尿囊膜接種,通常在7~8天後雞胚死亡,絨毛膜上有隆起的、分散的痘瘡 樣病灶,未死胚胎生長滯緩,肝淡綠色,脾腫大,心髒有病損。

 

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