摘要:以野生觀賞植物薄皮木的帶腋芽的莖段為外植體,建立組培快繁體係。結果表明:薄皮木組培的最適誘導培養基為MS 十6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L ,最適增殖培養基為MS +6-BA 5.0mg/L + NAAO.1 mg/L ,最適生根培養基為1 / 2 MS + IBA0.1mg / L.
關鍵詞:薄皮木;組織培養;快速繁殖
薄皮木為茜草科野丁香屬落葉小灌木,是一種野生觀賞植物,可作為盆景材料或園林綠化樹種。傳統的繁殖方法是采用種子繁殖或扡插繁殖,但是,通過野外調查和試驗觀察,一直未發現及獲得其成熟種子,而扡插繁殖生根較少,繁殖率低。該試驗利用組培方法進行薄皮木的繁殖,建立薄皮木快繁體係,解決常規繁殖方法存在的不足,以適應商品化規模生產的需要。
1 材料與方法
1.1 材料
選取野外la 生帶腋芽的幼嫩莖段。
1.2 方法
將帶腋芽的幼嫩莖段,在流水中衝洗材料30 min, 用70 %乙醇浸泡30s ,再用0.1%氯化汞滅菌8 min,然後,用無菌水清洗6 次,每次3 min,最後切取0.5 一1cm帶腋芽的莖段,接人培養基中。
1.3 培養條件
基本培養基為MS 培養基,瓊脂7 % ,蔗糖30 % , pH 5.8 ,附加不同濃度配比的激素。培養室溫度為24~ 26 ℃ ,光照時間14h ,光照強度2 000 lx.
2 結果與分析
2.1 誘導培養
以MS 培養基為基本培養基,附加不同濃度配比的6 - BA 和NAA, 30d 後統計薄皮木的誘導結果。
由表1 可見,以上5 種培養基上均能誘導出新芽,但出芽率有所差異,其中,4 號、5 號的誘導效果最好,接種數為30 ,其中有28 個莖段抽出新芽,出芽率最高,說明較高的濃度6-BA 更有利於新芽的誘導萌發。另外,培養基5 中的新芽長勢優於其它培養基,因此,適合薄皮木帶腋芽莖段誘導的培養基是MS 十6-BA 2.OMG/L + NAA 0.1 mg/L 。
2.2 增殖培養
以MS 培養基為基本培養基,附加不同濃度配比的6 - BA 和NAA (表2 、3 ) , 30d 後統計薄皮木的增殖情況。
2.2.1 6-BA 對薄皮木增殖的影響以NAA 的濃度為0.1 , 6-BA 的濃度不同,調查6-BA 對薄皮木增殖的影響。由表2 可見,1 號和2 號培養基中6-BA 濃度較低,增殖率也較低,因為接種的每一個莖段都含有2 個對生的腋芽,所以1 號和2 號培養基中薄皮木的增殖方式屬於短枝增殖型,即由莖段的腋芽形成新的幼苗;隨著6-BA 濃度的增加,增殖率也增加,當6 - BA 濃度為5.0mg/L 時,形成的叢生芽最多,增殖率最高,可達6.2 ,屬於叢生芽增殖型;但6-BA 濃度達到6.0 mg/L 時,增值率反而會降低。因此,薄皮木增殖培養基中6-BA 最適合的濃度是5.0 mg/L.
2.2.2 NAA 對薄皮木增殖的影響以6-BA 的濃度為5.0 mg/L , NAA 的濃度不同,調查6-BA 對薄皮木增殖的影響(表3 )。由表3 可見,4 種培養基的增值率都較高,2 號培養基的增殖率最高,且長勢良好,可達6.1 ,因此,薄皮木增殖培養基中NAA 最適合的濃度是0.1 mg / L 。由以上可知,對於薄皮木的增殖來說,6-BA 的作用至關重要,其影響要大於NAA ,但是,在NAA 不同濃度的處理中,NAA 為0.1 mg/L時,苗壯葉綠,長勢最好,因此,綜合考慮,薄皮木的最適增殖培養基為NAA十6-BA5.0 mg/L + NAAO.1 mg/L 。另外,試驗表明,在薄皮木增殖次數過多時,叢生芽質量會有所下降,葉片變小,長勢較弱,此時可降低6-BA 的濃度至2.0mg/L, 以達到壯苗的目的。
2.3 生根培養
以1 / 2MS 培養基為基本培養基,附加不同濃度的NAA 或IBA (表4 ) , 30d 後統計薄皮木組培苗的生根情況。由表4 可見,不同的激素對薄皮木生根的影響不同。在添加不同濃度的NAA 時,薄皮木組培苗的生根率均為O ;而添加IBA時,則表現為不同濃度的IBA生根率不同,IBA 濃度為0.1 mg/L 時,生根率可達100 % , 因此,薄皮木的最適生根培養基為1 / 2 MS + IBA 0.1mg/L 。
2.4 移栽及苗期管理
當薄皮木組培苗在生根培養基培養30d 後,生根數為6 一10 根,根長約2cm ,即可移栽。移栽前將棉塞去掉放置2d ,然後將苗小心取出,注意不要傷根,用清水將根上的瓊脂洗淨,轉入蜓石或珍珠岩或蛙石與珍珠岩的混合基質中,蓋塑料薄膜遮蔭,溫度控製在25 ℃ 左右,濕度在85 %左右,1 個月後即可移到苗圃進行常規管理。試驗表明,移植到各種基質中的薄皮木組培苗的成活率均在96 %左右。
3 討論
以薄皮木帶腋芽莖段為外植體,對薄皮木的組織培養與快速繁殖進行了一係列試驗,結果表明,薄皮木組培最適誘導培養基為MS 十6-BA2.0mg/L 十NAA 0.1mg/L ,最適增殖培養基為Ms 十6-BA 5.0mg/L 十NAA 0.1mg/L ,最適生根培養基為1 / 2 MS + IBA0.1mg/L , 薄皮木組培苗在蛙石和珍珠岩以及混合基質中均長勢良好,成活率可達96%。薄皮木是一種小灌木,分支多,外植體取材有足夠的數量,並且愈傷組織增殖型可能會發生變異,因此,以帶腋芽莖段為外植體,通過叢生芽增殖是進行薄皮木的組織培養和快速繁殖的一條最佳途徑。
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