雞傳染性支氣管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus)雞傳染性支氣管炎是雞的一種急性、高度接觸傳染性呼吸道疾病。其特征為病雞咳嗽,噴嚏 ,發出氣管口[KG-*8]羅音;幼雞流鼻液 ,蛋雞產蛋數量和質量下降;腎型病雞腎腫大、蒼白,有大 量尿酸鹽沉積等。雞不分年齡、性別和品種均易感,但主要侵害1~4周齡的幼雞。雞傳染性 支氣管炎病毒(IBV)是冠狀病毒科冠狀病毒屬的代表種。雞傳染性支氣管炎首先在1931年報道於美國,1936年確定本病的病原為病毒,1937年,該病 毒在雞胚內傳代獲得成功。現在美國、加拿大、英國、意大利、比利時、南斯拉 夫、日本和印度等地均有雞傳染性支氣管炎的發生。我國1972年首次在廣東發現該病,近年 來流行較廣。
1.形態特征雞傳染性支氣管炎病毒粒子略呈球形,直徑約80~120nm,有時呈多形性。在 雞胚尿囊液製備的負染標本中,可見囊膜上有許多梨狀纖突,呈放射狀排列,纖突長約20 nm,末端呈球形,纖突之間有較寬的間隙。這種纖突易從病毒粒子上脫落。將雞胚尿囊液中 的病毒置4℃18小時,作負染常可看到梨狀纖突的大量失落。Bingham和Almeida( 1977)觀察了雞傳染性支氣管炎病毒的內部結構,發現由RNA和蛋白質組成的螺旋狀核衣殼 寬約9~16nm,呈長頸瓶 樣或圈狀。
2.基因組結構特點IBV基因組具有冠狀病毒基因組的一般結構特點 。Boursnell等(1987)測定了其全部序列,共有27 608nt(包括poly(A)尾),它比目前所知的 其它任何RNA病毒都要大得多,5'末端和3'末端具有明顯的同源性。5'末端20kb為1個單一 基因,它很可能轉錄翻譯成依賴於RNA的RNA聚合酶。分析此20kb基因序列,發現有兩個開放 閱讀框架(ORF),分別為ORF1和ORF2。由負股RNA轉錄成的6種mRNA具有相同的3'末端,5'端 的 先導序列約為60nt。mRNA E、C和A分別編碼病毒的3種主要結構蛋白S、M和N,這3種mRNA 的總長約為87kb。IBV基因組結構見圖23-4。圖23-4IBV基因組結構示意圖——自Boursnell
3.血凝性未經處理的IBV不能凝集紅細胞,但是雞胚尿囊液中的病毒以1%胰蛋白酶 (或乙醚)在37℃處理3小時之後,則能凝集雞紅細胞。但IBV並不含有血凝素糖蛋白HE,一 般認為,這是由於雞胚尿囊液中有1種能吸附病毒和紅細胞表麵的血凝素抑製物,它能阻止 病毒吸附紅細胞。用胰蛋白酶或乙醚處理後,這種抑製物遭到破壞,因而能發生血細胞凝集 作用。這種反應 是非特異性的,至今尚未證實特異性抗血清的血凝抑製作用。但是,Cunningham(1966)曾用DEAE柱層析法,從感染性病毒中分離出血凝素,直徑為60~70nm。 這種血凝素由51%蛋白質、34%脂質和少量糖類以及RNA組成。
4.幹擾現象雞傳染性支氣管炎病毒能幹擾雞新城疫病毒在雛雞、雞胚和雞胚腎細胞培養物內的增殖,而 雞腦脊髓炎病毒則又能幹擾雞傳染性支氣管炎病毒在雞胚內的增殖。有人認為傳染性支氣管 炎病毒能對雞體內的敗血性支原體(Mycoplasma gallisepticum)和雞嗜血杆菌(Haemophil us gallinarum)呈現協同作用。
5.理化學特性雞傳染性支氣管炎病毒粒子含單鏈RNA,對RNA酶敏感。5溴脫氧尿核苷和5氟 脫氧尿核苷不 能抑製病毒增殖,因而證明其核心內含RNA,而不是DNA。IBV有14~16種多肽,其中4 種是糖基化的。蔗糖浮密度為112~114g/cm3。對酒精、乙醚、氯仿、膽鹽和其它脂 溶劑敏感。用 乙醚或吐溫80破壞病毒粒子,不能使其像副粘病毒那樣釋出核蛋白片段——核衣殼。病毒的熱穩定性隨毒株的不同而異,例如新分離毒株可被56℃15~30分鍾滅活,而適應於雞 胚的毒種可在此溫度中存活3小時以上。雞胚尿囊液中加入20%馬血清,可提高病毒對熱的穩 定性。水中的病毒在室溫最少存活24小時。1mol/L氯化鎂可以提高病毒在50℃的穩定性。 病毒在 低溫保存穩定。雞胚尿囊液和細胞培養物中的病毒,可在-30℃~-60℃存活幾個月。凍幹真 空密封的病毒,在低溫下存活可達24年,但在37℃存放6個月,則完全滅活。將含病毒組織 置於50%甘油鹽水中,也能良好保存。Dubose等報道雞胚尿囊液病毒在pH2和pH12中,室溫放置1小時,仍有活力,但是 其他學者認為並非所有的雞傳染性支氣管炎病毒都有這樣的耐酸、耐堿能力。病毒在pH78 穩定性最好。雞傳染性支氣管炎病毒雖被認為對乙醚敏感,但20%乙醚隻能降低病毒的滴度,而 不能使其完全滅活。02%去氧膽酸鈉溶液在室溫下作用10分鍾,即能完全滅活雞胚尿囊液 中的病毒。雞傳染性支氣管炎病毒有抵抗胰蛋白酶的作用 ,每毫升含胰蛋白酶40mg的胰蛋白酶溶液在37℃ 1小時,不影響病毒的感染性。1%煤酚、1/萬高錳酸鉀、70%酒精和1%福爾馬林均可在室溫條件下幾分鍾內殺死病毒。但1% 石炭酸在室溫下1小時,不能滅活病毒。
6.抗原性已經報道的雞傳染性支氣管炎病毒血清型有馬薩諸塞(Massachusetts)、康涅狄格 (Connecticut)、霍爾泰(Holte)、格蘭(Gray)、JMK、衣阿華97(Iowa97)、衣阿華609(Iowa 609)、特拉華2868(Delaware 2868)、特拉華2897(Delaware 2897)、SE17、克拉克333(Clar k 333)、佛羅裏達(Florida)和阿肯色99(Arkansas 99)等13個。Hopkin(1974)應用固定 量病毒和不同量血清的交叉中和試驗,對19個蝕斑純化的毒株進行比較研究,結果將其分為 7個血清型,即馬薩諸塞型、康涅狄格型(佛羅裏達、克拉克333、衣阿華99)、佐治亞型(Geo rg ia)、SE17型、特拉華型(JMK、霍爾泰、格蘭)、衣阿華97型、衣阿華609型和新罕布什爾(Ne w Hampshire)型。另外還有第8個血清型,即澳大利亞T株。有人認為雞傳染性支氣管病毒就 隻有馬薩諸塞和康涅狄格兩個主要血清型,其它可能都是一些變型。引起腎變病型的毒株主 要是澳大利亞T株、霍爾泰型、格蘭型及馬薩諸塞型。在我國流行的毒株主要是馬薩 諸塞型。各血清型之間沒有或僅有部分的交互免疫作用,因此常給本病的診斷和預防帶來一 定的困難。應用乙醚處理和氯化銫密度梯度離心分層的病毒懸液,在免疫瓊脂擴散試驗中至 少可以測出3種不同的可溶性抗原(免疫瓊脂擴散板上有3條沉澱線):1種存在於病毒粒子 內,其餘2種分布於病毒的表麵。
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