流行性乙型腦炎病毒

  　流行性乙型腦炎是一種中樞神經係統的急性傳染病。由蚊為媒介而 傳播，以高 熱和狂暴或沉鬱等神經症狀為特征。具有明顯的季節性和一定的地理分布區，多發於夏秋蚊 類大量孳生的季節。1924年首先證實於日本，由一個病人屍體腦組織中分離到病毒。19 34～1936年，日本馬腦炎大流行，用小鼠由病馬腦組織中分離到病毒，進而證明這種 病毒的性狀與從人腦中分離的病毒完全一致，隨後又曾從豬、牛、山羊等動物體內分離 到同樣的病毒，故稱日本乙型腦炎病毒或日本腦炎病毒(JEV)。　　我國流行性乙型腦炎病例(人)的最早報道，是在1921年。1934年用中和試驗加以證 實。1940年由屍體腦組織中分離到病毒，並證明與日本乙型腦炎病毒相同。全國解放後 統一命名為流行性乙型腦炎病毒，簡稱乙腦病毒。　　我國有關馬的乙型腦炎病例及其發病流行情況，開始報道於1942年。

　　1.形態特征　　乙腦病毒是黃病毒科中最小的病毒之一。病毒粒子的直徑為30nm左 右,但 病毒結構與其它黃病毒相似。電子顯微鏡觀察可見核心、囊膜和囊膜突起等構造(見圖221 )。在CsCl中的浮密度為124～125g/cm。提純的囊膜突起具有血凝活性，而且隻含糖 蛋白。在用蛋白酶 處理後，囊膜突起喪失，血凝活性也消失。最近還發現乙腦病毒的血凝素也有輕重兩種。

　　2.抗原性　　乙腦病毒在抗原性上與墨累山穀腦炎病毒(Murray Valley encephaliti s viru s)、西尼羅病毒(West Nile virus)和聖路易腦炎病毒(St. Louis encephalitis virus)比 較接近。在血凝抑製試驗中　，這4種病毒似乎在黃病毒中構成一個亞群。乙腦病毒引起 的免疫力，也對西尼羅病毒等呈現一定程度的中和作用以及保護作用。　　　乙腦病毒的各個毒株，雖然常在毒力和血凝特性上具有比較明顯的差別，但是看來 並沒有明顯的抗原性差異。人們一直關心乙腦病毒是否存在毒型的問題，這是理所當然的， 因為這是乙腦流行病學及其防製工作上的一個重要依據。疫苗生產中多年來采用的 一個病毒株即“中山株”，這是1935年由日本三田村等人自患者腦組織分離獲得的。但 在1958年，又從蚊體內分離到1株與中山株不盡相同的新毒株。 應用中和抗體吸收試驗 或交叉保護試驗都可看出兩者的區別，命名為JaGArol株。 在用中山株疫苗接種的兒童 血清內，其對中山株病毒的抗體效價明顯高於其對JaGArol株病毒的抗體效價， 但在應 用這兩個病毒株製備的抗原分別測定自然發病者的血清時，卻呈現同樣的抗體效價。這 表明，中山株與JaGArol株病毒的抗原性及其與抗體的結合力沒有差異， 但在抗原成 分的組成或構造上有所不同。　　Kobaynshi等利用單克隆抗體， 采用血凝抑製試驗分析了11個日本乙型腦 炎的病毒株的抗原關係。　　已經證明，乙腦病毒的血凝素的主要成分是多肽，而其補體結合抗原成分則是一種 核蛋白，由一個長鏈和一個短鏈構成。　　應用蔗糖密度梯度離心法將病毒材料高度精製以後，再用吐溫80和乙醚處理， 並 用刀豆素A吸附沉澱，沉澱物再用α甲基甘露糖甙析出，即可獲得比較純淨的血凝素抗 原，上清液則為補體結合抗原。分別再經氯化銫密度梯度離心法進一步精製後，給小鼠 作免疫注射試驗。發現血凝素抗原引起中和抗體和血凝抑製抗體，對小鼠呈現預防 感染作用；補體結合抗原則隻引起補體結合性抗體，沒有預防感染的作用。　　朱家鴻等發現乙腦病毒具有溶解鴿和家兔紅細胞的性能，這種性能可被特 異性免疫血清抑製。使紅細胞在pH6.4的溶液中吸附病毒，然後在偏酸或偏堿條件下於3 7℃放置4～6小時，即可出現明顯的溶血現象。7株對小白鼠具有較高致死力的乙腦病毒 都有較高的血凝效價，對其中5株進行了溶血性測定，也都有明顯的溶血特性。 強毒株 在連續通過倉鼠腎細胞後毒力下降，血凝效價和溶血性能也同時降低，因此該氏等認為 溶血性和血凝性可能都是強毒株的共性。　　乙腦病毒的抗原性較強，自然或人工感染的動物一般都能產生較高效價的中和抗體、 血凝抑製抗體、沉澱抗體和補體結合抗體。

　　3、培養　　乙腦病毒易在7～9日齡的雞胚內適應和增殖。病毒效價在接種後48小時 左右達 最高峰，以胚體內的病毒含量最高，可達　106～107個小白鼠MLD。雞胚 大都死亡。　　乙腦病毒可在多種組織培養細胞內增殖，例如雞胚成纖維細胞、鼠胚的肌和腎細胞、 牛胚腎細胞、人胚的肺和腎細胞、人羊膜細胞、豬腎細胞、倉鼠腎細胞以及BHK21、PK 15、HeLa、Vero等繼代細胞和傳代細胞。但通常隻在倉鼠腎原代細胞、 豬腎和羊胎腎 細胞上恒定地引起明顯的病變，並可在瓊脂覆蓋下的雞胚成纖維單層內產生清晰的蝕斑。乙 腦病毒也可在蚊的組織培養細胞內增殖，並產生較高效價的病毒，但是一般不引起細 胞病變，雖在瓊脂覆蓋下經常可台產生蝕斑。　　必須指出，乙腦病毒在細胞培養物中 的致細胞病變不僅決定於細胞的種類，而且也決定於毒株和具體的培養條件，例如郭輝 玉用11株乙腦強毒進行細胞培養研究，發現其在雞胚肌皮組織成纖維細胞、腿 肌及心肌成纖維細胞內引起明顯的細胞破壞，但卻不能使雞胚肺、肝、脾或腎的上皮細 胞發生可見病變。乙腦病毒還可引起鴨胚肌皮成纖維細胞和豬腎上皮細胞的明顯破壞， 但人胚肌皮成纖維細胞、人胚腎細胞及猴腎上皮細胞隻被個別毒株引起輕微的細胞病 變。鼠胚細胞、山羊膜細胞、HeLa細胞、Detroit6細胞、FL細胞等則即使接種大量病 毒也不出現細胞病變。乳鼠極易感，腦內接種經約72小時即發生腦炎而死亡，其它途徑也 易感，但潛伏期延長。