禽類流感病毒

雞流感首次報道於1878年(意大利)。1955年證明雞流感病毒含有甲型流感病毒的核蛋白。為區別於雞新城疫，又稱真性雞流感或歐洲雞流感病毒，實際上它就是禽流感病毒。現在常用甲型禽流感病毒作為統稱。其所引起的疫病又稱真性雞瘟或歐洲雞瘟。1956年發現甲型流感病毒也能引起鴨的疾病(英國和捷克斯洛伐克)，接著證明加拿大1952年從鴨分離的一株病毒也是甲型流感病毒。目前在世界各地分離的禽類流感病毒已達近千種以上，且在至少50種禽類中發現了流感病毒或其抗體。迄今所有的甲型流感病毒的各種表麵抗原，基本上都能在禽類流感病毒中找到。郭元吉等在我國17種不同野鳥中發現流感病毒的分布也極為廣泛。

〖HT5SS〗禽流感在歐、美、亞、非洲等不少國家中均有發生，曾是世界性流行病，近年來已較少發生，但在某些國家仍為地方流行性疾病。Alexander列舉了自1975年以來得到證實的5次暴發，即發生在澳大利亞(1975年和1985年)、英國(1979年)、美國(1983～1984年)和愛爾蘭(1983～1984年)的暴發。我國佛山農牧高等專科學校和哈爾濱獸醫研究所從發病雞群中分離到甲型禽流感病毒(H9)。徐為燕等從鴨群中分離到15株甲型流感病毒，分別屬於H4、H5和H6，但均未引起禽流感流行。

 

1.抵抗力〖HT5SS〗禽流感病毒在低溫、幹燥或甘油中可保持活力達數月或一年以上。在幹燥塵土中的病毒能活存14天。在冷凍的禽肉和骨髓中可活存10個月。但在直射陽光下，經40～48小時即可被滅活，在65～70℃加熱數分鍾即滅活。常用消毒藥品很容易將該病毒滅活。

2.培養〖HT5SS〗禽類流感病毒能在9～11日齡雞胚中生長，病毒可以在雞胚中達到較高滴度，並具有裂解的HA。有些毒株接種雞胚尿囊腔後可使雞胚死亡，並引起雞胚的皮膚和肌肉充血、出血。多數毒株能在雞腎細胞和雞胚成纖維細胞等細胞培養物上生長，並常產生細胞病變。大多數毒株可在雞胚成纖維細胞單層上形成蝕斑。雞胚成纖維細胞是最常用的原代細胞培養物，而犬腎傳代細胞係(MDCK)是最常用的傳代細胞係。某些毒株，例如鴨流感病毒還能在人和牛胚的組織培養細胞內增殖，產生細胞病變。病毒在細胞培養物內增殖，可由血細胞吸附試驗檢出。也有在HeLa細胞內增殖的報道。

3.抗原性〖HT5SS〗各種禽類流感病毒都有甲型流感病毒的核蛋白抗原和內膜蛋白抗原。禽流感病毒的毒株分類基於HA和NA亞型。據表麵抗原的鑒定結果。從禽類分離到的流感病毒有14種不同的血素凝和9種不同NA。這些抗原又以不同的組合，產生極其多樣的毒株。此種組合又似乎沒有一定的模式，而且抗原的性質與病毒的生物學特性無關，特別是與其毒力無關。在抗原特性相同的病毒中，有毒力強的毒株，也有毒力弱的毒株。為了鑒定病毒的HA和NA，要應用一組對不同亞型特異的抗血清或單克隆抗體，對分離物進行血凝抑製(HI)和NA抑製(NI)試驗。屬於同一亞型抗原性相關水平的比較，以單克隆抗體，用HI、ELISA，中和試驗等方法進行。某些禽類流感病毒還有相似於人流感以及馬流感病毒的表麵抗原。Zhezmer等還由雞分離到一株在表麵抗原上與人流感A/香港/1/68(H3N2)完全一樣的病毒。抗HA抗體在抗感染的保護作用中起到主要作用，而抗NA抗體的保護作用較低。各種動物在感染後均可在其血清中找到抗核蛋白抗體、血凝抑製抗體和NA抑製抗體。

4.病原性〖HT5SS〗禽類流感病毒的易感動物包括雞、火雞、珠雞、野雞、鵪鶉、鷓鴣、燕鷗、鴿、鴨和鵝等。禽類流感病毒的致病力差異很大，有些毒株的發病率雖高，但死亡率較低。從禽類中分離到的大量流感病毒，證明為高致病力毒株者隻是極少數。有些毒株的致病力很強，如雞流感病毒的某些毒株，皮下、肌肉、腹腔或靜脈注射極少量的含毒血液，即可使雞感染發病。在自然條件下，雞群的發病率和死亡率都可高達100%。還有許多病毒為低到中等毒力毒株。禽流感的傳染源主要是病禽，病毒主要通過病禽的各種排泄物、分泌物和屍體等汙染飲水和飼料，經消化道或傷口傳染。病毒也存在於病禽的所有組織和血液中。急性病雞的血液具有極高的感染性，即使稀釋幾萬萬倍，仍可使易感的成年雞發病死亡。病禽各組織中大多含有高滴度的病毒，病毒隨眼、鼻等分泌物以及糞便排出體外。呼吸道和消化道是主要的感染途徑。但是有關禽流感的詳細感染方式和發病機理，迄今尚未充分闡明。郭元吉等從鴨飲過的186份水標本中分離到58株甲型流感病毒，並指出甲型流感病毒在鴨類中除糞便—水—口途徑外，口—水—口也是主要的傳播途徑之一。有從病禽卵中分離出禽流感病毒的報道。據此有人認為本病可以通過禽卵傳播。有人認為野鳥也可以傳播本病，腹腔注射和口服少量病毒材料，都能引起感染發病。人工感染可使小鼠、雪貂等哺乳動物發病。由禽流感病毒引起的疾病，因家禽品種、年齡、性別、有無並發症以及毒株毒力和其它條件而不同，症狀差異很大。病禽通常精神萎頓，不活動，食欲減退，消瘦，母雞產蛋減少，並有輕重不等的呼吸道症狀，例如咳嗽、噴嚏和呼吸時出現羅音等。病禽流淚，羽毛鬆亂，身體卷縮，頭和麵部發生水腫，竇炎，皮膚發紺，並有神經紊亂症狀，經常伴有下痢。這些症狀可單獨出現或幾種同時出現。某些禽類發病迅速，往往突然死亡，生前看不到任何症狀。本病常突然暴發。潛伏期一般為2～5天。流行初期的患雞，常不表現任何症狀而突然死亡。急性病例呈半昏迷狀態，高度衰弱，冠及肉垂發黑；頭部浮腫，眼周圍、肉垂和頸喉部均出現腫脹，眼閉合，常引起氣喘和窒息，鼻孔內含有帶血的分泌物。病雞常發生水樣下痢，多於2天內死亡。死亡率為40%～100%。亞急性病雞有的出現神經症狀，共濟失調，驚厥，癱瘓和失明。禽流感的特有病變是腺胃和腹部脂肪出血，有時在胸骨內麵，甚至全身組織發生出血性病變。頭、眼瞼、肉垂、頸和胸等部位的腫脹組織呈淡黃色。肝、脾、肺等髒器常有灰黃色小壞死灶。腹腔和心包有充血和積液。鴨流感的主要症狀以眶下竇的腫脹為主，竇中含有膿性粘液或幹酪樣滲出物，病鴨表現疲乏，呼吸加快和喙部發紺。火雞流感的症狀和剖檢變化，與雞相似，但較緩和。

5.免疫〖HT5SS〗禽類流感病毒可使機體產生免疫性。少數病後存活的雞，都有堅強的免疫力，血清中和抗體效價較高，給易感禽類注射後，可使其獲得2～3周的被動免疫。用福爾馬林滅活的病毒作兩次免疫接種，而後分別以多株致死性禽類流感病毒進行交叉攻毒，結果證明，以同種或同一亞型病毒免疫的雞，能獲得完全保護，並發現HA相同的病毒之間能夠交叉保護，但NA相同的病毒，隻有部分的保護，說明免疫保護性主要是由抗HA抗體提供的。迄今已有多種不同類型疫苗研製和試用的報道，包括以福爾馬林或石炭酸滅活的滅活疫苗以及應用雞胚、鴿或人類組織培養細胞傳代減毒的弱毒疫苗，據雲都有較好的免疫原性。但因禽類流感病毒至少有14種HA抗原，彼此間缺乏明顯的交叉保護作用，實踐上又很難製備包括各亞型，且對各亞型都有良好免疫原性的疫苗。這就給疫苗的應用，帶來了困難。Beard等報道了由火雞分離出來的一株自然弱毒。此株(A/火雞/俄勒崗/71)具有H7和N3的表麵抗原，給雞作鼻內、靜脈內或氣溶膠等途徑接種，均無毒力。以其免疫的雞能抵抗強毒株(A/FPV/荷蘭/27)的攻擊。現已用基因工程技術分離禽流感病毒的HA基因和NA基因，插入到病毒載體，如痘苗病毒、禽痘病毒、杆狀病毒和反轉錄病毒，並在實驗室水平成功地用於家禽的免疫，是有前途的基因工程疫苗。需要解決的問題是它們在控製不同家禽群體中的不同致病力的流感病毒的保護作用。

6.診斷〖HT5SS〗根據流行病學、臨床症狀和病理變化的綜合分析，可做出初步診斷，確診須靠病毒的分離、鑒定或血清學試驗。分離病毒用的病料，是以棉拭子從死雞(或撲殺的病雞)呼吸道和竇部采集的滲出物，或采取脾、肺等髒器。急性病例可直接采取病雞的血液作為接種材料。一般應用9～11日齡雞胚，采用尿囊腔和羊膜腔同時接種的方法分離病毒。接種後的雞胚，置35℃培養48～72小時。必須注意，某些毒株增殖速度很快，可使雞胚在48小時以內死亡，某些毒株則增殖很慢，接種雞胚甚至長期不死。因此必須每日進行兩次檢卵，如發現死胚，應即采集尿囊液和羊水，進行血凝試驗。如在接種後72小時雞胚仍健活，則應將其移置於4℃冰箱，經8～12小時使血管收縮，然後采集尿囊液和羊水，進行血凝試驗。經盲傳3～5代後仍未發現紅細胞凝集時，即判為陰性。血凝試驗陽性時，即可應用各種標準免疫血清進行病毒鑒定。以診斷為目的時，可用血凝抑製試驗和ELISA作血清檢查。采集急性期和恢複期雙份血清，當出現4倍以上抗體升高，即可診斷為流感。免疫擴散試驗可用於檢測禽類血清中的抗核蛋白抗體，效果較好，但不能分辨病毒的亞型或株。