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晚香玉組培技術研究二



錄入時間:2009-7-10 14:09:12 來源:青島betway必威西汉姆联生物

2.3 不同濃度的6-BA NAA 2 個品種愈傷組織誘導分化的影響

將實驗中誘導的愈傷組織轉接在9 個處理的培養基上.20d 轉接1 次,30d 後結果分析見表3

由表3 、圖2 、圖3 可得:2 個品種的分化效果和最佳分化培養基有差異,在單瓣葉片分化中,最佳配方為:MS + 6-BA1.0mg / L + NAA0.5mg/L , 6-BA / NAA 的比值為2 : l ;重瓣葉片分化的較適培養基為:MS + 6 – BA0.5mg/L + NAA0.2mg/L , 6-BA / NAA 的比值為2.5 : 1
2.4
不同培養基對2 個品種試管苗生根的影響及其對比性研究
根據正交設計中的4 因素3 水平L9 ( 34 )設計,將實驗中長度約2cm 左右且基部帶有小鱗莖的芽取出,插人生根培養基中誘導生根20d 後結果見表4 , 直觀分析見表5 、方差分析見表6
從上表分析可得:極差x ( 1 ) > x ( 4 ) > x ( 3 ) > x ( 2 ) ,根據極差的大小順序排出影響試管苗室生根的因素主次順序為:培養基>NAA > 6-BA > KT 。各因素最優水平分別為x ( l )水平2 , x ( 2 )水平2 , x ( 3 )水平3 , x ( 4 )水平l ,即1 / 2 MS 培養基,KT0.2mg/L, N AAO.5mg/L, 6-BAO.2mg/L
由方差分析表得出:因子培養基對生根的影響最大,處理1 2 之間差異達顯著水平,與處理3 之間差異達到極顯著水平,因子NAA 在處理1 2 之間差異達到顯著水平,因子KT 在處理1 3 之間差異達到顯著水平,因子6-BA 影響最小,未達到顯著水平,這與直觀分析結果一致。
2.5
煉苗移栽
試管苗出瓶最好選擇在生長旺盛的春季,不定根達到1.5 2cm 時可以出瓶移栽。生根苗從培養基中取出後,將根部的培養基衝洗幹淨,移栽於壤土:腐葉土:河沙為5 : 3 : 1 (體積比)基質中,成活率可達98 %。
3
結論
對晚香玉材料進行誘導培養,取材部位和時間差異關係到快速繁殖的成敗。經過初步試驗葉片比鱗莖更適合做外植體材料,葉片可大大降低汙染率,而鱗莖的汙染率極高,這可能與晚香玉病毒病有關。在取材時間上如在生長季節剪取生長旺盛的部分作為外植體,容易形成愈傷組織和不定芽。當母株停止生長或進人休眠期,則不易誘導細胞分裂和分化。而對於外植體大小而言,過大的外植體不僅浪費材料還容易造成汙染,但過小會導致存活率較低,試驗發現將晚香玉葉片切成約1 cm 左右的小塊,最適合培養。由於晚香玉自身組織從表麵向培養基釋放褐色物質,導致培養基逐漸變成褐色,外植體也隨之進一步變褐死亡。為控製褐變,可以在培養基中加活性炭吸附,褐變可大幅度減少,效果十分明顯。
激素是植物組織培養器官分化的關鍵因素。器官的形成受製於培養基中不同激素的相對濃度配比,而不是這些物質的絕對濃度。有人在對楊樹葉片的愈傷誘導和愈傷組織分化中也得出類似結論。本試驗在對晚香玉葉片的愈傷誘導、分化和生根的研究中也發現激素之間存在一定的相關性,即最佳誘導愈傷形成和愈傷組織分化的過程中6 BA/NAA 的比值在2 : 1 3 : 1 之間,但NAA 濃度如果高於1.5mg/L或低於0.2mg/L誘導效果顯著下降。這也進一步證明了Sk00g Miler 提出的關於植物激素可調控器官發生的概念― 通過改變培養基中生長素和細胞分裂素的相對濃度可以控製器官的分化。

 

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