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菊苣組織培養及無性係建立的研究一



錄入時間:2009-7-10 14:40:17 來源:青島betway必威西汉姆联生物

摘要:以具有有利變異性狀的菊苣葉柄為材料。進行了組織培養及無性係建立的研究。結果證明:MS+BA0.4mgL+24--D丁酯1.6mgL是誘導葉柄形成具有分化能力愈傷組織的理想培養基:12 MS+AgN0320.5mgL+BA0.3mgL+NAA0.1mgL是愈傷組織和不定芽分化的理想培養基;13MS+IAA0.2~0.4mgL是變異菊苣不定芽生根的理想培養基。

關鍵詞:菊苣;無性係;快速繁殖

菊苣又稱法國苦苣、吉康利、苦白菜等,屬於菊科萵苣屬多年生草本植物,菊苣的嫩葉可以炒食、做湯或做色拉:軟化栽培後的菊苣芽球可用以生吃。或做成鮮美開胃的涼拌菜:歐美等國還有人把菊苣的肉質根加工成咖啡的代用品或添加劑。由於菊苣中含馬栗樹皮素、馬栗樹皮甙、野萵苣甙、山萵苣素和山萵苣苦素等苦味物質,作為蔬菜食用具有促進膽汁分泌、改善睡眠、調節新陳代謝等功效,使其成為很受人們歡迎的新興蔬菜。由於受到環境的影響.過去在北方難以進行栽培.但因近年來市場對菊苣的需求量很大.遼寧南部地區的農民開始進行栽培.在對菊苣的栽培品種——中囤一號進行栽種中.偶爾可以發現生長非常旺盛、可食嫩葉產量高、適合在遼寧南部地區栽培的優良變異植株.用這種變異植株的種子進行繁殖,後代由於性狀分離等原因.有利性狀無法保持。為此.2004年當人們在種植中再次發現這種優良變異植株時.我們采用組織培養的方法對菊苣的優良變異植株進行了組織培養及無性係建立的研究,現報道如下:
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材料和方法

1.1材料及滅菌

將田間生長旺盛、具有有利變異性狀的菊苣采回來後,切去葉片.將葉柄放到磨口瓶中.用自來水衝洗4次後,用0.05%安利洗滌液洗滌30min.洗至無泡沫時置於超淨工作台上.75%乙醇滅菌20s後迅速用無菌水洗滌3次,接著用0.1HgCl2溶液振蕩滅菌1min,再用0.05HgCl2溶液振蕩滅菌12min,接著用無菌水振蕩洗滌6次。即獲得無菌材料。

1.2培養條件

培養基以MSI2MS13MS為基本培養基.附加不同濃度的細胞分裂素BA和生長素IAANAA24D丁酯。以MS為基本培養基時.加蔗糖30gL:以l/2MS為基本培養基時.加蔗糖15gL;以13MS為基本培養基時,加蔗糖10gL。培養基腖力強度為180gcm2pH5.8~6.0。培養溫度18~26,光照lO~12h/d.光照強度2000~3000lx

1.3試驗方法

1.3.1 愈傷組織誘導培養將無菌葉柄切成0.2cm左右的塊.接種到以MS為基本培養基.附加不同濃度的BANAAIAA24D丁酯的培養基上.進行愈傷組織的誘導,60d後觀察統計。

1.3.2愈傷組織及不定芽的分化培養 將在誘導菊苣葉柄形成愈傷組織的理想培養基上誘導出的葉柄顆粒狀愈傷組織接種到附加不同濃度BANAAl/2 MS+AgN0320.5mgLl/3MS+AgN0320.5mg/L培養基上,進行愈傷組織的分化培養。
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不定芽生根培養 將上述分化培養的不定芽從基部剪下.接種到以12MS13MS為基本培養基.附加不同濃度IAANAAIBA的生根培養基上進行生根培養。培養到l0d時有的培養基上可見形成根原基.培養30d時觀察統計。

1.3.4試管苗移栽 將生根苗培養瓶瓶塞打開.置於光照約5000Lx、溫度20左右的條件下煉苗4d後,用鑷子取出,洗去基部培養基.移栽到上麵鋪著56cm厚不同基質的溫室苗床上.20d後觀察統計。

 

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