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副痘病毒屬



錄入時間:2009-7-13 10:00:51 來源:青島betway必威西汉姆联

七、副痘病毒屬(Parapoxvirus) 副痘病毒屬包括羊接觸傳染性膿皰性皮炎病毒、假牛痘病毒、牛丘疹性口炎病毒、新西蘭紅 鹿副痘病毒,其中接觸傳染性膿皰性皮炎病毒是代表種。 本屬病毒粒子呈卵圓形,外形獨特,猶如由繩索捆綁的被卷。DNA 大小為130~150kb,G+C含量約64%,明顯高於其它痘病毒。對乙醚和氯仿敏感,不耐pH3 0, 60℃加熱30分鍾使其滅活。幹 燥痂皮內的病毒可以長期活存。副痘病毒屬中所有病毒的基因組中央區域核苷酸序列有很高 的同源性,但末端序列沒有同源性。副痘病毒在血清學上具有交叉反應性。 本屬病毒一般不能在雞胚絨毛尿囊膜上生長。可在綿羊或羊的組織培養細胞內增殖,並產生 細胞病變。某些成員如假牛痘病毒,可在來源於人的組織培養細胞內生長。副痘病毒不產 生血凝素。 副痘病毒主要感染偶蹄獸。人在接觸病畜或汙染物後也可感染。感染副痘病毒的人,在臨床 、組織學和血清學上以及電鏡檢測的特征基本一樣,很難區別是接觸傳染性膿胞性皮炎病毒 、假牛痘病毒,還是牛丘疹性口炎病毒。因此有人建議稱這三種副痘病毒引起的人類疾病統 稱為“農場痘”(farmyard pox)。但DNA雜交技術和免疫電鏡的表麵結構分析能夠區分這 三種病毒。 黑猩猩、紅鬆鼠、犬、貓也有感染副痘病毒的報道。 實驗證實,熱滅活的副痘病毒具有免疫增強劑作用。
〖BT(3+1〗 (一)羊接觸傳染性膿皰性皮炎病毒 (Orf virus)〖BT)〗 〖HT5K〗同義名:羊接觸傳染性臁瘡病毒,羊口瘡病毒, 羊接觸傳染性膿皰性口炎病毒。 〖HT5SS〗接觸傳染性膿皰性皮炎是主要侵害綿羊、山羊的一種接觸傳染性、嗜上皮性傳染 病。以在口唇 、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水皰、膿皰和痂皮為特征。羔羊最為敏感,另外,麝牛、 鹿 、人也可感染。對自由放牧鹿不會產生嚴重的損傷,僅在口腔粘膜出現增生性損害。本病 最早於1920年發現於歐洲,現已廣泛分布於全世界。我國新疆、甘肅、青 海、內蒙以及東北幾省的主要養羊地區均有本病發生的報道。 〖BT4〗1.形態和理化學特性 於負染標本中,病毒粒子長250~280nm,寬170~200nm,呈橢圓形的線團 樣。除橢圓形顆粒外,還有錐形、磚形以及特殊的線團樣球形粒子。病毒粒子表麵 呈特征性的編織螺旋結構——繩索樣結構相互交叉排列, 圍繞病毒粒子的長軸作8字型 纏繞,但也有呈其它纏繞形式的。病毒粒子外常有囊膜包裹。 在超薄切片中,可於感染上皮細胞的胞漿內看到不同類型的病毒粒子。病毒粒子的 外層由較厚的囊膜包裹,內為圓錐形或卵圓形核心。核心的兩側為側體。常可在感染細 胞的胞漿內發現具有雙層囊膜的病毒粒子,見圖31-4。 用感染牛丘疹性口炎病毒恢複期牛血清進行免疫電鏡檢查時僅與羊接觸傳染性膿皰性皮炎病 毒的外殼發生抗體反應。 病毒粒子核心中含有雙鏈DNA。病毒DNA分子 量為888×106Da。病毒對幹燥具有極高的抵抗力,幹燥痂皮內的病毒 可以活存幾個月乃至幾年。在實驗室 冰箱內保存,活力可維持15年之久。汙染羊廄在將病羊移走後仍有傳染性。秋季汙染的 牧地,翌年春季仍能使健康羊發生感染。但痂皮內的病毒於夏季暴曬30~60天,即喪失 致病力。病毒對乙醚和氯仿敏感。可耐55℃加熱30分鍾,但60℃30分鍾和煮沸3分鍾, 均可使其滅活。
 〖BT4〗2.抗原性羊接觸傳染性膿皰性皮炎病毒與綿羊痘等正痘病毒沒有交叉保護 力, 但耐過山羊痘的動物對接觸傳染性膿皰性皮炎病毒具有一定免疫力。 接觸傳染性膿皰性皮炎病毒與痘苗病毒具有許多同源性的蛋白質。在本病毒基因組中右末 端30kb DNA編碼的10kDa多肽與痘苗病毒10kDa融合蛋白質有31%同源性;基因組中左末端1 55kb基因編碼的4167kDa蛋白質(p42K)與痘苗病毒囊膜抗原p37K有42%同源性;基因組中央 的33kb BamHI片段中有3個閱讀框架F2L、F3R和F4R,它們編碼的蛋白質分別與痘苗病毒的 RAP94(與RNA聚合酶相關的蛋白質)、35kDa病毒囊膜抗原和拓撲異構酶有同源性,而且這兩 種病毒基因組中閱讀框架的排列方式極 其相似。表明它們有共同進化源。 有人用4株接觸傳染性膿皰性皮炎病毒與它們的抗血清進行交叉中和試驗,發現4株病毒的 交叉中和反應都是單向的。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳對11株病毒多肽的結構分析表明:除了 分子量 在37 000~44 000Da區域的多肽不同外,其它區域蛋白質譜圖相似,並證實不相同的多肽 是病毒粒子的表麵成分和表麵細管成分(surface tubules)。 由世界各地分離病毒的抗原性不盡一致,它們基因組的限製性酶切圖譜也存在差異。但 同株病毒基因組的限製性酶切圖譜又比較保守。各株之間可以互相產生交叉免疫保護力。 在補體結合試驗和瓊脂擴散試驗中,本病毒與其它副痘病毒如假牛痘病毒、牛丘疹性口 炎病毒等具有明顯的抗原交叉反應。與某些正痘病毒的交叉反應不明顯。但用免疫印跡方法 檢測時,本病毒的高免血清能識別3種痘苗病毒抗原。
 〖BT4〗3.培養 接觸傳染性膿皰性皮炎病毒不能在雞胚絨毛尿囊膜上生長。但可在許多組織培養細 胞內增殖,並產生細胞病變。病毒實驗室內通常應用胎羊皮膚細胞、羊和牛的睾丸細胞、 胎羊和胎牛的腎細胞以及人羊膜細胞和HeLa細胞等培養病毒。雞胚成纖維細胞也能支持 病毒增殖:初代接種時,於接毒後1~2天出現細胞病變,但在連續傳代後, 細胞病變消 失,回歸羔羊也不能使其發病。羔羊和犢牛的原代睾丸細胞是對接觸傳染性膿皰性皮炎 病毒最敏感的細胞培養物,細胞病變比較明顯,且隨傳代次數的增加,細胞病變的出現 時間逐漸規律,一般於接毒後48~60小時即可清楚看到細胞變圓、團聚並最後脫落(達7 0%~80%)等細胞病變。病毒滴度亦在此時最高。
 〖BT4〗4.病原性 雖然成年的綿羊和山羊也可發病,但羔羊和幼齡羊更為易感。於本病流行地區,許 多成年羊因早年感染而有一定程度的免疫力。 本病特征是在口唇、眼和鼻孔周圍的皮膚上出現丘疹和水皰,並迅速變為膿皰,最 後形成痂皮或疣狀病變——桑椹狀痂垢。病羔或病羊因唇部病變疼痛而不願吮乳或飲食, 因而迅速消瘦。如無並發症,一般可在4周內痊愈。 哺乳母羊經常由發病羔羊感染而發 生乳房病變。 接觸傳染性膿皰性皮炎的發病率30%~50%,死亡率不同, 在飼養衛生條件不良的 羊群中,羔羊的死亡率可能高達20%。在有並發症如蠅蛆病、壞死杆菌感染時, 死亡率明顯增高。 人工針刺接種健羊的口腔、齒齦粘膜或皮膚劃痕,均易引起感染。發病經過和臨床症 狀與自然病例相似。成年羊的症狀較輕,接種部皮膚發生炎性浸潤。 取病毒材料劃痕接種於家兔唇部或肘內、股內等少毛部位,於接種後2~3天,局部 紅腫發炎,並形成水皰,隨後幹涸而成痂皮。應用局部病變材料如上接種,可以傳代。 組織學檢查病變部細胞,可見細胞膨大、變性和空泡化等病理變化,但常不能看到 包涵體。相反,在感染的培養細胞內卻可能出現包涵體。 人在接觸病羊時,常可發生感染。病變大多發生於手、腕或臉。先是丘疹,隨後變 為水皰和膿皰,周圍皮膚紅腫,局部疼痛,淋巴結腫大。最後結痂自愈。 曾有犢牛以及犬和貓發生自然感染和人工感染成功的報道,但未獲得證實。 在自然條件下,病毒主要經皮膚或粘膜上的微小刺傷或擦傷而侵入,因接觸病羊、 含病毒材料或汙染的廄舍和用具等而感染。 綿羊靜脈注射病毒不能在人工假性搔痕皮膚上產生損傷,說明病羊體內的病毒不太可能 經血源途徑擴散。 接觸傳染性膿皰性皮炎病毒NZ2株和NZ7株的147kDa、16kDa蛋白質與哺乳動物的血管內皮 生長因子分別有22%~27% 和16%~23%的同源性。感染該病毒後,宿主血管內皮廣泛增生,這很可能是病毒直接影響 血管內皮生長因子基因表達的結果。
 〖BT4〗5.免疫 自然感染的痊愈羊具有持久甚至終生的堅強免疫。采取病羊痂皮, 磨細後懸浮於50 %甘油鹽水中,作成1%濃度。用硬刷子刷在羔羊肋腹或肘後無毛部,經7天左右,接種部 發生炎性或膿皰性病變,隨後結痂,數周後痂皮脫落。這樣的一次接種,可以產生一年 左右的免疫性。母羊應在產羔前幾周接種。 必須指出,上述接種方法具有散布強毒的危險,因此禁用於從未發生過本病的安全 地區。 母羊在分娩前3~4周用疫苗接種,羔羊可通過初乳獲得很高滴度的抗體,但常不能獲得 保護力。1~4日齡羔羊進行疫苗接種後,在一月齡時可以抵抗強毒攻擊。另外,病毒免疫接 種後,淋巴結增生反應總是出現在特異中和抗體產生之前。人們估計,羊接觸傳染性膿 皰性皮炎病的保護性免疫以細胞免疫機製為主。 應用連續通過組織培養細胞和強迫感染實驗動物進行減毒的方法,至今未獲得理想的弱 毒疫苗株。
 〖BT4〗6.診斷 接觸傳染性膿皰性皮炎傳播迅速,病變特征——口周圍具有增生性桑椹狀痂垢,一 般診斷不難,但較易與綿羊痘混淆。兩者在臨床上的鑒別要點是: 接觸傳染性膿皰性皮 炎的病變通常局限於口唇和眼、鼻周圍,病羊不顯全身症狀;而綿羊痘病羊體溫升高, 痘疹或痘皰呈全身性分布,痘皰常呈臍狀,全身反應重篤。為了確診可進行實驗檢查。 (1)電子顯微鏡檢查:可采取病料,作成乳劑,磷鎢酸負染後直接作電鏡觀察,也可將其接 種易感的組織培養細胞後,取細胞培養物作電鏡檢查。 (2)病毒分離:使用胎羊皮膚,羊、犢牛睾丸細胞進行培養,可出現特異性細胞病變。在 感染細胞表麵形成40~43kDa特異性病毒蛋白,用針對該蛋白質的單克隆抗體進行間接熒光 或免疫印跡檢測感染細胞中的病毒時,能發生很強的免疫反應。用標記病毒基因組末端區 域的探針與分離的病毒DNA進行雜交,呈陽性反應。 (3)接種試驗:將病料乳劑給健康羊唇劃痕接種,經過3~5天可形成膿皰。 (4)免疫學方法檢查:應用瓊脂擴散試驗和補體結合試驗檢查病變組織中的病毒抗原,也有 較高診斷價值。因可能出現非特異反應或交叉反應,故應設置陰性標本對照。 采取發病初期及恢複期血清進行補體結合反應及中和試驗,如恢複期抗體效價明顯增高可診 斷為本病。

 

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