2.1叢生芽誘導
這一階段主要是誘導芽，在外植體初代培養8-10d．部分外植體芽開始膨大。14d後相繼出現新芽；培養24d後新芽可長至2．0~3．
從表l可以看出。Ⅱ、Ⅳ這三個處理均有較高的出芽率．其中以處理Ⅱ即MS+6一BA0．5+NAA0．1芽萌發情況最好．芽粗壯．葉大且舒展．平均伸長3．
2．2芽分化誘導培養
芽分化增殖過程是夜香樹離體快速繁殖培養過程中一個非常重要的環節。獲得無菌材料後，是否能順利進入快速增殖培養階段。篩選出符合要求分化增殖培養基是此階段的主要任務．對於離體快速繁殖最終是否能應用於生產時間．受兩個關鍵因素製約：( l ）芽的增殖率、芽的增殖速度是離體快速繁殖中的重要環節，直接關係到能否商業化生產；( 2 ）有效芽所占比例，指可作為繼代材料或生根材料的芽占全部芽的百分率。此時芽的質量決定了芽的利用率的高低，所以選擇一個增殖率高且有效芽多的增殖培養基是離體快速繁殖的關鍵。
將第一階段培養成功的芽切下，接種於分化增殖培養基上，培養基以MS 為基本培養基，6 一BA 、IBA 分別設了5 個梯度，共50 個處理，培養25d 。對生長情況（表2 ）分析可知，芽增殖用6 - BAO.5mg/L、IBAO.2mg/L時，芽增殖倍數為7.5，芽苗生長正常，節間略長，但有利於繼代繁殖。所以確定選取增殖倍數在5 一6 的分化增殖培養基，既符合增殖效果又符合得到健壯有效苗雙重標準的處理為6-BA0.4~0.5mg/L，IBAO.2 一0.3mg/L 。
2.3 生根培養
由表3 分析可知，經過30d 的生根培養，不同濃度IBA 對夜香樹生根率、生根數均有不同程度的影響，其中以IBA O.3mg/L 時生根情況最好，生根率高，發根早。有4 一5 條側生根。當IBAO.5mg/L時發現，有些根生長在植株基部愈傷組織上，根粗壯，側根多，但從苗瓶中取出移栽時根容易脫落，成活率不高。實驗還表明，夜香樹生根快慢與生根質量不僅受培養基的影響，而且與生根材料的健壯程度與木質化程度有密切關係。粗壯、半木質化材料生根快，主根與側生根發育好（表3 ）。
2.4 煉苗與移栽
夜香樹試管苗在組培室內濕度比較恒定、無菌條件下產生出來的，因此，沒有經過抗冷、抗熱、抗早或抗病等因素的煉苗，當移栽、種植到小棚或溫室栽培後往往會受到各種不利因素的影響，所以，在種植後7d 應及時噴灑殺菌劑，每隔7 一10d 噴1 次。常用殺菌劑有多菌靈、瑞毒素、波爾多液，濃度掌握在l000~1500倍為宜。
生根培養28d 後，當瓶內組培苗長到scm 左右時，將生根的瓶苗移人自然光下光培養7d 後揭膜。為減少取苗時對根係的傷害，在拔苗前適當往瓶中加人一些自來水浸泡l 一2h ，將苗拔出後用自來水衝去附著的根部的瓊脂，移栽到用蒸汽消毒過的細煤渣或細沙中，成活率可達92 腸以上。在煉苗床上培養15~20d 移人大田或容器中。
3 苗期管理
移植後每天淋水兩次，淋水時注意不要用膠管或噴槍直射、直淋，最好用噴霧方式淋水。因為試管苗幼小，直射、直淋都會造成植株歪斜。生長初期7d 噴施氮肥兩次，21d 後加少許磷、鉀肥，棍合施用。花後將枯枝和過密枝條剪除．對徒長進行截短處理。常見病害有輪紋病，可用50 ％甲基托布津可濕性粉劑500 倍液噴灑。蟲害有介殼蟲和粉虱，用50 ％殺螟鬆乳油1000倍液噴殺。
4 結論
Ms + 6-BAo.5mg/L + NAA0.lmg/L ＋蔗糖3.0%＋瓊脂0.6 ％是夜香樹較為理想的誘導芽萌發的培養基；芽增殖培養基為MS+6-BA0.5mg/L，IBA0.2mg/L ＋蔗糖3 % ＋瓊脂0.6 % ，繼代培養25d 增殖係數可達7.5 ，且生長健壯。
在1/2MS + IBAO.3mg/L十蔗糖0.15％十瓊脂0.6 ％的培養基上，夜香樹生根效果較好，生根率達到100%，平均根數為5.7 。在夜香樹移栽煉苗的過程中要嚴格控製空氣相對濕度，實驗過程中發現夜香樹瓶苗極易失水皺縮，煉苗前10d 空氣相對濕度都應該保持在80 ％以上，最好是通過扣玻璃瓶或塑料薄膜來保持濕度。
夜香樹的花香過於濃鬱，近距離聞其香氣易使人引起頭暈或不舒服的感覺。故隻可在公園或庭院的空曠處種植，且數量不宜過多過密。
5 討論
在試管苗生根培養中，耗費了大量的時間和培養空間，而采用試管苗瓶外生根不僅可以減少一次無菌操作的步驟，提高了培養空間，又簡化了組織培養程序，降低了生產成本，提高了繁殖係數，能進一步解決工廠化育苗的難題。因此是一項值得研究的技術之一。
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