紫葉稠李組織培養研究

關鍵詞：紫葉稠李；組織培養；培養基；激素

紫葉稠李是優良的園林綠化樹種。遼寧林業職業技術學院林盛教學基地於2003年4月從北京植物園引人紫葉稠李，經過引種觀察，樹體健壯，生長速度較快，3 a生樹高達2.5 m，地徑2.8 cm；抗寒性強，2003年1月和2005年1月園地氣溫達到-27.1℃和-29.0℃，無凍害發生；枝條密度是大，葉片卵狀長橢圓形，長度達12 cm，尤其突出的是葉片在生長季表現為深紫色，用做行道樹、庭蔭樹和園景點綴，具有較高的觀賞價值。張寶剛等對紫葉稠李進行了芽接、枝接、扡插等方麵的研究，取得了一定的成果…為了在短期內獲得大量的紫葉稠李苗木。滿足綠化需求，筆者進行了紫葉稠李的組織培養研究，為進行工廠化育苗提供基本技術數據。

l材料與方法
1.1材料來源

試驗材料為遼寧林業職業技術學院林盛教學基地從北京植物園引入的生長良好、無病蟲害的紫葉稠李。

1.2外植體選用

取生長健壯、無病蟲害的紫葉稠李冬眠枝或剛剛萌動的枝條，切成帶有一個頂芽或側芽的莖段。

1.3外植體的滅菌處理

滅菌流程：小莖段一流水衝洗(30 Min)→洗滌荊溶液浸泡(10 Min) →流水衝洗(30 min)→(以下工作在超淨工作台完成)75％酒精浸泡30s→無菌水衝洗2次(1 min 1次) →0.1％HgCl2浸泡(8 min) →無菌水衝洗6次(2 min 1次)。

1.4試驗方法
1.4.1不同激素配比對紫葉稠李初代培養的影響。基本培養基為MS+蔗糖30 g/L+瓊脂6g/L(pH5.8)，其中加入不同質量濃度的6-BA(設O.20、O.40、0.60、O.80、1.00mg/L質量濃度梯度)和NAA(設0.00、0.05、O.10 mg/L一3個質量濃度梯度)作為初代培養的脫分化培養基，然後將消毒處理後的莖段接種在其中進行培養觀察。
1.4.2不同激素配比對紫葉稠李再生嫩莖增殖的影響。
將初代培養獲得的小植株除去葉片後再切成小莖段，接種到附加不同質量濃度的6一BA(0.50、1.00、2.00mg/L)、NAA(0.05、O.10、0.20 Mg/L)和GA3(0.00、0.50、1.00 mg/L)的繼代分化培養基上(基本培養基同初代培養基)，4周後觀察增殖狀況，並統計結果。

1.4.3不同生長素組合對紫葉稠李生根的影響。
以l/2MS+蔗糖20 g/L+瓊脂7 g/L(pH5.8)為基本培養基，其中加入不同質量濃度的NAA(0.00、0.10、0.50、1.00mg/L)和IBA(O.00、0.10、O.50 mg/L)作為生根培養基；將繼代培養得到的株高在1.5~2.0 cm的嫩莖轉人生根培養基中。20 d後觀察生根狀況，並統計結果。
以上培養基均在12l℃條件下滅菌20 min。培養溫度為20±2℃，光照12 h/d,光強為2 000—3 000 lx。

1.4.4生根苗移栽。當生根培養的小苗根長為1.5—2.5 cm時。開瓶在溫室煉苗7 d，移栽前3d用50％可濕性多菌靈800倍液噴澆滅菌。試管苗移栽基質為珍珠岩+泥炭土和蛭石+草炭土兩種，每種基質中2種材料的體積比均為l：l。每種基質移植小苗l 000株。

2結果與分析

2.1激素配比對紫葉稠李初代培養的影響

試驗發現。紫葉稠李頂芽和側芽的分化能力均較強，培養2周後逐漸分化出小植株。30 d後部分小植株的葉腋處又分化出新的小植株。
由表l可知，不同激素配比對外植體的分化有顯著影響，在MS+6一BA 1.00 mg/L+NAA0.10mg/L培養基中，小植株分化數量最少；而在MS+6一BAO.60 mg/L+NAA 0.1mg/L培養基中。小植株分化數量最多，質量最好，分化率達到100.00％。可見，適宜的激素配比是誘導外植體分化的關鍵因素。
2.2激素配比對紫葉稠李再生嫩莖增殖的影響

由表2可知，增殖培養結果因激素配比不同而異，嫩莖增殖倍數隨細胞分裂素質量濃度的增加而降低，以MS+6一BA0.50 mg·L。1+NAA0.05 mg/L+GA₃0.50 mg/L增殖倍數最高，達到8.17倍，且苗芽生長健壯。
2.3不同生長素組合對紫葉稠李生根的影響

由表3可知，以l/2MS+IBA0.50 mg/L培養基的生根效果最好，每個試管苗生根3—5條，長度約1.5—2.5cm。生根率達到100％。

2.4基質對紫葉稠李生根苗移栽的影響

在生根植株培養階段，對生長健壯的生根苗進行煉苗移栽。移栽後澆一次定根水。以後保持基質濕潤，溫度保持在20℃左右，初期適當遮蔭。移栽後約15 d的緩苗期過後，植株發出新根開始正常生長。

試驗所使用的2種混合基質對移栽成活率的影響不顯著，但對小苗後期生長速率有影響。移栽30 d後統計珍珠岩+泥炭土和蛭石+草炭土的平均苗高分別為9.5 cm和12.3 cm。由此可見.蛭石+草炭土做移栽基質更適合試管苗的生長。
3結論

在紫葉稠李組織培養過程中。6一BA與NAA的配比對外植體的誘導具有顯著影響。在初代培養階段，MS+6-BAO.60mg/L+NAA0.05 mg/L培養基對外植體的脫分化效果最好，分化率達到100.00％。在繼代增殖培養階段。MS+6一BA0.50 mg/L+NAA0.05mg/L+GA₃0.50 mg/L培養基的增殖倍數最高，達到8.17倍，且苗芽生長健壯。在生根培養時，l/2Ms+IBA0.50 mg/L培養基的生根效果最好，生根率達到100％，且苗形美觀，色澤深綠，移栽後生長旺盛。在移栽階段，在蛭石+草炭土(體積比為1：1)基質中，移栽30 d後平均苗高為12.3 cm，有利於試管苗移栽的成活與後期生長。

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