副流感病毒1型(Parainfluenzavirus,type1)
同義名:仙台病毒(Sendaivirus);日本血凝病毒(HaemagglutinatingvirusofJapan);血細胞吸附病毒2型(Haemadsorptionvirus,type2)。
副流感病毒1型的原始分離毒株稱為血紅細胞吸附病毒第2型,簡稱HA2病毒。它是1957年Chanock等從華盛頓1名患有急性喉氣管支氣管炎的嬰兒的咽拭子中,用恒河猴腎原代細胞培養分離出來的。我國於1962年在北京從急性下呼吸道感染患兒的咽拭子中分離出3株HA2病毒,從急性上呼吸道感染的患兒中分離出2株HA2病毒。HA2病毒也在世界其它地方分離出來過,包括美國、澳大利亞、加拿大、前蘇聯、英國、丹麥、日本、法國和西印度群島。
(1)理化學特性副流感病毒1型經電鏡測得的大小為100~180nm。毒粒內含單股RNA,核衣殼體螺旋對稱,有包膜,上有糖蛋白纖突。病毒粒子的感染力在50℃2小時或36℃80小時內全部喪失;在無血清的營養液中25℃2小時,其感染力損失99%。如將病毒保存在-60℃含蛋白質的營養液中,其感染力可保持數年。病毒在pH5.7~8.7時,感染力穩定。用超聲波處理可以導致血凝素解離,而不增加其感染力。20%乙醚4℃過夜或氯仿4℃10分鍾可使其感染力完全喪失。乙醚或氯仿以及Tween80處理,可以導致表麵抗原包括血凝素和神經氨酸酶的釋放。0.5μg/ml的胰酶在37℃孵育1小時可使其感染力下降99.99%,但血凝素滴度不下降;孵育5小時,則血凝素滴度下降。病毒經乙醚處理後,用血凝或補體結合試驗可區分出兩種抗原成分:一種是可溶性抗原(S),它在20000r/min不沉澱,也不凝集血細胞,用經鼻腔感染豚鼠製備的免疫血清可與之發生補體結合反應;第二種是特異性血凝抗原(V),它可與特異性豚鼠免疫血清發生血凝抑製反應。另有一種溶血素,在補體存在時可使雞紅細胞溶解。副流感病毒1型能凝集雞、豚鼠、人、綿羊、家兔和猴的紅細胞。雞紅細胞在4℃,豚鼠紅細胞在25℃,能獲得最高的血凝滴度。在偏酸或偏堿的pH中,血凝素比感染性病毒粒子更為穩定。該病毒用乙醚處理可以提高血凝滴度。在不同動物血清中存在1型病毒血凝反應的非特異性抑製物,在家兔的正常和免疫血清的19S和4S部分含有1和3型病毒血凝反應的抑製物,而特異性抗體是在7S部分,可用凝膠過濾進行純化。血清中存在的非特異性血凝抑製物質,可以用霍亂孤菌濾液的受體破壞酶(RDE)處理或白陶土處理法去除,如用過碘酸鉀處理,非特異性抑製固然可以去除,但特異性抗體也遭到部分破壞。將仙台病毒與HA2病毒歸屬於副流感病毒1型的主要根據是,其可溶性抗原具有交叉反應。
(2)培養某些副流感病毒1型能在雞胚中生長,仙台病毒株生長更佳。羊膜腔接種最敏感,但傳代後可用尿囊腔和卵黃囊接種。培養適宜溫度為35.5℃,雞胚不死亡。HA2株能在人、猴、雞胚和豬的腎細胞培養物中生長,仙台病毒株的適應範圍更廣。初次分離時,細胞病變不明顯,用血細胞吸附試驗易於檢出病毒,也可將細胞培養物染色後檢查胞漿內的包涵體。仙台病毒株可形成蝕斑。將接種物用胰酶處理,常可增加蝕斑數。仙台病毒株能使培養細胞發生融合,即使滅活後也有這種作用,因此在哺乳動物雜交細胞的研究中,廣泛應用仙台病毒株作為細胞融合劑。
(3)病原性實驗感染時,仙台病毒株可使小鼠發生隱性感染,但在鼠群中幾經傳遞後,毒力可增強而導致致死性肺炎。在過去無此病的鼠群中死亡率很高。偶而可以感染大鼠、豚鼠和豬。過去認為仙台病毒株一般不感染人類,現在已有許多實驗證明它也是人類呼吸道疾病的病原之一。血細胞吸附病毒2型隻分離自人類,引起兒童急性喉氣管炎。近來應用細胞融合技術,曾從多發性硬化症病人的腦細胞中分離到本病毒。(4)血清學診斷:采用血凝抑製試驗和中和試驗進行血清學診斷,其敏感性與病毒分離相似。進行血凝抑製試驗時,患病動物血清要用RDE或白陶土處理,用人“O”型紅細胞常可獲得滿意結果。補體結合試驗的敏感性稍差,由於豚鼠常有自然感染,所以補體應事先檢查有無抗體。快速診斷可用免疫熒光技術或免疫酶技術。
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