1. 宿主範圍廣, 對人致病性低
這套腺病毒載體係統可廣泛用於人類及非人類蛋白的表達。腺病毒可感染一係列哺乳動物細胞,因此在大多哺乳動物細胞和組織中均可用來表達重組蛋白。
2. 在增殖和非增殖細胞中感染和表達基因
逆轉錄病毒隻能感染增殖性細胞,因此DNA轉染不能在非增殖細胞中進行,而必須使細胞處於持續培養狀態。腺病毒則能感染幾乎所有的細胞類型,除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤細胞。腺病毒是研究原代非增殖細胞基因表達的最佳係統,它可以使轉化細胞和原代細胞中得到的結果直接進行對比。
3. 能有效進行增殖,滴度高
這套腺病毒係統可產生1010到1011VP/ml,濃縮後可達1013VP/ml,這一特點使它非常適用於基因治療。
4. 無需輔助病毒,可容納7.5 kb外源DNA 為提供克隆空間,此腺病毒缺失了E1和E3早期區。此外,此腺病毒可包裝比正常病毒DNA稍大的DNA分子(105%)。這些特點允許插入腺病毒的基因或多基因表達盒可達7.5kb。
5. 與人類基因同源
該腺病毒載體係統應用了人類病毒作為載體,以人類細胞作為宿主,因此為人類蛋白進行準確的翻譯後加工和適當的折疊提供了一個理想的環境。大多數人類蛋白都可達到高水平表達並且具有完全的功能。
6. 不整合到染色體中,無插入致突變性
逆轉錄病毒可隨機整合到宿主染色體,導致基因失活或激活癌基因。而腺病毒則除了卵細胞以外幾乎在所有已知細胞中都不整合到染色體中,因此不會幹擾其它的宿主基因。在卵細胞中整合單拷貝病毒則是產生具有特定特征的轉基因動物的一個較好的係統。
7. 能在懸浮培養液中擴增
293細胞可以適應懸浮培養,這一調整可使病毒大量擴增。大量事實證明懸浮293細胞可在1~20L的生物反應器中表達重組蛋白。
8. 能同時表達多個基因
這是第一個可以在同一細胞株或組織中用來設計表達多個基因的表達係統。最簡單的方法是將含有兩個基因的雙表達盒插入腺病毒轉移載體中,或者用不同的重組病毒共轉染目的細胞株來分別表達一個蛋白。測定不同重組病毒的MOI比值可正確估計各重組蛋白的相對共表達情況。
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