1、 未開封時,冷藏於≤8℃(≤46℉),並在保存期內用完,高溫度時,凝固水可以排除,包裝物最好於室溫啟開。
2、 已開封的,將封口以膠帶封緊。
3、 保存再封的袋於≤25℃(≤77℉)和溫度<50%,不要冷藏已開啟的包裝袋,並於一個月內使用完。
4、 製備1:10和更大稀釋的食物樣品稀釋液,稱取或吸取食物樣品,置入適宜的無菌容器內,如均質袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內。
5、 加入適量的無菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調PH7.2) 、0.1%的旦白膠水(ISO方法6887) 、緩衝旦白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水。不可使用含有枸櫞酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩衝液,因為它們能抑止菌生長。
6、 攪拌或均質樣品.樣品不需要調PH,但已調解PH的樣品也能夠使用。
7、 將測試片置於平坦表麵處,揭開上層膜。
8、 使用吸管將1ml樣液垂直滴加在測試片的中央處。
9、 允許使上層膜直接落下,切勿向下滾動上層膜.
10、 手拿壓板橫膜,將壓板放置在上層膜中央處.
11、 平穩的壓下,使樣液均勻覆蓋於圓形的培養麵積上,切勿扭轉壓板。
12、 拿起壓板,靜置至少1分鍾以使培養基凝固。
13、 測試片的透明麵朝上,可堆疊至20片,於21-25℃(70-77℉)培養3-5天。
大的或快速生長的黴菌在培養5天後會呈現含混模糊的菌落,應在培養3天後記錄高數量計數結果。
如果培養5天後,測試片上菌落叢生過快的生長,則以3天計數結果作為估計菌落數。培養時間和溫度因方法而有不同,最通用的認可方法是:
AOAC官方方法997.02(食品類) 21-25℃培養5天。
14、可目視及用標準菌落計數器或其它的照明放大鏡計數,並可參考判讀卡計算菌落數。
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