微生物檢查中的MPN 法和CFU 法
錄入時間:2009-8-27 13:47:59
來源:食品科技網
MFN (most probable number)法即最近似數法,也稱為最大可能數法,是食品檢驗中常用的方法。其生化反應基礎為乳糖發酵,革蘭陰性菌的無芽胞杆菌,如大腸菌群,一般在37℃、24h 發酵乳糖、產酸產氣。利用此原理,將供試液加到發酵培養基中,37℃ 培養24h。若不產氣,則報告控製菌陰性;若產氣,則需劃線接種於平板上,37℃培養24h 後,觀察菌落形態、革蘭染色和重發酵驗證。優點:操作簡便、靈敏度較高,時間短,可直接觀察試管得出結論,若發酵培養基不產氣,24h 即可報告控製菌陰性。缺點:要求樣品具有均一性,適合檢驗液體樣品,且隻能用於檢驗在發酵培養基中產氣的菌種。注意事項:需選擇合適的稀釋度和接種量。
CFU (colony forming units)法即平板計數法,是食品和藥品檢驗中常用的方法。原理為lg 或lml 樣品中所含的活菌數量,通過將處理後的樣品在一定條件下培養後計算生長出來的菌落數(CFU),即在一定體積的細菌培養液在固態培養基上形成的菌落數。液體樣品可直接稀釋成供試液,固體樣品需在滅菌的生理鹽水中浸泡製成供試液。將不同稀釋度的供試液吸取lml,放入滅菌的平皿內,再傾注融化的營養瓊脂,待瓊脂凝固後,翻轉平皿,37℃培養4d,計算平皿內的菌落數。CFU法應用廣泛,但檢驗過程必須嚴格無菌,以防汙染雜菌,而且檢驗所需時間較長,同時也需選擇合適的稀釋度和接種量。
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