蘇雲金杆菌的部分生化試驗鑒定

一、目的要求：
本實驗是通過簡單的生化測定來了解蘇雲金杆菌的生化鑒定技術。
鑒定蘇雲金杆菌的生化指標是：V、P反應，卵磷脂酶，蛋白水解，吐溫酶，水楊素，七葉靈、蔗糖、甘露糖、表膜、酶、澱粉、幾丁質酶、精氨酸脫羥酶等。

二、實驗材料：
1、  天平 2、電爐 3、藥勺4、量筒5、燒杯6、pH試紙7、高壓鍋（手提式）8、接種環
三、實驗內容：
1、糖利用：
蛋白腖                                     1%
瓊脂                                        2%
蔗糖（甘露糖）                         1%（水楊素為0.5%）
1%酸性複紅水溶液                     0.5%
蛋白腖加熱溶於水中，加入酸性複紅水溶液。分別加入一種糖加熱溶解，以不加糖的蛋白腖作對照。分裝試管，調pH至7.58磅滅菌30分鍾。
接種後於30℃恒溫培養檢查產酸情況，若培養基變紅者為正反應。
2、七葉靈利用：
牛肉膏                                1%
七葉靈                                0.5%
瓊脂                                  2%
另配5%三氯化鐵水溶液單獨滅菌。培養基溶後，先將三氯化鐵每皿滴入2滴，後倒平板混勻。凝固後電接菌種，30 ℃培養3-5天。菌苔周圍出現深褐色區為陽性反應。
3、V、P反應：
   蛋白腖5克  葡萄糖5克  NaCl 5克  蒸餾水 1000毫升
分裝試管   8磅30分鍾滅菌
接菌後於37 ℃培養24小時，每管加入4%KOH溶液10-20滴，再加等量的5%的一萘酚乙醇水溶液後，用力振蕩。然後置37 ℃下保溫0.5小時。培養物出現紅色即為V、P正反應，並設未接種的試管為對照。

 4、澱粉水解試驗：
牛肉膏 5克  NaCl 5克  可熔性澱粉 5克  瓊脂  10克  蒸餾水 1000毫升 
將試驗菌點種於平板上，徒長出菌落後，收Lugoc氏碘液傾注於平板表麵，菌落四周有透明圈者為陽性放應。