地克珠利和雙硝苯脲二甲嘧啶醇檢測方法

 

1．分析目標化合物

    農藥等成分物質                                  分析目標化合物
     地克珠利                                            地克珠利        
     雙硝苯脲二甲嘧啶醇                             N，N－二－(4－硝基苯基)尿素   

2．儀器設備

    帶紫外分光光度檢測器的高效液相色譜儀

3．試劑

    使用附錄2所列試劑。

4．標準品

    地克珠利：含地克珠利99％以上，分解點為295℃。
    雙硝苯脲二甲嘧啶醇：含N，N－二－(4－硝基苯基)尿素70～72％，分解點為265℃～275℃。

5．試驗溶液的製備

a 提取方法
    肌肉：盡可能除去脂肪層，攪碎混合均勻後，稱取其5.0g。
    脂肪：盡可能除去肌肉層，攪碎混合均勻後，稱取其5.0g。
    肝髒和腎髒：攪碎混合均勻後，稱取其5.0g。
    加入30mL乙腈，20mL乙腈飽和正己烷和10g無水硫酸鈉，攪拌後，以每分鍾3000轉離心分離5分鍾，乙腈層移入磨口減壓濃縮器中。離心管內正己烷層和殘留物中加入20mL乙腈，用振蕩器激烈振蕩1分鍾後，按上述同樣條件離心分離，合並乙腈層於磨口減壓濃縮器中。加入10mL正丙醇, 40℃以下除去乙腈和正丙醇。殘留物中加入3mL甲醇溶解，加入7mL 0.05mol/L磷酸二氫鈉溶解。

b 淨化方法
    在十八烷基甲矽烷基化矽膠小柱(500mg)中順次注入10mL甲醇和10mL 0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液，棄去流出液。柱中注入a提取方法所得的溶液後，注入10mL甲醇：0.05mol/L磷酸二氫鈉(3：7)的混合溶液，棄去流出液。注入10mL水：甲醇(1：4)混合溶液，收集流出液於磨口減壓濃縮器中，40℃以下除去甲醇。殘留中物加入1.0mL甲醇溶解，此為試驗溶液。

6．操作方法

a 定性試驗
    按下列操作條件進行試驗，試驗結果必須與標準品的一致。
    操作條件
    柱填充劑：十八烷基甲矽烷基化矽膠(粒度5μm)。
    柱：內徑4.0～6.0mm，長150mm不鏽鋼管。 
    柱溫： 40℃
    檢測器：地克珠利試驗，吸收波長為275nm；雙硝苯脲二甲嘧啶醇試驗，吸收波長為350nm。
    流動相：乙腈：0.025mol/l磷酸二氫鈉(1：1)混合溶液。地克珠利試驗時，調整流速使地克珠利約8分鍾流出。雙硝苯脲二甲嘧啶醇試驗時，調整流速使N，N－二－(4－硝基苯基)尿素約6分鍾流出。

b 定量試驗
    根據與a 定性試驗相同操作條件所得的試驗結果，峰高法或峰麵積法定量。

7．定量限

    地克珠利：0.1 mg/kg
    雙硝苯脲二甲嘧啶醇：0.02 mg/kg [以N，N－二－(4－硝基苯基)尿素計]

8．注意事項

(1) 試驗溶液的製備
    淨化方法所用的十八烷基甲矽烷基化矽膠小柱預先使用地克珠利和雙硝苯脲二甲嘧啶醇的標準品進行確認其保持和溶出性能。
(2) 標準溶液的配製
    ① 將相當於10.0mg地克珠利的標準品，溶解在10mLN，N－二甲基甲酰胺後，加入甲醇至100mL，作為地克珠利的標準原液（地克珠利100mg／L）。本標準原液保存在0～4℃，3個月內穩定。 
    ② 將相當於10.0mg N，N－二－（4－硝基苯基）尿素的雙硝苯脲二甲嘧啶醇的標準品，溶解在10mLN，N－二甲基甲酰胺後，加入乙腈至200mL，作為雙硝苯脲二甲嘧啶醇的標準原液（N，N－二－（4－硝基苯基）尿素50mg／L）。本標準原液保存在0～4℃，1個月內穩定。
    ③用甲醇將地克珠利和雙硝苯脲二甲嘧啶醇各標準原液遞減稀釋，作為製作標準曲線用標準溶液。
(3)其它
    使用本檢測方法檢出地克珠利和雙硝苯脲二甲嘧啶醇時，最好用帶紫外可見多波長檢測器和質量檢測器的高效液相色譜儀確證。