農藥殘留——敵菌丹檢測方法

1．分析目標化合物

敵菌丹

2. 儀器設備

    帶電子捕獲檢測器的氣相色譜儀和氣相色譜--質譜儀

3.. 試劑

    磷酸鹽溶液

    乙腈：取300 mL乙腈，用磨口減壓濃縮器進行濃縮，除去乙腈；殘留物中加5mL正己烷溶解，取其5µL用帶電子捕獲器的氣相色譜進行檢測，色譜中除正己烷的峰外，不得出現比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    丙酮：取300 mL丙酮，用磨口減壓濃縮器進行濃縮，除去丙酮；殘留物中加5mL正己烷溶解，取其5µL用帶電子捕獲器的氣相色譜進行檢測，色譜中除正己烷的峰外，不得出現比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    氯化鈉：特級，如含有對該農藥等成分物質分析有幹擾作用的物質時，用正己烷等溶劑洗滌幹淨後再用。
    色譜用合成矽酸鎂：將柱色譜用合成矽酸鎂（粒徑150～250µm）130℃加熱處理12小時以上，放幹燥器中冷卻。
    矽藻土：化學分析用
    乙酸乙酯：取300 mL乙酸乙酯，用磨口減壓濃縮器進行濃縮，除去乙酸乙酯；殘留物中加5mL正己烷溶解，取其5µL用帶電子捕獲器的氣相色譜進行檢測，色譜中除正己烷的峰外，不得出現比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    正己烷：取300 mL正己烷，用磨口減壓濃縮器進行濃縮至5mL，取其5µL用帶電子捕獲器的氣相色譜進行檢測，色譜中除正己烷的峰外，不得出現比2×10－11g γ－BHC更高的峰。
    水： 蒸留水, 如含有對該農藥等成分物質分析有幹擾作用的物質時，用正己烷等溶劑洗滌幹淨後再用。
    無水硫酸鈉：特級, 如含有對該農藥等成分物質分析有幹擾作用的物質時，用正己烷等溶劑洗滌幹淨後再用。

4．標準品

    敵菌丹,含敵菌丹98％以上，熔點為159℃～161℃。

5．試驗溶液的製備

a 提取方法 
    ①  穀類、豆類和種子類
    將樣品粉碎，過420μm標準網篩後，稱取其10.0g，加入20mL 3%磷酸溶液，放置2小時。
    加入100mL丙酮，攪拌3分鍾後，用塗布1cm厚矽藻土的濾紙抽濾於磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL丙酮，攪拌3分鍾後，按上述同樣操作，合並濾液於減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30 mL。
    將其移入預先注入100mL 10％氯化鈉溶液的300mL分液漏鬥中。用100mL 正己烷洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶，合並洗液於上述分液漏鬥中，用振蕩器激烈振蕩5分鍾後，靜置，正己烷層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL正己烷，按上述同樣操作，合並正己烷層於上述三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鍾後，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL正己烷洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物，重複操作二次。合並二次洗液於減壓濃縮器中，40℃以下除去正己烷。
    殘留物中加入30mL正己烷，移入100 mL分液漏鬥中。加入30 mL正己烷飽和乙腈，用振蕩器激烈振蕩5分鍾後，靜置，乙腈層以入磨口減壓濃縮器中。正己烷層中加入30 mL正己烷飽和乙腈，按上述同樣操作，重複2次，合並乙腈層於減壓濃縮器中，40℃以下除去乙腈。殘留物中加入5mL正己烷溶解。
    ②水果、蔬菜、末茶和啤酒花
    水果和蔬菜：準確稱取約1kg樣品，加入500 mL 10％磷酸溶液，攪碎混合均勻後，稱取相當於20.0g樣品的量。
    末茶：稱取5.00g樣品，加入20 mL 3％磷酸溶液，放置2小時。
    啤酒花：將樣品粉碎，稱取其5.00g，加入20 mL 3％磷酸溶液，放置2小時。
    加入100mL丙酮，攪拌3分鍾後，用塗布1cm厚矽藻土的濾紙抽濾至磨口減壓濃縮器中。取出濾紙上的殘留物，加入50mL丙酮，攪拌3分鍾後，按上述同樣操作，合並濾液於減壓濃縮器中，40℃以下濃縮至約30 mL。
    將其移入預先注入100mL 10％氯化鈉溶液的300mL分液漏鬥中。用100mL 正己烷洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶，合並洗液於上述分液漏鬥中，用振蕩器激烈振蕩5分鍾後，靜置，正己烷層移入300mL三角瓶中。水層中加入50mL正己烷，按上述同樣操作，合並正己烷層於上述三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鍾後，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL正己烷洗滌三角瓶，以西洗液洗滌濾紙上的殘留物，重複操作二次。合並二次洗液於減壓濃縮器中，40℃以下除去正己烷。殘留物中加入5mL正己烷溶解。
    ③末茶以外的茶
    將9.00g樣品浸泡於540 mL 100℃水中，室溫下放置5分鍾後，過濾，移取360mL冷卻後濾液於500mL三角瓶中。
    加入30mL磷酸、100mL丙酮和飽和2 mL乙酸鉛溶液，室溫下靜置1小時後，用塗布1cm厚矽藻土的濾紙抽濾至磨口減壓濃縮器中，濾液移入1000mL分液漏鬥中。再用50mL丙酮洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物。合並洗液於上述分液漏鬥中。
    加入30g氯化納和100mL正己烷，用振蕩器激烈振蕩5分鍾後，靜置，正己烷層移入300mL三角瓶中。水層中加入100mL正己烷，按上述同樣操作，合並正己烷層於上述三角瓶中。加入適量無水硫酸鈉，不時振蕩、混合，放置15分鍾後，濾入磨口減壓濃縮器中。再用20mL正己烷洗滌三角瓶，以此洗液洗滌濾紙上的殘留物，重複操作二次。合並二次洗液於減壓濃縮器中，40℃以下除去正己烷。殘留物中加入5mL正己烷溶解。

b 淨化方法
    在內徑15mm，長300mm的色譜管中注入5g懸浮在正己烷中的柱色譜用合成矽酸鎂，其上麵再加入約5g無水硫酸鈉,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液，注入100mL正己烷，舍棄流出液。再注入150mL乙酸乙酯及正己烷（1∶9）混合溶液，收集流出液於磨口減壓濃縮器中，40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。殘留物中加入正己烷溶解，準確至5 mL，此為試驗溶液。

6．操作方法

a 定性試驗
    按下列操作條件進行試驗，試驗結果應與標準品的一致。
    操作條件1：
    柱：內徑0.25mm，長10-30ｍ石英毛細管，塗布0.25μm厚氣相色譜用甲基矽酮，老化。
    柱溫：在50℃保持1分鍾，此後毎分鍾升溫25℃。到達175℃後，毎分鍾升溫10℃，到300℃後保持5分鍾。
    進樣器溫度：230℃
    檢測器溫度：300℃
    氣體流量：以氦氣作載氣，調整流速至適當條件。
    操作條件2：
    柱：內徑0.25mm，長10-30ｍ石英毛細管，塗布0.25μm厚氣相色譜用5%苯基--甲基矽酮，老化。
    柱溫：在50℃保持1分鍾，此後毎分鍾升溫25℃。到達125℃後，毎分鍾升溫10℃，到300℃後保持3分鍾。
    進樣器溫度：230℃
    檢測器溫度：300℃
    氣體流量：以氦氣作載氣，調整流速至適當條件。
b 定量試驗
    根據與a 定性試驗相同操作條件所得的試驗結果，峰高法或峰麵積定量。
c 確證檢測
    按照與a 定性試驗相同的操作條件，用氣相色譜--質譜儀測定。試驗結果應與標準品的一致。此外，必要時用峰高法和峰麵積法進行定量。