西蒙氏檸檬酸鹽培養基
成分:
氯化鈉 5g
硫酸鎂(MgSO4•7H2O) 0.2g
磷酸二氫銨 1g
磷酸氫二鉀 1g
檸檬酸鈉 5g
瓊脂 20g
蒸餾水 1000ml
0.2%溴麝香草酚藍溶液 40ml
pH6.8
製法:先將鹽類溶解於水內,校正pH,再加瓊脂,加熱溶化。然後加入指示劑,混合均勻後分裝試管,121℃高壓滅菌15min。放成斜麵。
試驗方法:挑取少量瓊脂培養物接種,於36±1℃培養4d,每天觀察結果。陽性者斜麵上有菌落生長,培養基從綠色轉為藍色。
糖發酵管
成分:
牛肉膏 5g
蛋白腖 10g
氯化鈉 3g
磷酸氫二鈉(Na2HPO4•12H2O) 2g
0.2%滇麝香草酚藍溶液 12ml
蒸餾水 1000ml
pH7.4
製法:
1、葡萄糖發酵管按上述成分配好後,按0.5%加入葡萄糖,分裝於有一個倒置小管的小試管內,121℃高壓滅菌15min。
2、其他各種糖發酵管可按上述成分配好後,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15min。另將各種糖類分別配好10%溶液,同時高壓滅菌。將5ml糖溶液加入於100ml培養基內,以無菌操作分裝小試管。
注:蔗糖不純,加熱後會自行水解者,應采用過濾法除菌。
試驗方法:從瓊脂斜麵上挑取小量培養物接種,於36℃±1℃培養,一般觀察2~3d。遲緩反應需觀察14~30d。
緩衝葡萄糖蛋白腖水(MR和VP試驗用)
成分:
磷酸氫二鉀 5g
多腖 7g
葡萄糖 5g
蒸餾水 1000ml
pH7.0
製法:溶化後校正pH,分裝試管,每管1ml,121℃高壓滅菌15min。
甲基紅(MR)試驗:自瓊脂斜麵挑取少量培養物接種本培養基中,於36±1℃培養2~5d,哈夫尼亞菌則應在22~25℃培養。滴加甲基紅試劑一滴,立即觀察結果。鮮紅色為陽性,黃色為陰性。甲基紅試劑配法:10mg甲基紅溶於30ml95%乙醇中,然後加入20ml蒸餾水。
V-P試驗:用瓊脂培養物接種本培養基中,於36±1℃培養2~4d。哈夫尼亞菌則應在22~25℃培養,加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5ml和40%氫氧化鉀溶液0.2ml,充分振搖試管,觀察結果。陽性反應立刻或於數分鍾內出現紅色,如為陰性,應放在36±1℃下培養4h再進行觀察。
克氏檸檬酸鹽培養基
成分:
檸檬酸鈉 3g
葡萄糖 0.2g
酵母浸膏 0.5g
單鹽酸半胱氨酸 0.1g
磷酸二氫鉀 1g
氯化鈉 5g
0.2%酚紅溶液 6ml
瓊脂 15g
蒸餾水 1000ml
製法:加熱溶解,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。放成斜麵。
試驗方法:用瓊脂培養物接種整個斜麵,在36±1℃培養7d,每天觀察結果。陽性者培養基變為紅色。