苯丙氨酸培養基
成分:
酵母浸膏 3g
DI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g
磷酸氫二鈉 1g
氯化鈉 5g
瓊脂 12g
蒸餾水 1000ml
製法:加熱溶解後分裝試管,121℃高壓滅菌15min,使成斜麵。
試驗方法:自瓊脂斜麵上挑取大量培養物,移種於苯丙氨酸瓊脂,在36±1℃培養4h或18~24h.滴加10%三氯化鐵溶液2~3滴,自斜麵培養物上流下,苯丙氨酸脫氨酶陽性者呈深綠色。
氨基酸脫羧酶試驗培養基
成分:
蛋白腖 5g
酵母浸膏 3g
葡萄糖 1g
蒸餾水 1000ml
1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液 1ml
L-氨基酸或DL-氨基酸 0.5或1g/100ml
pH6.8
製法:除氨基酸以外的成分加熱溶解後,分裝每瓶100ml,分別加入各種氨基酸:賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸、L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入,再行校正pH至6.8,對照培養基不加氨基酸,分裝於滅菌的小試管內,每管0.5ml,上麵滴加一層液體石蠟,115℃高壓滅菌10min。
試驗方法:從瓊脂斜麵上挑取培養物接種,於36±1℃培養18~24h,觀察結果.氨基酸脫羧酶陽性者由於產堿,培養基應呈紫色。陰性者無堿性產物,但因葡萄糖產酸而使培養基變為黃色,對照管應為黃色.。
蛋白腖水(靛基質試驗用)
成分:
蛋白腖(或胰蛋白腖) 20g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1000ml
pH7.4
製法:按上述成分配製,分裝小試管,121℃高壓滅菌15min。
靛基質試劑
柯凡克試劑:將5g對二甲氨基苯甲醛溶解於75ml戊醇中,然後緩慢加入濃鹽酸25ml。
歐-波試劑:將1g對二甲氨基苯甲醛溶解於95ml95%乙醇內,然後緩慢加入濃鹽酸20ml。
試驗方法:挑取小量培養物接種,在36±1℃培養1~2d,必要時可培養4~5d,加入柯凡克試劑約0.5ml,輕搖試管,陽性者於試劑層成深紅色;或加入歐-波試劑約0.5ml,沿管壁流下,覆蓋於培養液表麵,陽性者於液麵接觸處呈玫瑰紅色。
注:蛋白腖中應含有豐富的色氨酸.每批蛋白腖買來後,應先用已知菌種鑒定後方可使用
硫酸亞鐵瓊脂(硫化氫試驗用)
成分:
牛肉膏 3g
酵母浸膏 3g
蛋白腖 10g
硫酸亞鐵 0.2g
硫代硫酸鈉 0.3g
氯化鈉 5g
瓊脂 12g
蒸餾水 1000ml
pH7.4
製法:加熱溶解,校正pH,分裝試管,115℃高壓滅菌15min,取出直立候其凝固。
試驗方法:挑取瓊脂培養物,沿管壁穿刺,於36±1℃培養1~2d,觀察結果.產硫化氫者使培養基變為黑色。
注:腸杆菌科細菌測定硫化氫的產生,應采用三糖鐵瓊脂或本培養基。
尿素瓊脂
成分:
蛋白腖 1g
氯化鈉 5g
葡萄糖 1g
磷酸二氫鉀 2g
0.4%酚紅溶液 3ml
瓊脂 20g
蒸餾水 1000ml
20%尿素溶液 100ml
pH7.2±0.1
製法:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,並校正pH,加入瓊脂,加熱溶化並分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min,冷至50~55℃,加入經除菌過濾的尿素溶液,尿素的最終濃度為2%,最終pH應為7.2±0.1,分裝於滅菌試管內,放成斜麵備用。
試驗方法:挑取瓊脂培養物接種,在36±1℃培養24h,觀察結果,尿素酶陽性者由於產堿而使培養基變為紅色。
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