三、鞭毛染色
用於觀察菌體上有無鞭毛、鞭毛在菌體上的位置以及鞭毛的數量。在細菌鑒定中，特別是非發酵菌的鑒定中很重要。
鞭毛染色可以直接從平板上挑選菌落，或從斜麵上刮菌苔塗片即可，但必須注意動作盡量輕，以免鞭毛從菌體上脫落。菌落應是
生長在營養較好的瓊脂平板(如血平板、營養瓊脂)上的過夜培養物。不可采用有抑製劑的選擇性培養基，如中國藍、麥康凱、SS瓊脂等。觀察鞭毛時，應耐心尋找整個塗片上的菌細胞，因為並不是塗片上每個細菌細胞上的鞭毛特性及數量都一樣，應以鞭毛數量最多的菌細胞為準。
鞭毛染色(改良Ryu法)
試劑
A液： 5％石炭酸 10ml
鞣酸 2g
飽和硫酸鋁鉀液 10ml
B液： 結晶紫酒精飽和液
應用液：A液10份，B液1份，混合，室溫存放。
染色方法
1．玻片的處理：要求用新的載玻片。用前須在95％酒精中浸泡24小時以上。用時從酒精中取出，以幹淨紗布擦幹後使用。
2．在玻片上滴蒸餾水兩滴。一張玻片上可同時製2個塗片。
3．用接種環挑取血平板上菌落少許，將細菌點在玻片上的蒸餾水滴的頂部。一般隻需點一下，僅允許極少量細菌進入水滴，不可攪動，以免鞭毛脫落。
4．玻片置室溫自然幹燥。
5．滴加染液於玻片上，染色。
6．約10～15min後，用蒸餾水緩慢衝去染液。衝洗時應避免使染液表麵的金屬光澤液膜滯留在玻片上，影響鏡檢。
7．玻片自然幹燥後，鏡檢時應從塗片的邊緣開始，逐漸移向中心。尋找細菌較少的視野，鞭毛容易觀察。細菌密集的地方，鞭毛被菌體擋住，不易觀察。
四、異染顆粒染色
用於白喉棒狀杆菌染色，異染顆粒可明顯地被顯示出來。
標本直接塗片或細菌塗片均可用改良阿伯特(Albert)法染色來觀察異染顆粒。
試 劑
甲液： 甲苯胺藍 0.15g
孔雀綠 0.2g
冰醋酸 1ml
95％乙醇 2ml
蒸餾水 100ml
將各染料先溶於乙醇，然後加入水與冰醋酸的混合液中，充分混勻。靜置24h後過濾備用。
乙液： 碘 2g
碘化鉀 3g
蒸餾水 300ml
先將碘化鉀加少許蒸餾水(約2m1)，充分振搖，待完全溶解，再加入碘，使完全溶解後，加蒸餾水至300ml。
染色方法
1. 塗片經火焰固定，加甲液，染3～ 5 min。水洗。
2．滴加乙液，染l min。水洗。
3．幹後鏡檢，菌體呈綠色，異染顆粒呈藍黑色。
五、墨汁莢膜染色
用於觀察菌體有無莢膜結構，借此鑒定某些菌，如新型隱球菌。
傳統的方法是用印度墨汁，但目前國內無售。常規工作可以用墨汁或墨水代替，但應注意顆粒不能太粗，否則影響觀察結果。有人用5％黑色素(nigrosin)水溶液做染料，效果較好。
試 劑
印度墨汁或5％黑色素水溶液。
染色方法
將標本與1滴染色液在載玻片上混合，加上蓋玻片，輕輕壓一下，使標本混合液變薄。在低倍鏡下尋找有莢膜的菌細胞。找到後，轉換高倍鏡確認。
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