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噬菌體



錄入時間:2010-8-4 10:21:39 來源:微生物學——沈萍主編

1939年,Max Delbruck & Emory Ellis對噬菌體(E. coli / bacteriopage)生長特征的測定: 
1、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細胞;
2、數分鍾後,加入抗噬菌體的抗血清(中和未吸附的噬菌體) ; 
3、將上述混合物大量稀釋,終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細胞; 
4、保溫培養並定期檢測培養物中的噬菌體效價(對噬菌體含量進行計數);
5、以感染時間為橫坐標,病毒的感染效價為縱坐標,繪製出病毒特征性的繁殖曲線;
 
有尾噬菌體:注射方式將噬菌體核酸注入細胞 
1)通過尾部刺突固著於細胞;
2)尾部的酶水解細胞壁的肽聚糖,使細胞壁產生小孔; 
3)尾鞘收縮,核酸通過中空的尾管壓入胞內,蛋白質外殼留在胞外; 
 
λ 噬菌體的的溶源性反應: 
1)早期基因表達,產生 gpcII,gpcro及 gpcIII,後者可防止宿主的裂解酶對 gpcII 的降解。 
2)gpcII 的積累促使阻遏蛋白 cI的表達,阻遏蛋白 cI 的積累導致噬菌體基因轉錄的終止,形成原噬菌體。 
3)早期表達的 gpcro與 cI的競爭最終確定 λ 噬菌體是進入溶源狀態,還是進入裂解循環。 
4) (  gpcro 表達得早,但與基因組的結合能力較 cI弱) 
5)阻遏蛋白 cI 的同樣可以抑製其它新侵入的 λ 噬菌體的表達,從而使溶源性細菌具有“免疫性” 
6)阻遏蛋白 cI在一般情況下通過自身的轉錄激活保持低水平的表達,但有時種種原因轉錄水平下降,會偶爾導致溶源性噬菌體進入裂解循環(10­5~10 ­ 2) 。 
7)外界因素如紫外線可引起宿主的染色體的破壞,宿主產生應急反應合成具有  DNA 
重組活性的 RecA 蛋白,導致 cI的被降解,噬菌體進入裂解循環。
8)誘發裂解是檢查是否存在溶原性細菌的有效方法

 

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