一、目的要求
1、了解顯微鏡的構造，掌握顯微鏡的使用方法；2、了解細菌的光學顯微特征。
二、基本構造
普通光學顯微鏡構造主要分為三部分:機械部分照明部分光學部分。
1.機械部分
（1）鏡座：是顯微鏡的底座，用以支持整個鏡體。
（2）鏡柱：是鏡座上麵直立的部分，用以連接鏡座和鏡臂。
（3）鏡臂：一端連於鏡柱,一端連於鏡筒。
（4）鏡筒：連在鏡臂的前上方，鏡筒上端裝有目鏡，下端裝有物鏡轉換器。
（5）物鏡轉換器：接於棱鏡殼的下方，可自由轉動，盤上有3－4個圓孔，是安裝物鏡部位，轉動轉換器，可以調換不同倍數的物鏡。
（6）載物台：在鏡筒下方，形狀有方、圓兩種，用以放置玻片標本，中央有一通光孔，我們所用的顯微鏡其鏡台上裝有玻片標本推進器，推進器左側有彈簧夾，用以夾持玻片標本，鏡台下有推進器調節輪，可使玻片標本作左右、前後方向的移動。
（7）焦距調節輪：是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋，可使鏡台作上下方向的移動以調節觀察焦距。
2．照明部分
裝在鏡台下方，包括反光鏡，集光器。
（1）反光鏡：裝在鏡座上麵，可向任意方向轉動，它有平、凹兩麵，其作用是將光源光線反射到聚光器上，再經通光孔照明標本，凹麵鏡聚光作用強，適於光線較弱的時候使用，平麵鏡聚光作用弱，適於光線較強時使用。
（2）集光器位於鏡台下方的集光器架上，由聚光鏡和光圈組成，其作用是把光線集中到所要觀察的標本上。
①聚光鏡：由一片或數片透鏡組成，起匯聚光線的作用，加強對標本的照明，並使光線射入物鏡內，鏡柱旁有一調節螺旋，轉動它可升降聚光器，以調節視野中光亮度的強弱。
②光圈：在聚光鏡下方，由十幾張金屬薄片組成，其外側伸出一柄，推動它可調節其開孔的大小，以調節光量。
3.光學部分
（1）目鏡：裝在鏡筒的上端，通常備有2－3個，上麵刻有5×、10×或15×符號以表示其放大倍數，一般裝的是10×的目鏡。
（2）物鏡：裝在鏡筒下端的旋轉器上，一般有3－4個物鏡，其中最短的刻有“10×”符號的為低倍鏡，較長的刻有“40×”符號的為高倍鏡，最長的刻有 “100×”符號的為油鏡，此外，在不同的鏡頭上加有一圈不同顏色的線，以區別不同的鏡頭。
在物鏡上，還有鏡口率(N.A.)的標誌，它反應該鏡頭分辨力的大小，其數字越大，表示分辨率越高，各物鏡的鏡口率如下表：
物鏡 鏡口率(N.A.) 工作距離(mm)
10× 0.25 5.40
40× 0.65 0.39
100× 1.30 0.11
表中的工作距離是指顯微鏡處於工作狀態(物象調節清楚)時物鏡的下表麵與蓋玻片(蓋玻片的厚度一般為0.17mm)上表麵之間的距離，物鏡的放大倍數愈大，它的工作距離愈小。
顯微鏡的放大倍數是物鏡的放大倍數與目鏡的放大倍數的乘積，如物鏡為10×，目鏡為10×，其放大倍數就為10×10=100
三、實驗器材
枯草芽孢杆菌及大腸杆菌固定片、二甲苯、香柏油、擦鏡紙、顯微鏡
四、方法與步驟
1．低倍鏡的使用方法
（1）取鏡和放置：顯微鏡平時存放在櫃或箱中，用時從櫃中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗台上，鏡座後端距桌邊 1－2寸為宜，便於坐著操作。
（2）對光：用拇指和中指移動旋轉器，使低倍鏡對準鏡台的通光孔。打開光圈，上升集光器，並將反光鏡轉向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時調節反光鏡方向，直到視野內的光線均勻明亮為止，有內置光源的隻需通過調節位於鏡座上的光調節紐以調節進光強度。
（3）放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡台上，一定使有蓋玻片的一麵朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然後旋轉推片器螺旋，將所要觀察的部位調到通光孔的正中
（4）調節焦距：以左手按逆時針方向轉動粗調節器，使鏡台緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處，應注意在上升鏡台時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側看著鏡台上升，以免上升過多，造成鏡頭或標本片的損壞。然後，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉動粗調節器，使鏡台緩慢下降，直到視野中出現清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心，可調節推片器將其調到中心(注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的)。如果視野內的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調節，如果在調節焦距時，鏡台下降已超過工作距離(>5.40mm)而未見到物象，說明此次操作失敗，則應重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡台。
2．高倍鏡的使用方法
（1）選好目標：一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調到中心，同時把物象調節到最清晰的程度，才能進行高倍鏡的觀察。
（2）轉動轉換器，調換上高倍鏡頭，轉換高倍鏡時轉動速度要慢，並從側麵進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調好，應重新操作。
（3）調節焦距：轉換好高倍鏡後，用左眼在目鏡上觀察，此時一般能見到一個不太清楚的物象，可將細調節器的螺旋逆時針移動約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調節器!)
如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調節，如果需要更換玻片標本時，必須順時針(切勿轉錯方向)轉動粗調節器使鏡台下降，方可取下玻片標本。
3. 油鏡的使用方法
（1）先用粗調節旋鈕將鏡筒提升（或將載物台下降）約2cm，並將高倍鏡轉出；
（2）在玻片標本的鏡檢部位滴上一滴香柏油；
（3）從側麵注視，用粗調節旋鈕將載物台緩緩地上升，（或鏡筒下降），使油浸物鏡浸入香柏油中，使鏡頭幾乎與標本接觸；
（4）從接目鏡內觀察，放大視場光闌及聚光鏡上的虹彩光圈（帶視場光闌油鏡開大視場光闌），上調聚光器，使光線充分照明。用粗調節旋鈕將載物台徐徐下降（或鏡筒上升），當出現物像一閃後改用細調節旋鈕調至最清晰為止。如油鏡已離開油麵而仍未見到物象，必須再從側麵觀察，重複上述操作；
（5）觀察完畢，下降載物台，將油鏡頭轉出，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，再用擦鏡紙蘸少許乙醚酒精混合液（乙醚2份，純酒精3份）或二甲苯，擦去鏡頭上殘留油跡，最後再用擦鏡紙擦拭2—3下即可，（注意向一個方向擦拭）；
（6）將各部分還原，轉動物鏡轉換器，使物鏡頭不與載物台通光孔相對，而是成八字形位置，再將鏡筒下降至最低，降下聚光器，反光鏡與聚光器垂直，用一個幹淨手帕將接目鏡罩好，以免目鏡頭沾汙灰塵。最後用柔軟紗布清潔載物台等機械部分，然後將顯微鏡放回櫃內或鏡箱中。
五、注意事項
1．持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。
2．輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實驗台的邊緣，以免碰翻落地。
3．保持顯微鏡的清潔，光學和照明部分隻能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機械部分用布擦拭。
4．水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡台，如果沾汙應立即擦淨。
5．放置玻片標本時要對準通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。
6．要養成兩眼同時睜開的習慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。
7．不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。
8．使用完畢後，必須複原才能放回鏡箱內，其步驟是：取下標本片，轉動旋轉器使鏡頭離開通光孔，下降鏡台，平放反光鏡，下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實驗台櫃內。最後填寫使用登記表。
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