一、L 型細菌增菌培養基
（一）高滲液體L 型細菌菌增菌培養基
[用途]
可用作基礎培養。也用於血液、骨髓、胸水等標本進行L 型細菌增菌培養
1 高滲鹽液體增菌培養基
[配法]
新鮮牛肉500g ，蛋白腖10g ，氯化鈉40g ，蒸餾水1L。
將新鮮牛肉去除脂肪、筋膜，切成小塊後用絞肉機絞碎，稱取500g 加水1L 混合後置冰箱浸抱過夜；將肉浸液煮沸30min ，然後用麻布或絨布擠壓過濾；加入蛋白腖、氯化鈉後加熱溶解，並補足因蒸發而失去的水分，調整pH 至7.4-7.6 ；用濾紙過濾後分裝小瓶，121 ℃ 滅菌15-20 min。
2 高滲糖液體增菌培養基
[用途]
用於血液、骨髓、胸水等標本的L 型細菌增菌培養
[配法］
新鮮牛肉500g ，蛋白腖10g ，氯化鈉30g ，蔗糖150g ，蒸餾水1L 。
同上述高滲鹽培養基，唯高壓蒸汽滅菌時采用115 ℃ 20min ，以免蔗糖分解>
[用法]
取血液5ml及其它標本直接種於高鹽、高滲糖液體培養基，置35 ℃ 培養1-7天，每天觀察細菌生長清況在上述增菌培養基上，L 型細菌呈顆粒狀生長，顆粒可粘附於管壁或沉澱於管底。
[質量控製]
金黃色葡萄球菌L 型生長良好
（二）L 型增菌培養基
[用途]
用於血液、腦脊液等體液標本中L 型細菌的增殖培養
[配法]
(1)牛肉浸液1L ，氯化鈉30-40g ，蛋白腖（優質）20g
(2) 牛肉浸液1L ，氯化鈉30g ，蔗糖150g ，蛋白腖20g
將各成分稱量混合加熱溶解後，校正pH 至7.4-7.6 ，分裝培養瓶，每瓶15ml，121 ℃ 滅菌15min 備用。
[用法]
用無菌操作采集標本，立即接種於L 型細菌液體培養基和常規血液增菌培養基內，標本與培養基之比為1: 10 ，置35 ℃ 培養3-7天，逐日觀察。如發現培養液產生混濁、溶血、絮狀沉澱或瓶壁上附有粘性顆粒等細菌生長現象，立即分離至L 型細菌分離平板上進行鑒定。
[質量控製]
用L 型細菌做生長試驗，培養24-72h ，生長良好。
[保存]
置4 ℃ 冰箱內使用1-2 周。
二、L 型細菌分離瓊脂培養基
[用途]
用於常見L 型細菌的分離培養
1. Kaqan 分離平板
[配法]
牛肉浸液800ml ，氯化鈉50g，蛋白腖（Oxoid ) 20g ，瓊脂粉（Oxoid）8g ，血漿（人、馬、羊）200ml 將前四種成分稱量混合加熱溶解，校正pH 至7.5 士0.1 ，分裝每瓶80ml，121 ℃ 滅菌15min 冷藏備用。
臨用時加熱溶解後，冷卻至56 ℃ 加入血漿20ml搖勻傾注平板。放在密封塑料袋中，置4 ℃ 冰箱備用。
注：血漿要預先滅菌處理，並經56 ℃ 水浴滅活30min。
2 蚌埠85-7分離平板
[配法]
牛肉浸液1L ，氯化鈉40g ，蛋白腖30g ，明膠(生物試劑）30g ，瓊脂粉5-8g 。
將上述成分混合，加熱溶解，校正pH 至7.4-7.6 ，分裝後，經121 ℃ 滅菌15 min 後傾注平板，置4 ℃ 冰箱備用。
[用法]
將血、腦脊液、尿等標本或增菌培養物滴種於平板約0.1ml，用L 型玻棒均勻塗開，置35 ℃ 溫箱內啟蓋片刻，除去平板表麵水分。在平板的邊端貼一片專用誘導紙片。覆蓋後置35 ℃ 10 ％二氧化碳環境下3-5 天逐日觀察。如有可疑L 型菌落，用低倍鏡檢查。在誘導區與非誘導區同時見到L 型菌落說明標本內確有L 型細菌存在；若誘導區存在L 型菌落，而非誘導區無，則提示標本內有L 型細菌變異的趨向。
[質量控製]
(1)細菌誘導試驗，在該平板上能誘導金黃色葡萄球菌Coweng I標準菌株出現L 型菌落和G 型菌落。
(2) 用L 型菌落作10-7 稀釋，取0.1ml接種，經培養獲得單個菌落和純培養。
［保存］
置4 ℃ 冰箱內，2 周用完
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