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微生物技術資料
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厭氧菌培養基



錄入時間:2010-8-18 10:56:18 來源:青島betway必威西汉姆联

一、液體培養基-石蕊牛乳培養基
[用途]
觀察細菌對牛乳的凝固及發酵作用
[配法]
新鮮脫脂牛乳1L , 20g / L 石蕊水溶液10ml(16g / L 溴甲酚紫乙醇溶液lml)( pH6.8 )。
將新鮮牛乳隔水煮沸30min ,冷卻後置4 ℃ 冰箱內過夜。用吸管吸出下層乳汁,注入另一燒瓶內,棄去上層乳脂。加入石蕊溶液,分裝試管,滅菌113 ℃ 15min (或間歇滅菌)。置35℃ 培養24-48h ,若無細菌生長,即可4 ℃ 冷藏備用
[用法]
將被檢菌接種於上述培養基中,若為芽胞梭菌,要在培養基內加入微量鐵末,於35℃ 培養8-24h 必要時可延長至14 天。
[觀察結果]
產酸   因發酵乳糖而產酸,使指示劑變為粉紅色
產氣   發酵乳糖同時產氣,可衝開上麵的凡士林
凝固   因產酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固
腖化   將凝固的酪蛋白繼續水解為腖,培養基上層液體變清,底部可留有未被完全腖化的酪蛋白
產堿   乳糖不發酵,因分解含氮物質,生成胺及氨,培養基變堿,指示劑變為藍色
不變   乳糖不發酵,指示劑無變化,與未接種管相同
白色   石蕊被還原成白色
 [質量控製]
糞產堿杆菌,堿性反應,培養基呈藍色;變形杆菌,沒有變化,培養基仍呈紫色;產氣莢膜梭菌,急驟發酵,酸凝塊被氣體破壞
注:培養基在滅菌前加入凡士林,可觀察厭氧菌對牛乳中乳糖分解清況。若全脂牛奶需行脫脂處理,該培養基pH6.8,呈紫色
二、皰肉培養基
[用途]
主要用於梭菌屬的培養
[配方]
牛肉渣0.5g,牛肉浸液7ml(pH 7.6 )。
將幹燥的肉渣0.5g裝入15mm×150mm試管內,再加入pH7.6牛肉浸液7ml,兩者高度比例為1:2 。
在試管液麵上加一層3-4mm厚度的融化凡士林。用橡皮塞塞緊,經121 ℃ 滅菌15min 後,置4 ℃ 冰箱備。
[用法]
將各種采集的標本,在2h 內取0.5ml種入培養基底層,立即置35-37℃ 厭氧恒溫箱內進行培養,2-7天觀察結果。若發現培養基有混濁、沉澱、粘性菌膜生長現象,及培養物的臭味、肉渣的消化、變色、產氣等清況,用以判斷結果,並進行塗片染色鏡檢及分離培養。一般在培養48h 以後開始觀察,直至3 周,無細菌生長,即可報告陰性
[質量控製]
破傷風杆菌或壞死梭杆菌48h 的培養物稀釋1 000 倍,接種0.01 ml,生長良好
[保存]
置4 ℃ 冰箱內,數月有效
注:培養基的管口要密封,使用時將培養基置於水浴中煮沸10min ,以除去管內殘存的氧。為提高培養效果,在底層可放少許鐵粉作為還原劑
 

 

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