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培養基的一般常用成分(1)



錄入時間:2010-8-26 15:26:06 來源:青島betway必威西汉姆联《現代細菌學培養基和生化試驗手冊》

 

(一)水

製備培養基必須使用純淨的,無微量金屬,殺菌性和抑菌性化學物質的蒸餾水。注意,以加氯的水進行蒸餾所得的蒸餾水,即使在使用前通過離子交換樹脂,也偶含有顯著量的遊離氯.所以應進行測試,如正聯甲苯胺試驗顯色。測試後,以硫代硫酸鈉中和後或進行重複蒸餾後才能使用。

(二)瓊脂

瓊脂俗稱洋菜,英文名agar ,為由海藻類(主要足石花菜)提取出來的一種膠體多糖,即半乳聚糖水解後,產生半乳糖及少量五烷糖和有機硫。其化學性質係為一種不帶側鏈的半乳聚糖甙,含有90%右旋半乳糖和10%左旋半乳糖。在約每10個吡喃半乳糖單位有一個首位或次位的羥基被硫酸脂化。其陰離子脂組(-SO2 -OH )主要是與鈣結合,但也有少數是和鎂、鈉、或鉀結合。

其製造方法,一般是在每年7-9 月收集海中石花菜,洗滌並經曬幹後保存。於冬季冰凍開始時,按130 比例將幹藻放入水中煮沸,然後加入硫酸少許並煮沸5-6 小時。過濾後待冷,用“漏子”推成粗條,再經日曬夜凍2-3 周後,即成條狀瓊脂。

除少數菌種外,絕大多數細菌都不能分解瓊脂,因而瓊脂在培養某中無營養價值,隻是在液體培養基中凝結成半固體或固體培養基而已。

國外商售瓊脂一般比較純淨,國內瓊脂則含有雜質較多,故在使用前應先用冷水浸泡洗滌後才能使用。

供細菌培養使用的品質優良的瓊脂應具有下列特性:

( l )凝固點不超過2 ,通常範圍在3438

( 2 )1L 1.5%瓊脂,在蒸汽浴中重新完全溶化,不超過45 分鍾。

( 3 )在98 能完全溶解子水。

( 4 )在45 仍保待足夠的液態,以利於試驗時的混合均勻。

( 5 )與水的結合水平至少在50%以上,以保證完全的溶解性。

6)含水量不超過原重17%

( 7 )燃燒殘餘物不超過3 %

8)金屬最高允許含量,鉛0.0005%,鐵0.001%,鎂0.1%,鈣0.2%,鈉0.4%,並不得含有抗菌物質。

( 9 )透明度:在蒸餾水中加熱溶解後,呈微乳白色透明凝塊。無混濁沉澱及微粒。

( 10 )凝膠強度:即在1.5%瓊脂平板1cm2 表麵上於20秒鍾內使其破壞的最小重量(g)。優良瓊脂應在300-400

在實際應用中,一般均將瓊脂做成按0.5%的差距,遞增至3%的生理鹽水瓊脂平板,然後用接種環或接種針試行劃線塗布,以決定該批瓊脂實際使用的濃度。

 

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