（十）石油微生物種群的分離
隨著對各海域石油的開采利用，石油對海區汙染將不可避免地影響生態平衡及漁獲量。為解決這個間題，可利用能降解石油的微生物．這首先要對此類微生物分離篩選。選出降解石油能力強的菌株進行培養利用．
1 ．培養基配製
（1）港灣鹽培養基配製：
NaCl
MgCl2·6H2O
KCl
加蒸餾水至
（2）基礎培養基配方：
葡萄糖
酵母汁
酪蛋白氨基酸（酪蛋白水解物）
純瓊脂
加海水1000 毫升
在高壓滅菌前調整供細菌用的pH7.0 ，供黴菌和酵母菌用的要調至5.5 ，高壓滅菌各培養基，冷至
（3）油鹽培養基（雙倍濃度）:
KNO3
MgSO
汽油（無去垢的）10.0毫升
蒸餾水1000毫升
① 矽酸鉀配製。在100 毫升的7%KOH 溶液內加熱溶解吸。
② 加酚紅指示劑（1.003%）於雙倍濃度油鹽培養基中。
③ 分別取① 和② 各50毫升於
④ 當油鹽培養基冷至室溫時，加0.5 毫升的KH2PO4和1 毫升的20%磷酸．
⑤ 將50 毫升的矽酸鉀溶液（pH6-7 桔紅色）傾至50毫升的油鹽培養基中，迅速混勻．而後各倒20 毫升於每個培養皿中，製成平板培養基．
⑥ 劃線前平板培養基應是幹燥的，小的培養皿可作為微孔過濾樣品的微生物數量計算。
2 ．分離步驟
（1）用采樣器分別從石油汙染海區和相對無汙染海區取水樣和底泥樣品。
（2）分別移l 毫升水樣和
（3）搖勻稀釋液後，各用無菌移液管吸取適量的原水樣及各稀釋度水樣和泥樣注入每一類型的平板培養基上，各作雙份。
（4）用無菌玻瑞曲棒塗勻平板培養基上的接種樣，
（5）接種後的培養皿於
（6）異養型細菌可培養7 天，觀察計算其菌落，利用石油的微生物．培養14天而後觀察記數．
（7）從培養的細菌中，取出不同類型的菌落，在單濃度油鹽培養基上，加上汽油5%做生長實驗。
3 ．將實驗記錄填於表2-6
表2-6 石油微生物種群分離實驗記錄表
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站位 |
異養型細菌 |
利用石油細菌 |
利用石油細菌（%） |
異樣型酵母菌 |
利用石油酵母菌 |
利用石油酵母菌（%） |
異樣型真菌 |
利用石油真菌 |
利用石油真菌（%） |
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