《水生微生物實驗法》——紅螺菌屬的富集培養與分離

(十六）紅螺菌屬的富集培養與分離

其中包括紅色紅螺菌（ 或稱深紅紅螺菌）、度光紅螺菌、巨大紅螺菌、長形紅螺菌、纖細紅螺菌（或稱細小紅螺菌）、棕黃色紅螺菌（或稱黃褐紅螺菌），此類細菌均生長於水和淤泥中，屬厭氧或微嗜氧菌，在厭氧條件下．於光亮中能合成有機物．細胞螺旋狀盤繞，長度不一，有不等數蜷曲．同種細胞的大小變化很大，有端生叢毛，能運動。細胞內含有菌紫素。菌綠素和類胡羅卜素等．故細菌呈紅色、褐紅色、絳紅色或玫瑰色不一。

1 ．富集培養

（1）培養基成分及配製：

NH₄Cl   1.0 克

K₂HPO₄    0.5 克

MgCl₂    0.2克

NaCl    0.1 克

酵母膏   0.1克

H₂O  900毫升

將上麵各物溶解於水，在121℃ 蒸汽下滅菌20 分鍾。分別製備及過濾除菌下列各液：

①5克碳酸氫鈉加50 毫升蒸餾水溶解。

② 乙醇或4%丙氨酸．

③0.1N的磷酸溶液。

在基礎培養基中加入碳酸氫鈉溶液和1.5-2.0毫升乙醇或50毫升4%丙氨酸．用0.1N的磷酸調pH 至7.0

（2）富集培養：

① 最適的接種物是暴露在光下的富含有機物的淤泥。接種時，放淤泥於50 毫升的帶玻璃塞的磨口瓶中．酌量放一層。

② 加滿培養基，塞好塞於， 隔絕空氣。

③ 置於30 ℃ 的照明箱中培養，培養物放在離照明的25 瓦鎢絲燈4 英寸處。

④ 觀察   通常在3 天內可見到液體培養基裏和淤泥曝光的一側呈現微紅色的生長物。

⑤ 從微紅色處取1 毫升的富集培養物，接種於第二瓶的富集培養基中，培養2 天．

2 ．分離培養

（1）培養基成分及配製：從上麵的富集培養基中加酵母膏至0.2%，及1.5-2.0克瓊脂（但碳酸氫鈉應改為2 克），製法同上。

另取Na₂S·9H₂O   1 克，加水10 毫升，於121 ℃ 蒸汽下滅菌15分鍾，在調pH 之前將此液加到分離培養基中，分裝，滅菌後製成平板或柱狀培養基。

（2）接種：取富集培養物於分離平板培養基上劃線或塗布接種．或用搖管法於柱狀培養基中分離．後者由於硫化鈉在培養基深處把氧氣迅速消耗，很快就形成厭氧條件。如用前一種分離法，可用焦性沒食子酸和碳酸鈉造成厭氧條件．或於其他的缺氧條件下培養

挑選具有此類細菌特征的菌落．作穿刺接種，管口塞緊後封蠟，培養，備用。

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