《水生微生物實驗法》——水中葡萄球菌的分離與觀察

這類細菌在自然界廣泛分布，從水、空氣、用具、食物及人體等均可找到，除檸檬色葡萄球菌一般不致病外，其餘兩種是致病力較強者，尤其是金黃色葡萄球菌能引起化膿性感染，故又稱為化膿性球菌，嚴重感染會導致敗血症。某些溶血菌株能產生急性胃腸炎的腸毒素。腸毒素耐熱，100℃  30分鍾不被破壞，是食物中毒常見病原之一。所以葡萄球菌也作為水質、水產品汙染的檢驗項目。通常檢驗方法是．先分離，後鑒定。

1 ．增菌培養

① 將檢樣接種於7.5%氯化鈉肉湯培養基中。

② 置於37℃下培養16-18 小時。

2 ．分離培養

（1）培養基成分及其製備：

① 蛋黃-疊氮化鈉瓊脂：

蛋白腖10 克

牛肉膏5.5克

NaCl  3 克

疊氮化鈉0.15克

Na₂HPO₄ 0.2克

瓊脂15克

蒸餾水850毫升

將上述成分加入150毫升的蛋黃溶液（蛋黃：生理鹽水=l : 1 ）混勻，分裝滅菌，製成平板，用於培養或分離金黃色葡萄球菌。

② 查普曼心培養基；

牛肉膏l克

膘蛋白腖10 克

甘露醇10 克

NaCl  75 克

瓊脂15 克

蒸餾水1000毫升

0.4%酚紅溶液6 毫升

將上麵各成分除酚紅外混合加熱溶解，校正pH 為7.4 , 分裝於燒瓶，115℃ 蒸汽下滅菌10分鍾、用時臨時傾注成平板．

③ 血瓊脂：

營養瓊脂250毫升

無菌脫纖維的兔或馬血12.5 毫升

將營養瓊脂於112℃ 溶化、自然冷卻，當冷至50-55℃時，分裝於培養皿，分別按比例加入血液，轉動混勻，凝固，備用。

( 2 ）接種與觀察：

① 將增菌的培養物蛋黃-疊氮化的瓊脂或瓊脂平板或查普曼培養基上劃線或塗布接種。

② 將平板置37℃下培養18-24小時．

③ 觀察   金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上形成的菌落呈金黃色（色素不易辨認時．可挑在濾紙上觀察）、大而突起、圓形、不透明、表麵光滑、周圍有溶血圈，在查普曼培養基上的菌落較細小，菌落周圍呈黃色（分解甘露醇）必要時可做生化鑒定和動物試驗。

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