一、實驗目的
1.培養基能夠提供植物生長、繁殖所必須的各類營養物質，以及生長因子，是開展植物組織培養研究的基礎和前提。植物的種類不同，研究的目的不同，所需要的培養基的種類也各不相同。
2.學習並掌握植物組織常用培養基的組成、配製與滅菌方法。
二、實驗用具和藥品
1. 實驗用具：電子天平（1/10、1/1000）、燒杯（100ml、1000ml）、量筒（50ml、100ml）三角瓶或培養瓶、移液管、藥匙、玻棒、pH試紙、吸耳球、牛皮紙、皮筋等。
2. 藥品：蔗糖、瓊脂、0.1mol/L NaOH、 0.1mol/L HCl、各種培養基母液、激素母液
三、實驗內容與步驟
（一）分組配製培養基。各類培養基組成如下：
1. 水瓊培養基。
2. MS0培養基。
3. 1/2MS培養基。
4. MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L。
5. MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L。
6. MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 2.0mg/L。
7. MS+KT 0.5mg/L+6-BA0.5mg/L。
8. MS+NAA 1.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L。
（二）濕熱滅菌培養基
1. 稱取規定數量的瓊脂，加水到培養基最終容積的3/4，水浴或電爐使之加熱溶解。
2. 根據配方要求，把按順序量取的各種母液以及稱取的蔗糖，都加入煮好的瓊脂中，然後加水定容。
3. 用0.1mol/L的NaOH或者HCl調pH。
4. 分裝培養基，包好或蓋好，標明編號。
5. 121℃(103kPa)滅菌15-20min。
（三）作好植物組織培養的各項準備工作
1. 製備無菌水：121℃(103kPa)滅菌40min 。
2. 配製 0.1%HgCl2溶液（放置棕色瓶中）。
3. 準備接種用培養皿、金屬器械等用具。
四、注意事項
1. 實驗中所用的各種容器一定要洗淨、烘幹。
2. 用電子天平稱量藥品時，一定要用稱量紙，對於有腐蝕性的藥品，應將其放置在小燒杯中稱量。
3. 各種母液應保存在2-4℃的冰箱中，以免變質、長黴。
4. 使用高壓滅菌鍋時，一定要正確操作，並提前檢查其中的水是否合適。
5. HgCl2屬於一種腐蝕性極強的劇毒物品，配製時要注意安全。
五、作業
1. 結合實驗操作，說明培養基配製的關鍵環節和注意事項。
配製培養基的關鍵環節是：根據配方要求，把按順序量取的各種母液以及稱取的蔗糖，都加入煮好的瓊脂中，然後加水定容。
注意事項：
1）實驗中所用的各種容器一定要洗淨、烘幹。
2）用電子天平稱量藥品時，一定要用稱量紙，對於有腐蝕性的藥品，應將其放置在小燒杯中稱量。
3）各種母液應保存在2-4℃的冰箱中，以免變質、長黴。
4）使用高壓滅菌鍋時，一定要正確操作，並提前檢查其中的水是否合適。
5）HgCl2屬於一種腐蝕性極強的劇毒物品，配製時要注意安全。
2. 根據組織培養原理和激素調節機理，預測所配1-8號培養基的作用？
1）水瓊培養基：組分均一，適宜各類接種物的營養生長，廣泛應用於實驗研究及大規模工業生產中，有利於廣泛獲得大量培養物。
2）MS0培養基：指無激素的MS培養基，為組織培養的基本培養基。
3）1/2MS培養基：指大量元素減半，其它為同MS培養基。
4）MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L：有利於誘導生芽。
5）MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L：有利於誘導形成愈傷組織。
6）MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 2.0mg/L：有利於誘導生根。
7）MS+KT 0.5mg/L+6-BA0.5mg/L：能刺激細胞分裂，誘導愈傷組織長芽。
8）MS+NAA 1.0mg/L+2,4-D 1.0mg/L：有利於愈傷組織的形成。
具體哪種成分的培養基所具有的作用，因不同植物植物而異，還要通過實驗進一步證明。
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