外植體的接種是把經過表麵消毒後的植物材料切割或分離出器官、組織、細胞,轉移到培養基上的過程。整個接種均需在無菌條件下進行操作,一切用具、材料、培養基、接種環境等都需要無菌。
1、無菌操作規程
無菌操作質量的高低決定了組織培養的成敗,組培的工序中無菌操作的環節很多,材料切割、莖尖剝離、材料轉接、封口等各個環節均要求規範、準確、迅速,任何一步做不好就會導致失敗。
2、材料的分割、切割和接種
較大的材料肉眼觀察即可操作分離,較小的材料需要在解剖鏡下放大操作。分離工具要鋒利,切割動作要快,防止擠壓,避免使用生鏽的刀片,以防止氧化現象產生。用滅菌過的器械,將切割好的外植體插植到培養基表麵上。培養材料在培養容器內的分布要均勻,以保證必要的營養麵積和光照條件。莖段基部插入固體培養基中,莖尖下端置於培養基表麵,葉片通常將葉背接觸培養基,這是由於葉背氣孔多,利於吸收水分和養分的緣故。所有材料接種完畢,應做好標記,注明材料名稱、接種日期等。
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