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植物組培中材料培養的條件



錄入時間:2010-10-13 13:20:34 來源:植物組培網

接種後的外植體應轉移到培養室進行培養,培養條件要根據植物對環境條件的不同需求進行調控。培養室控製的條件主要有溫度、光照、濕度和氣體。
1、溫度
溫度是植物組織培養中的重要因素,在適宜的溫度下植物才能良好的生長、分化。多數植物適宜生長溫度是在20~30℃,低於15℃時生長停止,高於35℃會抑製正常生長和發育。一個培養室內往往培養著許多種植物,為適合大多數植物生長,培養室的溫度一般設定在(25±2)℃。
植物在自然界中長期進化的結果,不同的植物對環境溫度的要求各異。一般生長在高寒地區的植物,其最適生長溫度較低;而生長在熱帶地區的植物,則對環境溫度相對要求較高。如馬鈴薯在20℃情況下培養效果較好,菠蘿在28-30℃情況下培養效果較好。在條件允許的情況下,可設立多個小培養室,根據不同植物對環境溫度的要求來設定培養室溫度。同時,也可根據培養室內上下層架的溫差來調節,一般培養室內最上層與最下層的溫差為2-3℃。
2、光照
光是植物進行光合作用必不可少的條件之一,對離體培養物的生長發育具有重要的作用。光照的影響主要表現在光照強度、光照時間和光質3個方麵。
(1)光照強度
    對多數植物來說,1000~4000lx的光強即能滿足其生長的需要。器官的分化需要光照,並隨著試管苗的生長,光照強度需要不斷地加強,才能使小苗生長健壯,並促進它從“異養”向“自養”轉化,以提高移植後的成活率。通常在初代培養和繼代培養階段,1000~2500lx即可滿足要求。而對於生根壯苗階段,宜提高到3000~3500lx甚至10000lx。光照強度強,幼苗生長得粗壯,而光照強度弱,幼苗容易徒長。
對愈傷組織的誘導來說,暗培養比光培養更合適,可用鋁箔或者適合的黑色材料包裹在容器的周圍,或置於暗室中培養。另外,在有些植物組織培養中,光的存在有時會抑製根的形成,這是可以在培養基中加入活性炭,提高根的形成率。
(2)光照時間
普通培養室要求每日光照12~16h。生產中,在不影響材料正常生長的條件下,盡量縮短光照時間,減少能源消耗,降低生產成本。在進行葡萄莖段培養時,對日照敏感的品種隻有在短日照條件下才能形成根,而對日照長度不敏感的品種在任何條件下培養均可以形成根。
(3)光質
光質對細胞分裂和器官分化也有很大影響。如在香石竹的培養中,藍光有利於誘導側芽產生,還有利於蛋白質含量的增加;紅光可以促進芽增長,並且生長整齊。白光有利於試管苗的生長發育,生物產量最高;紅光次之;藍光促進提高莖葉中的還原糖含量,但對總糖的影響不大;白光還能增大葉綠素的合成。在唐菖蒲的子球切塊培養中,在藍光下出苗比在白光和紅光下早,且幼苗生長旺盛,根係粗壯;白光下幼苗纖細;紅光下出苗量少。而紅光對百合和四季豆愈傷組織的誘導和生長比在白光下好。光質對植物組織分化的影響,目前尚無一定規律可循,這可能是不同植物對光信號反應不同所致。但如果能把這些光質的作用,有意識地運用到種苗的規模化生產中,可達到節省能源,提高產量的目的。
3、濕度
組織培養中的濕度影響主要有培養容器內濕度和培養環境濕度兩方麵。
(1)培養容器內的濕度
容器內的濕度可保持在100%,之後隨著培養時間的推移,相對濕度也會有所下降。容器內的濕度主要受瓊脂含量和封口材料的影響,在冬季應適當減少瓊脂用量,否則,將使培養基幹硬,不利於外植物體接觸或插進培養基,導致生長發育受阻。在培養容器封口材料選擇上應十分注意,所選擇的封口材料至少要保證在一個月內有充足水分來滿足外植體的需要。如果培養容器內水分散失過多,培養基滲透壓升高,會阻礙培養物的生長和分化。當然,封口材料過於密閉,影響氣體交流,導致有害氣體難於散去,也會影響培養物的生長和分化。
(2)培養室的環境濕度
環境濕度變化隨季節和大氣而有很大變動。濕度過高或過低對培養材料的生長都是不利的,過低會造成培養基失去而幹枯,影響培養物的生長和分化;濕度過高會造成雜菌滋生,導致大量汙染。培養室的相對濕度一般要保持在70%~80%,濕度過高時可用除濕機降濕,過低時可采用噴水或拖地來增濕。
4、氣體環境
    植物組織培養中,植物的呼吸需要氧氣。在液體培養中,需進行振蕩和旋轉或淺層培養以解決氧氣供應。在固體培養中,接種時不要把培養物全部埋入培養基中,以避免氧氣不足,剛剛切割後的外植體會產生乙烯,造成材料的老化,從而影響生長和分化。另外,培養物產生二氧化碳,當濃度過高時,也會阻礙培養物的生長和分化。因此要注意瓶內與外界保持通氣狀態,最好采用通氣性好的瓶蓋、有濾氣膜的封口材料或棉塞。培養室要可適當通風換氣,改善室內的通氣狀況,每次通風後要進行一次消毒,避免引起培養汙染。

 

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