噬菌體的鑒定

將一定的樣品放入滅菌三角瓶中，加入對數生長期的敏感指示菌如大腸杆菌菌液3～5mL，再加20mL二倍肉湯蛋白腖培養液。

2 增殖培養

30℃振蕩培養12～18h, 使噬菌體增殖。

3 離心分離

將上述培養液以3000rpm離心15～20min, 取上清液，用pH7.0，1%蛋白腖水稀釋至10-2～10-3，用於噬菌體檢查及效價測定。

4 生物測定法

4.1雙層瓊脂平板法

4.1.1 倒下層瓊脂  融化下層培養基，倒平板（約10mL/皿）待用。

4.1.2倒上層瓊脂

融化上層培養基，待融化的上層培養基冷卻至50℃左右時，每管中加入敏感指示菌 (大腸杆菌) 菌液0.2mL，待檢樣品液或上述噬菌體增殖液0.2～0.5mL，混合後立即倒入上層平板鋪平。

4.1.3恒溫培養  30℃恒溫培養6～12h觀察結果。

4.1.4 觀察結果  如有噬菌體，則在雙層培養基的上層出現透亮無菌圓形空斑──噬菌斑。

4.2 單層瓊脂平板法

省略下層培養基，將上層培養基的瓊脂量增加至2%，融化後冷卻至45℃左右，如同上法加入指示菌和檢樣，混合後迅速倒平板。30℃恒溫培養6～16h後觀察結果。

4.3離心分離加熱法（快速檢查）

取大腸杆菌正常培養液和侵染有噬菌體的異常大腸杆菌培養液，4000rpm離心20min，分別取兩組發酵液的上清液(A1)，一部分於721分光光度計上測定OD650光密度值，另外各取5mL上清液於試管中，置水浴中煮沸2min（A2），檢測A2溶液OD650光密度值，記錄結果。

上一篇：病毒RNA傳統提取方法

下一篇：抗豬流行性腹瀉病毒卵黃抗體（PEDV-IgY）及其特性研究