TTC嗜鹽培養基的實驗觀察

材料與方法

1   培養基  嗜鹽性培養基配製按文獻進行，根據實驗設計選擇含NaCl為0％、3％、6％及10％  4種濃度。配製（0％NaCl）的TTC溶液．按不同量加於上述4種濃度的嗜鹽培養 基中，使TTC終濃度分別為0.10／萬、0.25／萬、0.50／萬、1.00／萬、2.00萬、3.00／萬和 4.00／萬。即成TTC嗜鹽培養基,分裝小口徑試管，滅菌後備用

2 實驗菌株  本參加WHO質控鑒定菌株及本站分離保存菌株。

3 實驗方法  將實驗各菌種分別接種於含不同濃度TTC嗜鹽培養基，37℃培養18—24h．觀察結果。

4 培養基高壓滅菌 將含TTC的培養基分別置15 p  15 min、12 p 15min、10 p  12 min三種條件下蒸汽高壓滅菌，觀察滅菌後顏色變化。 

5 培養基保存條件的實驗 將滅菌後培養基置冰箱室內避光，室內不避光三種環境中，觀察保存變化。

結果與討論

1   弧菌科各菌屬  24株菌和9株化膿性球菌經不同濃度TTC嗜鹽培養基培養18h後的結果，見表1 表 2 。 

表 1   弧菌科細菌在不同含量TTC培養基培養18小時的顯色情況表

注：“+”表示顯色程度；“-”表示不顯色 

2 部分化膿性球菌在不同含量 TTC培養基培養 18小時的顯色情況

注：“+”表示顯色程度；“-”表示不顯色

      表中顯示經18 h培養即出現明顯紅色， 以往常需培養48h才能肉眼判斷生長是否混濁．因此作為指示劑．方便了結果觀察且縮短了報告時間

2 TTC濃度選擇 ：TTC抑製試驗．於上述培養基中分別接種定量(每毫升約含10萬個細菌)的弧菌及部分耐鹽球菌連續實驗5次，結果在0.10～3.00／萬 範圍內．弧菌科細菌生 長未受抑製：超過2.00／萬時．嗜鹽球菌生長受抑製，從表1、表2分析顯色情況．弧菌科細菌在TTC終濃度0.10／萬時顯色最弱，呈微紅色，其餘濃度顯色基本一致： 部分化膿性 球菌在終濃度0.10／萬、0.25／萬時顯色最弱。根據抑製試驗和顯色情況綜合分析．我們從 為弧菌以終濃度0.25／萬為宜．部分化膿性球菌選擇TTC終濃度0.50／萬為宜 。

3.TTC嗜鹽培養基高壓滅菌條件選擇：將含TTC培養基分別置15p 15min、12p  15min,10p 12min  3種條件下經電熱手提式高壓蒸汽滅菌器滅菌，各試驗5次。結果經15  15min 後培養基顯示肉眼可見的微紅色．表示TTC已被部分破壞而另外 2種條件下肉眼覺 察不到紅色。因此．我們認為TTC可溶入培養基中一起高壓滅菌．隻需控製相應的壓力和時間．故可省去對TTC溶液過濾除菌和臨用時加入之煩

 4 TTC嗜鹽培養基在保存條件的觀察：將已滅菌的培養基置室內避光或冰箱保存1個 月，無顏色變化，甚至置室內不避光保存也無顏色變化，因此該培養基在保存過程中不受光線對TTC分解的影響。

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