產氣莢膜梭菌

      產氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens）是一種革蘭氏陽性、產生芽胞、嚴格厭氧及形成特殊莢膜的梭狀杆菌，是梭狀芽胞菌屬中的主要成員之一[9,11]。該菌廣泛存在於自然界的水源、土壤及人和動物腸道之中 [1,2,3]。研究發現，該菌至少可以產生15種以上的毒素[11]，但目前僅有5~6種毒素，即α、β、ε、ι毒素及腸毒素（CPE）、β2毒素等被認為是該菌的主要致病性毒素。其中CPE和β2毒素是人食物中毒及胃腸疾病的重要致病因子[10]。
    根據產氣莢膜梭菌產生四種致死性毒素（α、β、ε、ι毒素）的能力，將其分為五種類型，即A、B、C、D、E型[7]。
表1.  產氣莢膜梭菌的毒素分型
        Atpha        Beta        Epsilon        Iota
A        +        －        －        －
B        +        +        +        －
C        +        +        －        －
D        +        －        +        －
E        +        －        －        +

    A型產氣莢膜梭菌是引起人的食物中毒和氣腫疽的主要病原體，亦可引起動物的壞死性腸炎和腸毒血症[18,19]；C型產氣莢膜梭菌可以引起人的壞死性腸炎以及各種動物的腸毒血症；B型和D型產氣莢膜梭菌主要存在於動物的腸道中，作為一種條件致病菌可引起動物發生腸毒血症；E型產氣莢膜梭菌通常很難從動物體內分離，偶爾可以從犬或貓的腸道中分離，其致病性目前不是十分清楚。
    產氣莢膜梭菌是繼沙門氏菌、葡萄球菌後引起食物中毒的又一重要的病原菌。由於它存在廣泛，因而傳播也比較容易。其中部分A型產氣莢膜梭菌還產生一種在生物醫學上具有重要意義的毒素，即腸毒素（CPE），該毒素致病性很強，並可引起人的食物中毒[12]。根據美國疾病控製中心（CDC）的統計資料，在1993~1997年之間，CPE陽性A型產氣莢膜梭菌引起的食物中毒的病例，僅次於沙門氏菌和葡萄球菌引起的食物中毒病例，約占食物中毒病例總數的4~10% [13]。目前的最新統計數據表明，每年美國由產氣莢膜梭菌引起的食物中毒人數在250,000左右，其中約有十人死亡，每年造成的經濟損失在1.2億美元左右[15]。流行病學調查發現，平均每起由產氣莢膜梭菌引起的食物中毒事件的暴發，通常涉及50~100人。有些嚴重的食物中毒暴發甚至涉及到上千人。當食品在加工或烹調時，由於加熱不充分，以及在冷凍貯藏過程中，操作不當，該菌常常可以存活於食品中，一旦人們食入汙染的食品，產氣莢膜梭菌就進入體內，並在腸道內繁殖形成芽胞，產生CPE。該毒素導致腸粘膜上皮細胞的損傷，從而引起人的食物中毒[3]。
    在過去十幾年的研究中，人們還發現CPE陽性A型產氣莢膜梭菌與幾種人的非食源性腹瀉有密切的關係[8]。目前已從病人的糞便中分離出CPE陽性的A型產氣莢膜梭菌，並將其確定為人的抗生素相關性腹瀉的病原體[4,,6]。有些學者通過對人食物中毒的CPE陽性A型產氣莢膜梭菌和人的抗生素相關性腹瀉的CPE陽性A型產氣莢膜梭菌的cpe基因進行比較，結果發現cpe基因序列相同，但該cpe基因位置可存在於細菌染色體上也可以存在於細菌的質粒上，當cpe基因位於細菌染色體上時，該種CPE陽性產氣莢膜梭菌可以引起人的食物中毒，而cpe基因位於細菌質粒上時，引起人的非食源性腹瀉[7,14]。
    正確區分不同菌型的產氣莢膜梭菌對判定和診斷人與動物的疾病十分重要。以往我們鑒定產氣莢膜梭菌的菌型時，通常采用經典的動物體內中和試驗的方法 [12]，但這些方法操作繁瑣，而且常常受到實驗動物來源和品質的影響，從而出現誤判。同時由於某些產氣莢膜梭菌經過長期人工培養和保存後，往往會失去某些生物學特性，影響檢測的結果。因此，研製和推廣具有靈敏、快速、簡便等優點的產氣莢膜梭菌的檢驗方法勢在必行，而且將具有很大的實踐意義。文其乙等建立了一係列的PCR方法，用來對產氣莢膜梭菌進行基因分型、亞基因分型及對CPE陽性A型產氣莢膜梭菌的cpe基因定位。這些方法可以大大提高產氣莢膜梭菌檢驗工作的質量和工作效率，具有快速、簡便、準確、易推廣等優點。