奈替米星的體內抗生素後效應

　　抗生素後效應(PAE)是指抗菌藥物引起細菌的非致死性損傷或藥物與 細菌靶位持續結合 ，當藥物消失後細菌仍受到藥物持續抑製的現象。但因體內影響因素很多，PAE不是一個恒 量，正確估算人體內PAE有利於臨床優化給藥方案。奈替米星屬氨基糖苷類抗生素,對金黃色 葡萄球菌、大腸杆菌和綠膿杆菌等存在明顯的體外PAE，其腎耳毒性明顯低於其它氨基糖 苷類抗生素。為進一步探討人體奈替米星的合理用藥方案，本實驗測定了6例下呼吸道感染 患者靜滴奈替米星後的血藥濃度並估算了其對痰中分離細菌的體內PAE。

1　材料和方法                                  

1.1　臨床資料　全部為下呼吸道感染患者，胸片均有實性浸潤陰影，其中男5例，女1例；年齡25～78歲。治療前病人無腎、耳病史，聽力良好，無眩暈症狀；並收 集痰標本進行細菌鑒定。
1.2　給藥方案　奈替米星(netilmycin, NTL,由Schering-Plough公司提供)按6 m g^．kg^-1溶於5％葡萄糖注射液100 ml中，30 min滴完。在第一天用藥畢即刻，0.5 ，1，2，4，6，12，24 h，分別從對側肘靜脈取血2 ml，離心收集血清-70℃冷凍待測。實驗 後繼續治療,全療程用7～14 d，平均10 d。TDX熒光偏振免疫分析儀(美國雅培公司)檢測血 中奈替米星濃度並計算不同時間段的AUC。
1.3　PAE的測定
1.3.1　受試菌　標準質控菌:金黃色葡萄球菌(ATCC2 5923)，大腸埃希氏菌(ATCC 25922)，綠膿假單胞菌(ATCC 27853)。臨床分離菌:綠膿假單胞菌2株，表皮葡萄球菌、肺炎克雷白氏菌、糞腸球菌和大腸埃希氏菌各1株。將受試菌過夜培養，以M-H肉湯稀釋成2×10 ⁶cfu.ml^-1菌懸液。
1.3.2　實驗器材和培養基　AVANTAGE微生物分析儀(美國ABBOT公司)；96孔微量平板；Mueller-Hinton(M-H)肉湯。
1.4　實驗方法
1.4.1　測定MIC　采用標準微量平板法^［1］。
1.4.2　測定體內PAE　采用光密度法測定。將各患者給藥後即刻,0.5,6,1 2 h血清分別與菌懸液混合1 h，以M-H肉湯進行1∶400稀釋，用AVANTAGE分析儀描記細菌恢複生長的時間-光密度曲線。以實驗組與對照組細菌恢複對數生長期透光度值下降5%所需時間差定為PAE，用公式PAE=T-C計算，式中T、C分別為實驗組和對照組透光 度下降5%所需時間。
1.4.3　計算AUC與PAE回歸方程和相關係數　各時間段的AUC按梯形麵積法 計算 即:以各取血點的血藥濃度與反應時間段(h)的乘積,將與AUC(X)對相應PAE(Y) 回歸得回歸方程和相關係數(見表1)。

表 1　靜滴奈替米星後AUC與標準質控菌和
臨床分離菌PAE相關性及12 h累加PAE的估算

1.4.4　體內累加PAE的估算　將各時間段AUC值代入回歸方程求得PAE ^{［2 ］}，將各時間段的PAE之和作為體內累加PAE的結果。

2　結果

2.1　奈替米星血藥濃度測定　見表2。

表 2　6例患者滴注奈替米星(6 mg^．kg^-1)後的血藥濃度(μg^．m l^-1,x±s) 

2.2　奈替米星各時間段的AUC和平均AUC(μg^．h^．ml^-1) 　見表3。

表 3　6例患者靜滴奈替米星後各時間段AUC(μg^．h^．ml^-1) 

2.3　靜滴奈替米星對各受試菌的MIC和各時段的PAE(h)　見表4。

表 4　靜滴奈替米星對各受試菌各時段PAE(h) 

2.4　靜滴奈替米星後AUC與標準質檢菌和臨床分離菌PAE相關性及1 2 h累加PAE的估算　見表4。

3　討論

　　氨基糖苷類抗生素每日1次給藥已逐步取代了傳統的每日多次給藥方案，其主要理論依 據為抗生素後效應(PAE)。隨著人們對PAE的認識，改變了傳統抗生素應用的概念。通常認為 對於不具有明顯PAE的藥物，最適給藥間隔為血藥濃度超過MIC的時間，而具有明顯PAE的藥 物，最適給藥間隔為血藥濃度超過MIC的時間加上PAE的時間^［3］。由於人體複雜的 病理生理 狀態、免疫功能狀態和藥物動力學的因素，體外所測的PAE尚不能精確反映人體內PAE，為此 ，我們進一步探討奈替米星藥動學參數與PAE的關係，為臨床合理用藥提供了一種新的依據 。
　　本結果表明，奈替米星在0～12 h內對絕大多數標準質控菌和臨床分離菌產生不同程度的 PAE，對標準質控菌的PAE普遍長於臨床分離菌，這與受試菌對抗菌藥物的敏感程度有關。通常耐藥菌的PAE值明顯低於敏感菌株^［4］，本文中分離的糞腸球菌MIC＞64 μg^．ml -1，為高度耐藥菌，所測各時段PAE值僅0.4～1.7 h，明顯低於標準質控菌和其他臨床 分離菌；臨床分離菌大腸杆菌PAE值很小，甚至幾乎沒有，也與該菌株為中度耐藥有關。除2 株耐藥菌之外，對敏感菌體內12 h累加PAE最大值達36.86 h。體內PAE長於體外PAE的原因是 由於機體免疫係統與抗生素對細菌共同作用以及藥物在體內長時間持續作用的結果^{［5 ］}。
　　氨基糖苷類抗生素PAE呈濃度依賴性^［6］，該類藥在峰值濃度或藥-時曲線下麵積( AUC)最大時，抗菌活性最強，PAE值最長^［7］。本實驗表明，AUC與PAE相關性 很好， 根據實測各時段的AUC值來估算體內動態PAE及計算體內累加PAE方法可行，用AUC估算體 內PA E是以藥動學對細菌的敏感程度為基礎， 不恒定的藥物濃度是影響PAE的重要因素，同時還 應注意血漿蛋白結合率、分布容積、pH和氧分壓的影響^［8］。
　　由於體內PAE的影響因素較多，如何結合藥動學參數、機體病理生理狀態、免疫功能情況等 研究抗生素體內PAE及設計更為合理的給藥模式尚需進一步探討。

參考文獻：
［1］　Sahm DF,WashingtonⅡ JA.An tibacerial susceptibility test:Dilutron methods［J］.Manual of clinical Microbio logy.5th ed,1991,1105
［2］　張銘窮，郭文勇，黃純.初探抗菌藥物後效應的估算方法［J］.國外醫藥抗生素分 冊，1998，19(3)：228
［3］　Zhanel GG,Craig WA.Postantibiotic Effects［J］.Clin Pharm,1994,27(5):38 0
［4］　劉皈陽,王睿.氨基糖甙類藥物的抗生素後效應［J］.中國臨床藥理學與治療學雜誌，1996，1(2)：152
［5］　McDonald PJ,Weherall BL,Pruul h.Postantibiotic leucocyte enhancement: i ncreased susceptibility of bacteria pretereated with antibiotics to activity of leukocytes［J］.Rev Infect Dis,1981,3:38
［6］　王嶽鬆，王睿，劉皈陽等.氨基糖甙類抗生素的體外抗生素後效應研究［J］.中 國臨床藥理學治療學雜誌，1996，1(2)：85
［7］　Preston SL,Briceland LL.Single daily dosing of aminoglycosides［J］.pha rmacotherapy,1995,15(3):297
［8］　Craig WA,Ebert JG.Killing and regrowth of bacteria in vitro:a Review［J ］.Scand J Infect Dis Suppl,1990,74:63

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