大腸杆菌病會引起雞生長緩慢、飼料利用率降低,造成經濟損失。目前防治這些疾病仍在使用各種抗生素,但耐藥性問題越來越嚴重。氟苯尼考是較為敏感的藥物,它抗菌譜廣,與其它抗生素或抗菌藥物之間不易產生交叉耐藥性,而且多數呈協同作用。它使用安全(除妊娠動物外),應用十分廣泛。為了進一步增加氟苯尼考的療效,降低成本,我們用三甲氧苄啶(TMP)與氟苯尼考配伍應用對雞大腸杆菌病的療效進行研究測定。
在實驗室工作的基礎上,通過大量多次反複實驗發現,用TMP與氟苯尼考配伍,配伍比例大約為1:5,藥物濃度為50 μg/ml,即每毫升的藥液濃度含TMP 8 μg、氟苯尼考42 μg,對雞大腸杆菌病有確切的療效。為了進一步證實其治療效果,我們選擇臨床雞大腸杆菌病進行治療試驗,並用氟苯尼考和恩諾沙星作對照,試驗結果表明,TMP與氟苯尼考配伍之後,無論從死亡率、治愈率、增重率上均好於氟苯尼考和恩諾沙星對照組。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 藥品
氟苯尼考,含量為90%,批號040301;TMP,含量為98%,批號031101;恩諾沙星,含量為99%,批號031012。
1.1.2 試劑
蛋白腖、氯化鈉、酵母膏、瓊脂購自杭州天和試劑有限公司。
1.2 方法
1.2.1 發病情況
發病時間為2005年9月,錦州市某雞場所飼養的海蘭褐蛋雞15 000隻,50日齡,發病4 d,發病數為5 000多隻,死亡2 000多隻,曾用過卡那黴素、阿莫西林、恩諾沙星等藥物進行治療。
1.2.2 觀察臨床症狀和剖檢變化
病雞表現為離群呆立、羽毛鬆亂、食欲減退,部分雞排黃白色稀便。剖檢主要表現為心包積液,心包膜混濁、增厚、不透明,嚴重的有纖維素滲出;肝髒有不同程度的腫脹,表麵有不同程度的纖維素性滲出物,甚至整個肝髒為一層纖維素性薄膜所包裹;腹腔有不同程度的腹水,混有纖維素性滲出物。
1.2.3 實驗室檢查
采病料:無菌采取肝髒、腹水和心髒血液接種於普通瓊脂斜麵和麥康凱培養基中。
染色鏡檢:病料塗片,革蘭氏染色,然後鏡檢。
生化試驗:將分離的純培養物移植到三糖鐵瓊脂上及生化培養基中培養。
致病性試驗:將經過鑒定的杆菌,用其18 h的肉湯培養物0.4 ml口服感染5日齡雛雞,測定其致病力。
1.2.4 診斷
根據發病情況,結合主要表現、剖檢變化,初步診斷為雞大腸杆菌病,再經過實驗室檢查確診該病為雞大腸杆菌病。
1.2.5 治療
1.2.5.1 分組
初步確診後將病雞分為4組:感染對照組、TMP與氟苯尼考配伍應用組、氟苯尼考組、恩諾沙星組(見表1)。健康雞用氟苯尼考與TMP配伍應用預防。
對各組雞進行飲水給藥治療,各組雞每天早、晚各飲水一次,連續給藥5 d,每次用藥前觀察臨床症狀,並對死雞進行剖檢,觀察肝髒和腹腔病變情況,以確定死因,觀察期為第一次用藥後的第15 d。
1.2.5.2 療效評價標準
① 死亡率:試驗期間凡出現雞大腸杆菌病典型症狀死亡的,以及屍體剖檢肝髒和腹腔有典型病變特征死亡的均為雞大腸杆菌病死亡,根據死亡數計算死亡率。
② 治愈率:凡在試驗期間,雞用藥後精神狀態、食欲、糞便恢複正常,不再出現腹瀉等臨床症狀者,均屬治愈,根據治愈雞隻數占整個試驗組的比率計算治愈率。
③ 有效率:用藥後,試驗雞隻的精神、食欲、腹瀉有明顯好轉,體重較用藥前增加者,判斷為有效。據此計算有效率。
④ 增重:根據給藥前及試驗結束時的雞隻體重,計算每隻雞的增重,然後算出每組試驗雞的平均增重和標準差。
2 結果
2.1 臨床上大腸杆菌病的鑒定結果
2.1.1 革蘭氏染色
病料革蘭氏染色發現紅色陰性的短小杆菌。分離培養在37 ℃恒溫箱中,在瓊脂培養基上長出中等大小、半透明、露珠樣菌落,在麥康凱培養基上菌落呈紅色。
2.1.2 生化試驗
用此菌分解乳糖和葡萄糖,產酸、產氣;不分解蔗糖,不產生硫化氫,V-P試驗陰性,利用枸櫞酸鹽陰性,不液化明膠。
2.1.3 致病性試驗
經口服感染5日齡雛雞引起急性敗血症死亡。
通過實驗室檢查(包括病料采集、培養、染色鏡檢、生化試驗、致病性試驗及臨床診斷),我們確認雞隻感染了大腸杆菌病。
2.2 治療結果(見表2)
TMP與氟苯尼考配伍應用組的死亡率最低,其與氟苯尼考組和恩諾沙星組相比差異顯著,治愈率、有效率最高,15 d增重最多。
3 討論
目前臨床上雞的腸道性疾病大多數是由細菌感染引起的,如大腸杆菌病、沙門氏菌病、巴氏杆菌病等;還有一部分是由病毒感染引起的,如雞新城疫、禽流感、雞傳染性法氏囊炎等。所以在防治雞腸道性疾病時,應根據其臨床症狀、剖檢變化、染色鏡檢、生化試驗、致病性試驗等準確地作出診斷,確定病原後,再采取相應措施對其進行有效控製。針對細菌性的腸道性疾病一般常采用疫苗預防和藥物治療等措施進行控製。但在實際臨床上由於缺乏科學的用藥指導,用藥比較混亂導致細菌的耐藥性增強,特別是雞的大腸杆菌病在集約化的養雞場都不同程度的存在,並且常和其它疾病混合感染,對常見的抗生素普遍存在耐藥性,使得可供選擇的治療雞大腸杆菌病藥物越來越少,給養禽業造成的損失日益嚴重。本研究對雞大腸杆菌病臨床治療提供試驗依據,避免盲目用藥,在實驗的基礎上,對TMP與氟苯尼考配伍應用在臨床上的治療效果作了進一步研究。首先通過臨床症狀、病理變化以及病原分離培養等方法,證實了雞感染了大腸杆菌病。然後把該雞場發病雞分成3組,分別用TMP與氟苯尼考配伍應用、氟苯尼考、恩諾沙星進行對比治療。結果表明,TMP與氟苯尼考配伍應用對雞大腸杆菌病的療效顯著,無論從治愈率、有效率、增重率上均優於氟苯尼考組、恩諾沙星組。研究表明,TMP與氟苯尼考配伍可作為此發病雞的首選藥物。
4 小結
用TMP與氟苯尼考配伍,配伍比例分別為1:5,藥物濃度為50 μg/ml,即每毫升的藥液濃度含TMP 8 μg、氟苯尼考42 μg;TMP與氟苯尼考配伍應用混飲適合濃度為50 mg/l。能顯著提高氟苯尼考抑製雞大腸杆菌病的效果;對於自然感染雞大腸杆菌病的治療,氟苯尼考與TMP配伍應用的治療效果優於氟苯尼考組以及恩諾沙星組。
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