1.微生物學檢驗 采取病兔或死兔的空腸、回腸、盲腸內容物、腸黏膜或糞便等作被檢病料。
塗片鏡檢：將被檢材料直接塗片，作革蘭氏染色鏡檢，可見有革蘭氏陽性大杆菌，一般很少見到芽孢。
分離培養：將病料接種於熟肉培養基，置37℃溫箱培養，或接種於DS培養基，亦可置37℃溫箱培養。5~6小時後培養基變得很混濁，並產生大量氣體。在有氣體出現時(一般在4～6小時)進行傳代(2~3次)可獲純培養物。或者將檢驗材料直接接種於鮮血瓊脂平皿培養基，或葡萄糖鮮血瓊脂平皿培養基，或乳糖牛奶卵黃瓊脂平皿培養基，置於厭氧罐中於37℃溫箱培養24小時。魏氏梭菌在鮮血瓊脂或葡萄糖鮮血瓊脂平皿上，形成圓形、凸起的單個菌落，大小2~4毫米，呈半透明、表麵光滑、邊緣整齊；有些菌株，菌落中心凹陷，表麵呈放射性條紋狀，邊緣呈鋸齒狀。菌落周圍出現雙溶血圈。在乳糖—牛奶—卵黃瓊脂平皿上，菌落周圍和下麵出現乳濁帶。由於發酵乳糖，菌落周圍呈紅色暈環，但表麵不形成虹彩層。最後根據典型菌落特征，挑取菌落，接種於鮮血斜麵培養基，供以下各種特性檢驗之用。
鏡檢：塗片後進行革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陽性、粗大杆菌，很少見有芽孢。
生化反應：將純培養物接種於糖、醇類等生化反應培養基。魏氏梭菌能發酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖等，靛基質陰性，硫化氫陽性。
牛奶培養基：能迅速發酵牛奶中的乳糖，呈一種特有的強烈的凝固產氣反應。
2.動物接種試驗 小白鼠毒力試驗：將18~24小時液體純培養物接種18~22克體重的小白鼠，每隻鼠腹腔注射0.5毫升，觀察3日。如小白鼠死亡，即進行細菌分離培養及塗片鏡檢，予以證實。
家兔試驗：將18～24小時液體純培養物接種家兔，或固體純培養物用滅菌生理鹽水洗下接種家兔，每隻兔耳靜脈注射0.5毫升，10分鍾後撲殺家兔，置37℃溫箱5～8小時後體內充滿氣體，腹部膨脹。剖檢：各髒器內有許多氣泡，尤以肝髒為甚，俗稱“海綿肝”或“泡沫肝”，然後以肝髒作細菌培養及染色鏡檢。
3.毒素檢驗 小白鼠致死試驗如下：
腸內毒素試驗：將病兔或死兔的空腸、回腸、盲腸內容物用滅菌生理鹽水作成倍稀釋(如腸道內容物很稀可不必稀釋)，經8000轉/分、15分鍾，或3000轉/分、1小時離心沉澱，取上清液或經過濾器除菌的液體接種小白鼠，每隻鼠尾靜脈注射0.2～0.5毫升，達一個致死量以上時，30分鍾內即死亡；發病後30分鍾而不死亡者，將很快恢複正常。小白鼠體重小的，敏感度高，毒素量大，致死時間將縮短。
培養物毒素測定：將待檢菌株接種於DS培養基或熟肉培養基，置37℃下培養12～18小時，培養物再經8000轉/分、15分鍾，或3000轉/分、1小時離心沉澱，取上清液接種小白鼠。每隻鼠尾靜脈注射0.2毫升，或腹腔注射0.5毫升，一般在30分鍾內死亡，需觀察3日。
豚鼠皮膚試驗：離心待檢菌株培養物，取其上清液(方法同小白鼠)，並用生理鹽水作適當稀釋，注射豚鼠背部(皮內)0.05毫升，陽性者在注射後10~15分鍾內即出現紅腫反應。
腫脹反應可持續到次日，測量的紅腫直徑為0.8～1.5厘米。檢樣注射後30分鍾內，給豚鼠靜脈注射2.5％伊文斯藍l毫升，1小時後陽性反應部位出現藍色環狀。嚴格控製注射檢樣與注射伊文斯藍間隔時間，因間隔時間不同對藍色反應的大小有影響。
家兔皮膚壞死試驗：離心待檢菌株液體培養物，取其上清液，注射於家兔腹部皮內，每個注射點注射0.05~0.2毫升，觀察注射部位，陽性者先發生水腫後出現壞死現象，需觀察3日。
溶血試驗：離心待檢菌株的液體培養物，取其上清液0.5毫升，加入小試管內，再加0.5％綿羊紅細胞懸液0.5毫升，混勻，置37℃水浴箱內，經30分鍾、60分鍾和120分鍾和24小時觀察溶血情況，陽性者於60分鍾內發生溶血。
4.中和試驗 離心待檢菌株液體培養物，取其上清液，或離心腸內容物上清液0.5毫升(應含有2～5個最小致死量)，加入標準各型混合血清或分型血清0.5毫升，混合。另設待檢上清液加等量生理鹽水混合，置37℃溫箱內作用(中和)30～40分鍾，將上述各種混合物分別接種小白鼠，每隻鼠腹腔注射0.5毫升或尾靜脈注射0.2毫升，觀察小白鼠有無死亡。根據注射後對小白鼠的保護作用確定毒素型。
5.對流免疫電泳 瓊脂凝膠板以pH8.6、0.05~0.1摩/升的巴比妥緩衝液配製的1％瓊脂澆成。在6厘米× 9厘米的玻板上，加上述瓊脂10毫升，冷凝後打孔，孔徑3毫米，孔距4~5毫米。離心待檢菌株液體培養物，取其上清液，或離心腸內容物，取其上清液，作被檢抗原，分別加入瓊脂板一排孔內。另一排孔內加診斷血清。加樣後，置電泳槽上，以6～7伏/厘米的穩定電壓電泳45~60分鍾。在相應的抗原、抗體孔之間出現白色月牙形沉澱帶，為陽性反應。如沉澱帶不清晰時，可在密閉容器內於37℃置數小時，以增加清晰度。
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