顯色培養基在臨床快速檢測念珠菌的應用

我們利用念珠菌顯色培養基，可以選擇性分離念珠菌，並同時對白色念珠菌、熱帶念珠菌和克柔念珠菌做出鑒定。其結果快速、準確、方法簡便易行，現介紹如下。

　　一、材料和方法

　　1.菌株來源：1997年11月～1999年1月，我們從住院患者痰液標本分離出59株，陰道分泌物45株，咽拭子13株，大便標本9株，共計126株念珠菌。

　　2.念珠菌培養基：由河南鄭州博賽科技有限責任公司提供。

　　3.沙保瓊脂培養基：由浙江省軍區衛生防疫站生產提供。

　　4.試驗方法：(1)將23.85 g念珠菌顯色培養基幹粉，用150 ml無菌蒸餾水將幹粉緩慢倒入無菌蒸餾水瓶中，加熱溶解煮沸後，待冷卻約50℃時，傾入至滅菌直徑為4 mm的培養皿中，避光貯存冰箱裏。在該培養基上白色念珠菌為綠色、熱帶念珠菌為藍色、克柔念珠菌為粉紅色，白至粉色為其他念珠菌。(2)將臨床上痰液、咽拭子、陰道分泌物、大便標本平行劃線接種念珠菌顯色培養基和沙保培養基內，經35℃培養24～48小時，對3種念珠菌在顯色培養基呈現特有的不同菌落的顏色做出判斷，經玉米吐溫瓊脂培養基、芽管、尿素酶和酚氧化酶檢測及12種碳源同化試驗，將126株念珠菌鑒定到種。

　　二、結果

　　1.用念珠菌顯色培養基和沙保培養基，對3種念珠菌同時平行接種進行生長試驗比較。結果經χ²檢驗，沙保培養基對白色念珠菌和熱帶念珠菌差異有顯著意義P＜0.01和P＜0.05，而克柔念珠菌對這兩種培養基差異無顯著意義P＞0.5，結果見表1。

表1　兩種培養基對126株念珠菌在48h生長情況(株)比較

　　注：+表示生長；-表示不生長　　2.從念珠菌顯色培養基上，對臨床標本中直接分離鑒定出來的126株念珠菌進行了評估。在培養48～72小時有54株白色念珠菌落出現特有的綠色，而其他念珠菌均不顯綠色。42株熱帶念珠菌在瓊脂平板周圍上深棕等色的暈輪及深藍灰色菌落。28株克柔念珠菌呈現出粗糙、邊緣為白色，中心呈淡粉紅色之菌落。並經生化試驗確認，其符合率為90%～100%。同時還有1份標本呈現3種菌落顏色，另外3份標本出現2種念珠菌菌落顏色。

　　三、討論

　　念珠菌是臨床標本中最常見的酵母樣真菌，引起的感染逐年增多^［1］。因而對念珠菌做出快速鑒定十分重要。國際上對臨床菌種鑒定技術趨向於簡化程序和用最少的方法鑒定可能多的菌種，達到快速準確的目的^［2］。采用念珠菌顯色培養基，其最大的優點是簡便快速，可直接從臨床標本中分離和鑒定出白色念珠菌、熱帶念珠菌和克柔念珠菌。即可在48小時作出正確判斷，經生化試驗確認，其符合率為90%～100%。但對念珠菌屬其他種類的念珠菌菌落顏色顯色不一，穩定性不好，難以作出直接判定是哪些種類念珠菌，還需要按常規方法進一步確認。

　　念珠菌顯色培養基能縮短對白色念珠菌和熱帶念珠菌培養時間，同時對標本中雜菌抑製作用上明顯優於沙保瓊脂培養基^［3］。念珠菌顯色培養基還特別適合臨床大便和陰道分泌物雜菌較多標本檢測^［4］，尤其是在檢測混合念珠菌感染中，能彌補傳統培養基的不足。並能克服缺乏經驗的實驗室工作人員對標本接種劃線分離不好，加之培養時間長菌落融合在一起難以判別混合菌感染的缺點。如研究中有1份標本檢測出3種念珠菌，另外3份標本均檢測出2種念珠菌，證實念珠菌顯色培養基易於識別混合感染，並能快速、簡便準確地分離鑒定臨床常見念珠菌。

　　參考文獻

　　[1]　周貴民，謝靈.國內酵母菌感染和實驗室診斷的現狀及建議.中華醫學檢驗雜誌，1996,19:301-303.

　　[2]　李安生，呂桂霞，郭寧如，等.常見病原念珠菌鑒定的數碼分類方法.中華皮膚科雜誌，1994，27:339-341.

　　[3]　Odds FC. Bernaerts R CHRuadar Candida, a New differential isolation wedinm for presumptive identification of chinicauy important candida species. J Clin Uicrob Aug, 1994,1923-1929.

　　[4]　Houang ETS, Chu KC, Koehler AP, et al.Use of CHRUagar candida for genital specimens in the diagnostic laboratory.J Clin Patholgy, 1997,50:563-565

上一篇：誌賀菌的質粒譜及耐藥性分析

下一篇：細菌內毒素檢查法檢測注射用鹽酸大觀黴素中細菌內毒素的研究