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蘋果的組織培養



錄入時間:2010-11-30 14:16:19 來源:遼寧職業技術學院

 

一、蘋果的形態特征和生物學特性

(一)形態特征:蘋果(Malus pumila)屬落葉喬木,樹木高大,生長勢強,枝條多直立生長,果實圓形、長圓形,有色,綠色或紅色等。

(二)生物學特性:年平均溫度在714℃的地區均可栽培,春季8左右開始生長,平均氣溫1824℃較為適合,夏季溫度大於35,樹葉和果實就地出現灼燒,當年降雨量600800mm而且布較均勻時或大部分在生長季中,即可基本滿足蘋果生長的需要。蘋果是喜光植物,需全日照在22002800 h,才能滿足其對生長的需要。蘋果需要土層深厚透氣性好,保肥力較強,富含有機質,排水良好的沙壤土和礫質壤土。此外蘋果喜微酸性到中性土壤,pH4.0以下生長不良,pH7.8以上則易發生失綠等缺素症狀。

二、蘋果的花粉培養

(一)選取小孢子處於單核期的花蕾枝條。小孢子單核期的花芽外部形態特征是:花芽已充分開放,有45片葉完全展開,中心花蕾吐紅,周圍花蕾明顯增大,但花序尚未分離。

(二)把花蕾插入水中,放在13℃的冰箱上預處理。

(三)摘取花蕾,在70%的酒精浸約半分鍾,再在10%漂白粉上清液中浸1520min,無菌水衝洗35次。

(四)胚狀體的誘導。從花蕾中取出花藥,接種到MS04mgL24D02 mgL KIN4 mgL IAA38%蔗糖的固體培養基上培養,每瓶3050個花藥。在2530℃下培養70d後,由變褐的花藥裂口處開始產生胚狀體。

(五)無根苗的誘導。 把產生胚狀體的花藥接種到MS05 mgL IBA01 mgL GA31 mgL BA35%蔗糖的固體培養基上培養,在2530℃和光照10h下,約經40100d以上,胚狀體可形成次生胚狀體或叢生芽,進而發育成無根苗。

(六)根係的誘導。切取無根苗,轉接到12MS15 mgL IAA152%蔗糖的固體培養基上培養。約經1520d,小苗莖基部長出根,形成完整植株。也可用50100 mgL IBA溶液浸泡苗梢基部1530 min,再插入無生長素的培養基上,也能較順利地誘導生根。

(七)花粉植株的移栽。在春、秋季盆栽,保持1520℃和高空氣濕度,一般可使成活率達到40%以上。

(八)對有些不易生根和提早開花的植株,可用嫁接法進行繁殖。

三、莖尖培養

(一)從健壯母株上,選取帶芽或莖尖的莖段,先用7075%的酒精浸3060s,再用10%的次氯酸鈉溶液浸泡1015 min,或用01%升汞液浸57 min,最後用無菌水洗35次。

(二)剝取莖尖材料接種。為了培養無病毒苗,取的莖尖材料應小,一般為0102㎜。為了加速無病毒材料的繁殖,或切取較大的莖尖,約0305㎜大小,甚至帶芽的較大莖段,如13㎜。莖尖的大小同培養的難易有關,大的分化率高,分化速度快。所以除了特殊的目的外,寧肯用較大的莖尖。

(三)把莖尖接種在MSLS2mgLBA300500mgL CHLH3%蔗糖的培養基上,誘導芽的分化。在2530℃和光照下,先培養710d,見莖尖膨大轉綠,再培養在黑暗中,可加快分化和綠化苗的生長。一般在暗培養中增殖23代。隨後要轉入光照下,以使苗生長健壯。光強以15002000Lx為宜。

(四)把伸長的芽接種到MS051mgL? BA300 mgL CH或改良的MS44umolBA0549umolGA3的培養基上,這時苗會長大並產生叢生苗。每48周可分別繁殖一次,每個月約可增殖510倍。

(五)切取2㎝以上的帶頂芽的苗切段,插入12MS或其它低鹽培養基(如WhiteNitsh)中,附加1mgLIAA02mgLIBA3mgLGA3,可有效地促進生根。

對生根困難的蘋果砧木M9的試管苗生根,以先接種在含有2 mgL IBA162 mgL 根皮酚的LS培養基上,培養47d後,轉入無激素的LS培養基,生根快而頻率高。

(六)蘋果的試管苗也可以不進行生根,而直接嫁接到蘋果矮化砧木上,既可保持樹體有良好的矮化特性,又可通過采用無病毒繁殖材料妥善地解決無病毒繁殖問題。

 (七)生根苗移出進行砂培23周,最後在土壤中培養,其成活率可達267569%。

四、胚培養

(一)幼胚培養一般在授粉後3050d內取幼果,因這時種子內的胚已開始發育,較易培養成功。成熟胚培養取自處於成熟期果實的種子。胚培養的材料隻需進行表麵消毒,一般用70%酒精擦拭即可。

(二)切開果實,取出種子,剝出幼胚或成熟胚,接種在025mgL BA05mgL IAA12MS培養基上,可使胚得到良好發育。培養條件為2530℃和15002000Lx光照14h

(三)胚分化苗的增殖是:把苗切段移植到加有0510mgL BA300mgL CH12MS培養基上,在光下培養,可使綠苗得到增殖和生長。

(四)苗的生根或嫁接和移栽方法,同莖尖培養。

五、栽培管理

(一)育苗? 蘋果育苗主要通過嫁接,並需進行砧木的繁育,接穗的選育等過程,這裏就不再介紹,希讀者翻閱有關書藉。

(二)土壤管理

蘋果的土壤管理,首先要深翻改土,創造有利於蘋果根係生長有利因素,然後是經常性的蘋果土壤耕作製度。土壤管理要達到:在生長季有適當的水分供應;增加並保持土壤有足夠的有機物質;適時供應所需要的營養物質;疏鬆土壤,通氣透水,增強保肥能力。

深翻的方法很多,主要的有擴穴(放樹窩子),全園深翻,隔行或隔株深翻等。深翻的作用在於改良土壤結構和土壤的物理性狀。增加了土壤的孔隙度,提高了土壤的透水性,保肥和保水的能力。因此深翻對蘋果樹擴大了根係活動的範圍,改善了蘋果樹的生產能力。翻時,表土與底土分別放,填土時,表土放在底層,底土放在上層,翻時最好結合加施有機質,或混施肥料。翻時,注意不要傷粗根(直徑 1cm以上),還要避免暴露時間太久,防止日曬或凍傷,填土後注意濕度,土幹要灌水,雨季注意排水,以免水泡傷根。

深翻時期,根據蘋果根係生長物候期的變化,春季、夏季、秋季都是在蘋果根係生長高峰前進行。傷根容易愈合,而且生長快,關鍵在於保持土壤中有適當的濕度。

(三)施肥時期和方法

1.基肥 主要是遲效性肥料,能較長期的供應蘋果吸收。施肥時期,結果樹一般是在蘋果采收後,根係秋、冬季生長高峰來到之時,即8月下旬到9月,最好在秋稍停長後即進行。

2.追肥 應根據一年生長物候期的需要及時補給速效性肥料,以調節生長與結果的關係,也為下年打好開花、結果的基礎。追肥一般分為以下幾次:開花前追肥;花後追肥;秋稍停止生長後追肥。

3.施肥方法 土壤施肥 根係沒有布滿全園的幼齡果園,施基肥以環狀施肥法為主,結合放射狀溝施用追肥。

根外追肥 也叫葉麵噴肥,如一株20年生的蘋果樹,根部施肥用尿素25 kg,根外追肥一般隻要100200 g。根外追肥比根部追肥效果快,如用氯化鉀進行根外追肥30 S後在葉片內就有鉀的成份存在,一般2h後即可被吸收利用。根外追肥,還可以同防治病蟲害噴藥相結合,可以節省勞力,且簡單易行。

根外追肥,最好是在較為濕潤和無風的天氣進行。幹燥多風的情況下,水分蒸發快,濃度容易升高,往往引起藥害。一天之內,以早晨露水未幹或傍晚時進行較好。

4.灌溉和排水

蘋果的需水臨界期是在春末夏初新梢迅速生長、葉幕大量形成時。此時正是我國主要蘋果產區的幹旱季節。所以花前花後結合追肥灌水,是完全必須的。當土壤含水量少於土壤田間最大持水量的6080%時,就需要灌水。為了防止果園的冬旱,在蘋果落葉土壤封凍時,要灌封凍水,以提高果樹的抗寒越冬能力。凡自然降水量不能滿足需要的地區,要及時灌溉。目前蘋果園灌溉方法,多采用噴灌、滴灌或滲灌。

5.疏花疏果,調整負載量

達到結果期的蘋果樹,以及進入盛果期的蘋果樹,栽培技術措施的要點,首先是促進形成花芽。有了花芽,還要千方百計的保花保果,既要開花良好,又要座果率高。但隨著花量的增多,座果過多,負擔過量時,必須進行疏花、疏果來調整負載量。

疏花疏果的基本理論依據是葉果比。花和果實主要是依靠根的吸收和葉片合成的營養物質進行生長,其間,有一個相互依存的供求關係。國際上公認的蘋果葉果比約為30401。疏花疏果可采用手工疏花疏果和化學疏花疏果等方法。

6.整形技術

遼寧省最早總結群眾生產經驗。提出“基部三主枝鄰近半圓形”,後來山東省提出“主幹疏層形”,河北省提出“疏散分層形”。此外,有的地區提出“主幹疏層延遲開心形”等等。這些樹形,雖然名稱不同,但樹形結構的內容實質是一樣的,現在統稱疏散分層形,其主要的結構為:

1)主幹,一般高5070 cm

2)全樹有主枝567個。第一層3主枝鄰接或鄰近,相距在2040 cm之內,在12年之內選定。主枝的開張角在6070度。第二層12個主枝,第三層2個主枝(三杈枝落頭)。

3)層間距,第一層主枝(基部三主枝)距第二層主枝層間距80100120cm23層的間距可506070 cm

4)側枝,基部三主枝各有側枝24個,上層主枝各有側枝13個。

5)樹高,中心幹全長225m。樹高在 45 m,冠徑567 m。從1年生苗定植算起,平均每年留成一個主枝。到落頭完畢,約1315年定形。

6)修剪技術

修剪是調整蘋果生長與結果基本矛盾的一項技術措施,由於蘋果生長發育的物候期不同,修剪反應的效果也不一樣,可分為休眠期修剪(冬剪)和生長期修剪(夏剪)。蘋果是每年發枝一次的樹種,冬剪作得好,對調整生長與結果的關係,基本上可以解決問題。夏剪的作用,主要是彌補冬剪的不足。所以,這裏主要介紹前者。

冬季修剪在調節生長與結果矛盾中所要達到的主要作用:一是促使一部分枝條加強生長,恢複樹勢,延緩老衰;二是促使一部分枝條能形成花芽,三是有花芽的結果枝促使其結好果,提高質量。即在樹冠中,合理的形成三類枝條,即生長枝、成花枝、結果枝。也就是為了克服大小年,使樹冠內形成比例適當的三類枝。

影響枝芽生長強度的因子很多,但主要的有三:一是方位,直立的枝向上的芽相對的生長較強;二是先端優勢;三是芽的異質性。充實飽滿的芽有利於生長。影響生成花芽的關鍵在於新梢能否及時停止延長生長,有否足夠的營養物質積累以及內源激素的相互作用。修剪每一個枝時,要以此為出發點,考慮各枝和枝與枝之間的相互影響。具體剪法和反應的主要趨勢如下:

①蘋果枝梢自然生長規律,是一年比一年短。為了加強生長,對一年生枝在充實滿芽部位中截,則有利於中截枝所發新梢的生長。

②直立封頂枝(大葉芽枝)能冒條旺長,枝、幹所發生的徒長枝,都是自然更新現象,都有利於生長。

③回縮修剪多年生枝,縮剪到有向上的壯枝、壯芽處,起到更新複壯作用,有利於生長。

④樹冠過於鬱閉,適當疏剪外圍枝,有利於通風透光,對整體生長與成花都有利。

⑤長放是有利於成花的剪法。新梢任其自然生長,必然按其本身生長發育規律,一年比一年短,因而停止生長早,有利於營養物質的積累,促進花芽分化,形成結果枝。

⑥打盲節,在春秋梢交界的癟芽處短截,它的作用同長放相似。

⑦留橛,剪營養枝留短橛。短橛上留下的都是癟芽,發出的新梢短,停止生長早,有利於形成花芽。

⑧封頂枝破頂芽(大葉芽破頂)。封頂枝破頂芽使下麵一些芽充實飽滿程度相似,控製單軸延長生長,可以生成幾個短技,有利於形成花芽。

⑨改變直立枝的方位。拿枝,即修剪時把一年生強旺直立枝,距基部10 cm處彎平。拿彎時,使有清脆折裂聲,輕傷木質部,改變方位,有利於營養集中於形成花芽。此外,彎、拐、別、壓等也起到同樣作用。

⑩有花芽的多年生枝,要適當回縮,保留壯枝壯花芽。大年樹的一些中長果枝,可破頂芽,減少花量,當年再形成花芽。

 

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