中國藥典1995年版收載了細菌內毒素檢查法,廣大藥學工作者積極探索該方法用於藥典未收載品種實行的可行性。現將有關資料綜述如下,為推廣和完善細菌內毒素檢查法提供參考。
1 藥品種類
試驗品種以大輸液及抗生素占大多數,生化藥品、中草藥製劑等很少,可能與這些藥品成分複雜,幹擾因素多有關。
2 試驗方法
以凝膠法占絕大多數,主要原因是凝膠法為藥典收載,方法成熟,操作簡便,而其它方法由於多種限製,尚未普及應用。
2.1 供試品陽性對照 黃清泉〔1〕認為應增加供試品陽性對照,即在0.1 ml鱟試劑中加入用供試品溶液製成的2λ標準內毒素溶液。最終結果陰性對照呈陰性,陽性對照和供試品陽性對照均呈陽性,試驗結果方有效。設陽性對照是證明在試驗條件下所用鱟試劑的靈敏度符合規定;設陰性對照證明所用檢查用水中檢不出內毒素;設供試品陽性對照則是證明試驗條件下供試品溶液不存在抑製因素。
2.2 試驗重現性差 同一品種不同實驗者所得結果不一致。如
2.3 檢品供試液pH值 高國政〔8〕用動態濁度法研究pH值對細菌內毒素測定的影響,比較TAL(東方鱟試劑)和LAL(美洲鱟試劑)的不同。結果顯示兩種鱟試劑回收曲線都呈現三個反應高峰,分別為pH5.20,pH7.83/pH6.23和pH10.55。樣品pH值6~8,實驗結果穩定;pH值≤3或≥12,試驗受到抑製。使用TAL,檢品pH預調在6.5~7.5,使用LAL,檢品pH應預調在6.2±0.1或6.7~7.8。
2.4 直接稀釋法〔9〕 根據稀釋倍數計算出每支樣管需要加入藥品原液及溶解用水的體積(兩者之和為0.2 ml),準確吸取混合,不必另外稀釋檢品,可以減少中間汙染環節,操作亦簡便易行。
2.5 藥品生產過程質控標準 侯慶源〔10〕抽取出現散在熱原反應的生理鹽水,用細菌內毒素檢查法定量考察,發現內毒素濃度大於0.5 EU/ml(不合格)者占62.5%,而且樣本之間有明顯差異,提示可能與輸液瓶清除熱原效果差異及散在汙染因素有關。
作者:徐紅琳,嶽喜同
作者單位:山東省濟寧市第一人民醫院
參考文獻
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10 侯慶源,趙雁鴻.對生理鹽水的內毒素定量分析考察.中國醫院藥學雜誌,1997,17(9):410
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