中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->細菌基本知識和檢測方法->細菌對於蛋白質和氨基酸的代謝試驗

細菌對於蛋白質和氨基酸的代謝試驗



錄入時間:2010-12-8 9:06:34 來源:中華檢驗醫學網

細菌對於蛋白質和氨基酸的代謝原理為:不同種類的細菌分解蛋白質的能力不同。細菌對蛋白質的分解,一般先由胞外酶將複雜的蛋白質分解為短肽(或氨基酸),滲入菌體內,然後再由胞內酶將肽類分解為氨基酸。具體試驗方法有:①明膠液化試驗;②吲哚試驗(靛基質試驗);③硫化氫試驗;④尿素酶試驗;⑤苯丙氨酸脫氨酶試驗;⑥氨基酸脫羧酶試驗。 

  1.明膠液化試驗 

  (1)原理:某些細菌可產生一種胞外酶-明膠酶,能使明膠分解為氨基酸,從而失去凝固力,半固體的明膠培養基成為流動的液體。 

  (2)方法:將被檢菌穿刺接種於明膠培養基,於22℃培養7d,逐日觀察結果。若用35℃孵育,因明膠在此溫度下自行液化,故在觀察結果前,先置4℃冰箱內30min,再看結果。 

  (3)結果:培養基呈液化狀態為陽性。 

  (4)應用:腸杆菌科細菌的鑒別,如沙雷菌、普通變形杆菌、奇異變形杆菌、陰溝杆菌等可液化明膠,而其他細菌很少液化明膠。有些厭氧菌如產氣莢膜梭菌、脆弱類杆菌等也能液化明膠。另外多數假單胞菌也能液化明膠醫學教|育網搜集整理。 

  2.吲哚(靛基質)試驗 

  (1)原理:某些細菌具有色氨酸酶,能分解蛋白腖水中的色氨酸生成吲哚(靛基質),當加入吲哚試劑(對位二甲氨基苯甲醛)後則形成紅色的玫瑰吲哚。 

  (2)培養基:蛋白腖水培養基。 

  (3)方法:將待檢菌接種於上述培養基中,於35℃培養24~48h,沿試管壁慢慢加入吲哚試劑。 

  (4)結果:於兩者液麵接觸處出現紅色為陽性,無色為陰性。 

  (5)應用:主要用於腸杆菌科細菌的鑒定。 

  3.硫化氫試驗 

  (1)原理:某些細菌能分解培養基中的含硫氨基酸(如胱氨酸、半胱氨酸)產生硫化氫,硫化氫遇鉛或亞鐵離子則形成黑褐色的硫化鉛或硫化鐵沉澱。此試驗可間接檢測細菌是否產生硫化氫。 

  (2)培養基:醋酸鉛培養基。 

  (3)方法:將待檢菌穿刺接種於醋酸鉛培養基,於35℃培養24~48h觀察結果。 

  (4)結果:培養基變黑為陽性,不變為陰性。 

  (5)應用:主要用於腸杆菌科中屬及種的鑒別。如沙門菌屬、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸杆菌屬、變形杆菌屬細菌,絕大多數硫化氫陽性,其他菌屬陰性。沙門菌屬中也有硫化氫陰性菌種。 

  4.尿素分解試驗 

  (1)原理:某些細菌具有尿素分解酶,能分解尿素產生大量的氨,使培養基呈堿性。 

  (2)培養基:尿素培養基。 

  (3)方法:將待檢菌接種於尿素培養基,於35℃培養18~24h觀察結果。 

  (4)結果:培養基呈堿性,使酚紅指示劑變紅為陽性,不變為陰性。 

  (5)應用:主要用於腸杆菌科中變形杆菌屬細菌的鑒定。奇異變形杆菌和普通變形杆菌脲酶陽性。另外雷氏普羅威登菌和摩根菌為陽性,而斯氏和產堿普羅威登菌陰性。 

  5.苯丙氨酸脫氨酶試驗 

  (1)原理:某些細菌可產生苯丙氨酸脫氨酶,使苯丙氨酸脫去氨基,形成苯丙酮酸,加入氯化鐵試劑後產生綠色反應。 

  (2)培養基:苯丙氨酸瓊脂培養基。 

  (3)方法:將被檢菌濃厚接種於苯丙氨酸瓊脂培養基斜麵上,於35℃培養18~24h,滴加10%三氯化鐵試劑3~4滴,自斜麵上方流下。 

  (4)結果:出現綠色為陽性。應立即觀察結果,延長反應時問會引起褪色。 

  (5)應用:主要用於腸杆菌科細菌的鑒定。變形杆菌屬、普羅威登斯菌屬和摩根菌屬細菌均為陽性,腸杆菌種中其他細菌均為陰性。 

  6.氨基酸脫羧酶試驗 

  (1)原理:具有氨基酸脫羧酶的細菌,能分解氨基酸使其脫羧生成胺(賴氨酸→屍胺,鳥氨酸→腐胺,精氨酸→精胺)和二氧化碳,使培養基變堿。使指示劑顯示出來。 

  (2)培養基:氨基酸脫羧酶培養基和氨基酸對照培養基。 

  (3)方法:將被檢菌分別接種於賴氨酸(或鳥氨酸或精氨酸)培養基和氨基酸對照培養基中,並加入無菌液體石蠟或礦物油,於35℃培養l~4d,每日觀察結果醫學教|育網搜集整理。 

  (4)結果:對照管應呈黃色,測定管呈紫色(指示劑為溴甲酚紫)為陽性,若測定管呈黃色為陰性。若對照管呈現紫色則試驗無意義,不能作出判斷。 

  (5)應用:主要用於腸杆菌科細菌的鑒定。如沙門菌屬中除傷寒和雞沙門菌外,其餘沙門菌的賴氨酸和鳥氨酸脫羧酶均為陽性。誌賀菌屬除宋內和鮑氏誌賀菌外,其他誌賀菌均為陰性。

 

上一篇:細菌對於碳水化合物的代謝試驗

下一篇:厭氧菌的分離培養

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294