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血液中腦膜炎奈瑟菌的分離鑒定藥敏試驗及臨床分析



錄入時間:2010-12-10 11:33:38 來源:中國論文下載中心

   

 流腦至今仍是世界各國非常關注的一種常見的急性呼吸道傳染病,其病原菌就是腦膜炎奈瑟菌。此菌經呼吸道進入機體,突破血腦屏障入侵顱腦,引起急性腦脊髓炎,甚至引發暴發性流行[1]。據WHO最近報告,進入20世紀90年代後期,在非洲的一些國家內又出現了流腦新的周期流行,1996年至1998年共報告了265 454例,病死率為10~20%。此外,在冰島、蘇格蘭和英格蘭等地也報道[2]過此病發病增多,並出現局部地區流行。除腦脊液外,此菌在血液中也時有發現,且不時出現於成人身上,傅萍[4]就曾於2003年報道過一中年患者的血液中培養出一例A型腦膜炎奈瑟菌。筆者也於20053月通過血培養發現1例,現報告如下。

  臨床資料

  患者,女,18歲,是一個係統性紅斑狼瘡的病人,於200536入院。患者高熱,肢體抽搐,無寒戰,神誌不清伴嘔吐,初疑為神經係統感染,但頭部CT未見異常,腦脊液壓力正常,其常規及生化檢查:WBC 30×106LRBC 540×109L,蛋白質定性為陰性,GLU 0.09 mmol/LCl 125 mmol/L,塗片未見細菌,培養亦未見細菌生長。但血液分析發現:WBC 142×109/L,分類N 73%,L 23%,M 4%。39抽取血液,經全自動血液分析儀培養及一係列生化試驗,鑒定為腦膜炎奈瑟菌。將鑒定及藥敏結果及時上報相關臨床科室,經青黴素類及頭孢類的聯合用藥,2 d後症狀基本消失,4 d後病情基本穩定。翌日,因病人家屬以無法支付醫療費用為由要求出院,之後無法跟蹤。

  培養鑒定

  於患者高熱期間,按常規無菌抽取血液5 ml~10 ml分別注入SA(需氧)SN(厭氧)培養瓶,貼上標簽立即送檢,標本送至微生物室後,立即置入BactAlert―240血培養儀中進行全天24 h監測,約於8 h~10 h後提示陽性。立即將標本取出,接種於血平板和選擇性子板(膽鹽平板),分別置35 -CO235 -O2培養箱,且於35 ―CO2培養箱中加種奈瑟菌分離培養專用的巧克力平板,經18 h~24 h,發現35-CO2培養箱中的巧克力平板及血平板有細小光滑、灰白或灰褐色、半透明、圓形凸起的類似奈瑟菌的菌落生長,其餘平板無菌生長,經塗片染色鏡檢,為革蘭陰性雙球狀、腎形成雙排列、坦麵相對的球菌,疑為腦膜炎奈瑟菌,且立即向臨床進行初步報告。

  生化特征

  使用手工與ATB Expression―Api-NH鑒定試紙同步進行檢測鑒定,測得其生化結果見表1

  表腦膜炎奈瑟菌的生化特征()

  ATB Expression―Api-NH測得其生物係統編碼為5002,鑒定幾率99.9%,鑒於上述特征,可確定為腦膜炎奈瑟菌。取24 h純培養的菌落,經奈瑟菌血清凝集試驗,確定為A群。

藥敏試驗

  主要采用M-H紙片擴散法(K―B),使用英國OXOID公司的產品,且用ATCC―49226(淋病奈瑟菌)ATCC―49619(肺炎鏈球菌),嚴格按照NCCLS規定的標準進行質量控製。測得的結果見表2

  表腦膜炎奈瑟菌的藥敏試驗結果()

  注:S:敏感,R:耐藥

  由藥敏試驗結果可知,此菌對青黴素類、頭孢菌素類、喹諾酮類,單環β內酰胺類以至碳青黴烯類等抗生素均敏感,在治療上並不困難。

  討論

  在我國流行的腦脊髓膜炎以A群為多見。我國過去也是流腦高發病的國家之一,雖然目前發病率己受控製,但局部流行仍可發生,而今,我國國內人口流動日趨廣泛,國際交往日益瀕繁,這無疑增加了此病傳播流行的機會,及近年來湖北、廣東等省己出現了成年病人患病比例上升的現象,應引起高度重視。

  腦膜炎奈瑟菌可寄生於正常人的鼻咽部,其攜帶率可達5%~15%,大多數情況下僅表現為鼻咽炎,隻有當機體抵抗力下降時才可引發感染,而感染者大多為15歲以下的兒童[3]。但腦膜炎奈瑟菌也是流行性腦脊髓膜炎的病原菌,而人類正是其唯一宿主,感染後若不及時救冶,病死率極高。

本菌對體外環境的要求較高,抵抗力弱,且有自溶現象。故在標本采集後應立即送往臨床微生物實驗室,或用專用培養基進行病床旁接種後立即孵育培養,否則,易出現假陰性結果,對臨床的診治帶來誤導。腦膜炎奈瑟菌在發病初期大多在於血液內,但血培養陽性檢出率僅為50~60%,若時機把握不好,檢出率會大大降低,甚至為陰性,故此,血樣的采集必須在患者高熱期間及使用抗生素之前。此次本菌在一免疫係統性疾病患者血中的檢出,無疑對臨床的診斷、治療以及實驗室的培養鑒定與藥敏試驗均有著較重要指導性意義。

作者:馬均寶 何豔嫦

  參考文獻:

  [1  劉長雲,童詳華.聚合酶鏈反應檢測腦膜炎奈瑟菌DNA片段[J.中華醫學檢驗雜誌,199619(2)109.

  [2  孫銀燕,胡敬緒.腦膜炎奈瑟菌AcpsBompc偶聯物的免疫原性、安全性和穩定性[J.中華微生物學和免疫學雜誌,200222(2)170174.

  [3  密新昌.一起腦脊髓膜炎暴發流行的檢驗結果分析[J.中華實用中西醫雜誌,20044(17)229230.

  [4  傅萍.從血液培養中分離出一株A群施膜炎奈瑟菌[J.實用醫技雜誌,20029(8)586.

 

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