【摘要】 目的 近年來，結核病耐藥問題日益嚴重，而我國已成為耐藥結核病疫情最嚴重的國家之一，所以，為了更好地做好結核病的防治工作,研究結核分枝杆菌對異煙肼和利福平的耐藥性,為臨床提供理論依據。方法 試驗是采用含有一定濃度藥物的羅氏培養基檢測2009年在本門診應用 BACTEC MGIT 960全自動分枝杆菌檢測儀培養陽性的381株結核分枝杆菌對異煙肼(INH)和利福平(RFP)的耐藥性。結果 381株結核分枝杆菌耐異煙肼(INH)和利福平(RFP)的有48株，約占12.6%。結論 耐藥性結核發病率高，使結核病發生難治性，從而影響了結核病的控製和消除，而且也增加了治療的成本。
【關鍵詞】 結核分枝杆菌;異煙肼;利福平;藥敏試驗
結核分枝杆菌簡稱結核杆菌，是人和動物結核病的病原菌，包括人結核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌等，前三種細菌對人類致病，其中人型結核分枝杆菌感染的發病率最高。結核病是由結核分枝杆菌感染引起的人畜共患的嚴重傳染病，也是人類單一致病菌感染導致死亡率最高的細菌感染性疾病[1,2]。醫學研究證明，結核杆菌侵入人體後是否發病，不僅取決於細菌的數量和毒性，更主要取決於人體對結核杆菌的抵抗力。在機體免疫力低的情況下，入侵的結核菌不能被機體防禦係統消滅而不斷繁殖，引起結核病。
為了解來本門診治療的結核病人對常用抗結核藥物異煙肼(INH)和利福平(RFP)的敏感情況，給治療結核病提供合理的用藥方案找出科學依據，對本門診肺結核病例痰菌培養陽性的其中381株結核菌做藥物敏感性試驗，其試驗結果分析如下。
1 資料與方法
1.1 病例來源 2009年1月-12月間，在本門診應用美國BD公司BACTEC MGIT 960全自動分枝杆菌檢測技術培養陽性的其中381株結核菌株。
1.2 方法[6] 藥物敏感性試驗采用的方法是現仍普遍推薦使用的間接法中的絕對濃度法。即從廠家取得藥物的純品，並確認純度和效價(在有效期內使用)，按《結核病診斷實驗室檢驗規程》製定的標準，配成一定濃度，加入到由本院檢驗科自製的改良羅氏培養基中，並設無藥對照。
1.3 結果報告 分枝杆菌培養陰性：斜麵無菌落生長;分枝杆菌培養陽性(+)：菌落生長占斜麵麵積的1/4;分枝杆菌培養陽性(++)：菌落生長占斜麵麵積的1/2;分枝杆菌培養陽性(+++)：菌落生長占斜麵麵積的3/4; 分枝杆菌培養陽性(++++)：菌落生長布滿整個斜麵。培養基斜麵上菌落數少於20個時，報告實際生長的菌落數。在對照培養基生長旺盛的前提下，低濃度含藥培養基菌落生長(+)以上可提示耐藥。
2 結果
381株結核分枝杆菌耐異煙肼(INH)和利福平(RFP)的有48株，約占12.6%。
3 討論[7～13]
結核病對人類社會的危害是長期的，它不但是我國重點控製的重大疾病之一，也是全球關注的公共衛生問題和社會問題。“中國政府將強化結核病的防治工作，並落實耐多藥結核病防治措施，保障患者、醫療衛生人員和民眾的基本權益”，國務院副總理李克強在今年4月1日召開的耐多藥/廣泛耐藥結核病(M/XDR-TB)高負擔國家部長級會議上表示。可見黨中央、國務院是多麽高度重視結核病防治工作。
耐藥性試驗不僅是臨床選擇和評價化療方案的依據，更是流行病學的重要指標。早在1961年WHO在藥物敏感性會議上就指出, 藥物敏感性測定的目的是：(1)指導開始治療藥物的選擇;(2)治療不能得到滿意時, 證實耐藥性的出現, 並指導進一步治療藥物的選擇;(3)觀察測定社會中耐藥結核分枝杆菌的流行。做藥敏試驗表麵上增加了病人開支，其實並非如此，因為通過藥敏試驗可使用療效好又經濟的藥物，不至於被沉重經濟負擔所壓倒，從而堅定治療信心，及時終止無效藥物的毒副作用，從而減輕病人經濟負擔。如果病人已對某種藥物產生了耐藥性，而未做藥敏試驗，還在繼續應用，無形中既增加了經濟開支又增加了藥物對身體的損害，也延誤了疾病治療，且另一方麵也加大了耐藥性結核杆菌傳播的機會，使人群暴露於耐藥結核杆菌的危險性增加。所以，仍然要繼續進行藥敏情況分析，對臨床病例製定科學合理的用藥方案，提高治療成功率，爭取早日控製和消除結核病，具有重要的現實和長遠意義。同時，規律的全程督導治療也是減少耐藥產生的重要環節。結果顯示，381株結核分枝杆菌耐異煙肼(INH)和利福平(RFP)的有48株，約占12.6%。如此高的耐藥率，嚴重地削弱化學治療效果，更說明了結核病耐藥情況嚴重，應引起警惕。
異煙肼是酰肼類化學合成藥物，對結核分枝杆菌有高度選擇性，通過抑製結核杆菌分枝菌酸的合成，造成細胞壁破損而殺菌。抗菌作用強，試管內對結核分枝杆菌和牛分枝杆菌的敏感範圍為0.02～0.2μg/ml，高於現有各種抗結核藥物，且其在組織內滲透能力強，能快速轉運至菌體內，在幹酪病變內充分擴散。自1952年異煙肼首次用於結核病的臨床治療以來，一直作為抗結核治療的首選藥物，至今已有50多年的曆史;利福平為一種廣譜抗菌藥物，利福平與依賴DNA的RNA多聚酶的b 亞單位牢固結合，抑製細菌RNA-的合成，防止該酶與DNA連接， 從而阻斷RNA轉錄過程，使DNA和蛋白的合成停止。對結核杆菌和其他分枝杆菌(包括麻風杆菌等)，在宿主細胞內、外均有明顯的殺菌作用，對腦膜炎球菌、流感嗜血杆菌、金黃色葡萄球菌、表皮鏈球菌、肺炎軍團菌等也有一定的抗菌作用。對某些病毒、衣原體也有效。利福平自1971年發明以來，一直是結核化療方案中的一個關鍵藥物，特別在短程化療中起著重要作用。而對異煙肼和利福平的耐藥意味著一方麵由於患者對它們耐藥，臨床上須加大藥劑量或改用其他抗結核藥物，使患者的療程延長，增加患者的危險和經濟負擔(耐多藥結核病的治療需要使用毒性更大的藥物，療程需要兩年，治療成本要比非耐多藥結核病高100倍);另一方麵也加大了耐藥性結核杆菌傳播的機會，使人群暴露於耐藥結核杆菌的危險性增加。
研究表明，結核杆菌對異煙肼產生耐藥性是由於編碼過氧化氫-過氧化物酶(該酶能激活INH藥物前體)的KatG基因突變和編碼參與分枝菌酸合成的enoy1-ACP還原酶(該酶為INA活化形式作用的靶位)的inhA基因突變所致;而利福平產生耐藥性是由於其作用靶分子RNA多聚酶亞單位的編碼基因(rpoB)突變所致。由於結核分枝杆菌產生自然耐藥變異的頻率很低，造成耐藥的主要原因是治療過程中不合理的聯合用藥、間斷用藥、不執行歸口管理與治療等。因此，結核病防治工作任務還很艱巨，在今後的結核病防治工作中，重點為社會性綜合防治措施，抓好結核患者的發現、登記、管理和合理治療。堅持在直接麵視短程化療下，早期、適量、規律、全程、聯合應用敏感藥物或抗結核藥物複合劑，輔以免疫劑治療，使得在強化期內迅速、大量殺滅結核菌，使痰菌轉陰。對於耐藥病例防治，須堅持聯合用藥的原則，根據既往用藥史和藥物敏感性試驗製定個體化治療方案。結核病防治部門也應加強對耐藥菌株的檢測，掌握結核病耐藥趨勢，以指導臨床合理、有效用藥，達到控製結核病的目的。
作者：羅少珍
【參考文獻】
1 張卓然.微生物學與微生物學檢驗,第3版. 北京: 人民衛生出版社，2003，200.
2 黃敏.微生物學與微生物學檢驗. 北京: 人民軍醫出版社，2006.
3 張舒華.肺結核流行趨勢及控製策略綜述.安徽預防醫學雜誌，2005，11(1):30-32.
4 嚴碧涯,端木宏謹.結核病學. 北京: 北京出版社，2003，1158-1159.
5 陳建，李寧秀，萬康林，等.四川和安徽兩省結核耐藥危險因素分析.四川大學學報(醫學版)，2007，38(1)：135-137.
6 中國防癆協會基礎專業委員會.結核病診斷實驗室檢驗規程.中國：中國教育文化出版社，2006，130.
7 王慶,孫道霞,唐荷英,等.安徽省結核杆菌藥物敏感性試驗結果分析.中國防癆雜誌,2003,25(增刊)：47-48.
8 林輝,劉潔,陳林,等.重慶市2003-2006年肺結核病耐藥情況分析.第三軍醫大學學報,2006,30(12):1183-1185.
9 曹立雪,林豔麗,吳雪瓊.結核分枝杆菌利福平耐藥性的研究進展.生物技術通訊，2004, 15(1):79-82.
10 鄒盛華,代臘梅,張麗水.1008例初治菌陽肺結核患者的初始耐藥情況分析.海峽預防醫學雜誌，2004, 10(4):77-78.
11 樂軍,劉麗蓉,謝建平,等.中華微生物學和免疫學雜誌，2004，24: 2582-2621.
12 屠德華.耐藥結核病及其防治對策.中國防癆雜誌，1997, 19:140-141.
13 程紹基,嚴碧涯,馬嶼,等.中華結核和呼吸雜誌，1996，19：333-337.
上一篇：鮑曼不動杆菌分布及耐藥性分析
