【摘要】 目的 了解臨床酵母樣真菌的感染類型、分布及其對常用抗真菌藥物的敏感性，為臨床診斷治療提供正確的用藥依據。方法 采用常規方法分離培養真菌，用法國生物梅裏埃公司生產的ATB Expression微生物自動鑒定/藥敏分析儀進行真菌鑒定和藥敏分析。結果 396株酵母樣真菌中，白色假絲酵母菌檢出率最高(72．3%)，其次為熱帶假絲酵母菌(15．91%)，光滑假絲酵母菌(6．82%)。酵母樣真菌對5氟胞嘧啶、兩性菌素B、氟康唑、依曲康唑的敏感性分別為98．02%，98．43%，77．38%，77．76%。結論 臨床酵母樣真菌感染以白色假絲酵母菌為主，對5氟胞嘧啶、兩性菌素B敏感性較高，對氟康唑、依曲康唑有不同程度的耐藥，因此，藥敏監測是非常必要的，臨床醫生應根據藥敏結果合理使用抗真菌藥物。
【關鍵詞】 酵母樣真菌：感染；抗真菌藥物；敏感性
近年來，隨著廣譜抗生素、激素、免疫抑製劑的廣泛應用，導管插管、器官移植和其他介入性治療的普遍開展，以及艾滋病患者的不斷增加，由真菌引起的條件致病菌感染日益增多[1]。患者多數為自身感染，尤以酵母樣真菌引起的深部真菌感染最為常見，並且常常成為終期感染。同時抗真菌藥物的使用又使真菌出現了耐藥現象，給臨床治療帶來了困難。由於抗真菌藥物品種有限，研究真菌的耐藥性並控製其耐藥性發生，顯得尤為重要。為了解酵母樣真菌感染的菌群分布及藥敏狀況，現對我院2005年1月—2006年12月臨床標本中分離出的396株酵母樣真菌進行鑒定和藥敏分析，從而指導臨床合理使用抗真菌藥物，有效預防真菌感染和耐藥性發生。
1 材料與方法
1．1 標本來源
396株酵母樣真菌均分離自我院臨床送檢的痰液、尿液、糞便、咽拭子、分泌物等。
1．2 培養鑒定
標本接種於沙保羅培養基30 ℃ 24 h 培養，塗片染色確認為酵母菌後，嚴格按操作說明書接種法國生物梅裏埃公司生產的ATB ID32C鑒定條，並用ATB Expression鑒定儀進行鑒定。
1．3 藥敏試驗
將分純的菌種嚴格按操作說明書接種法國生物梅裏埃公司生產的ATB Fungus 2真菌藥敏板條。該板條包括4種抗真菌藥物：5氟胞嘧啶(5FC)、兩性黴素B(AMB)、氟康唑(FCZ)和依曲康唑(ICZ)。該法為微量稀釋法，用ATB Expression鑒定儀讀取最小抑菌濃度(MIC)。
2 結果
2．1 檢出率
396株酵母樣真菌中，以痰液標本真菌檢出率最高(288株)占72．73%，尿液(30株)7．58%，糞便(24株)6．05%，分泌物(21株)5．30%，咽拭子(18株)4．55%，其他標本(15株)3．79%。
2．2 分類
396株酵母樣真菌分為8種，其中假絲酵母菌387株分為7種：白色假絲酵母菌270株，占68．18%；熱帶假絲酵母菌60株，占15．15%；光滑假絲酵母菌27株，占6．82%；近平滑假絲酵母菌12株，占3．03%；克柔假絲酵母菌9株，占2．27%；土生假絲酵母菌6株，占1．51%；無名假絲酵母菌3株，占0．76%。另一種是曲黴菌(均來自痰液)9株，占2．27%。
2．3 各病區真菌檢出率
各類標本中，檢出率最高的為呼吸消化內科(153株)38．64%，其次為腫瘤科(72株)18．17%，內分泌腎內科(42株)10．61%，傳染科(24株)6．06%，其他病區共檢出105株，占26．52%。
2．4 藥敏結果 387株假絲酵母菌對5FC，AMB，FCZ，ICZ敏感性結果見表1。表1 387株假絲酵母菌對4種抗真菌藥物的敏感率（略）
3 討論
3．1 分離的396株酵母樣真菌中，假絲酵母菌有387株，占97．33%，其中以白色假絲酵母菌為主(68．18%)，這可能與其毒素黏附力較強有關，其次是熱帶假絲酵母菌(15．15%)、光滑假絲酵母菌(6．82%)、近平滑假絲酵母菌(3．03%)、克柔假絲酵母菌(2．27%)、土生假絲酵母菌(1．5 1%)和無名假絲酵母菌(0．76%)，非白色假絲酵母菌感染比例有所上升[2]，這可能與氟康唑的選擇壓力有關。另外，還分離出了較少見的曲黴菌。引起人類感染的真菌主要是假絲酵母菌，而白色假絲酵母菌是最常見的條件致病菌，當人體抵抗力下降時，容易引起假絲酵母菌病。
3．2 從396株酵母樣真菌中的分布可以發現，酵母樣真菌感染主要侵襲呼吸道(72．33%)，其次是泌尿生殖道(7．58%)和消化道(6．05%)，這與近年來肺部假絲酵母菌感染明顯增多的報道一致[3]，應引起臨床醫生的重視，在對患者治療效果不佳時，應考慮到真菌感染的可能。腸道內酵母菌群的增加與廣譜抗菌藥物的應用有關，廣譜抗菌藥物的大量應用導致腸道菌群失調，據報道，真菌引起的抗生素相關腹瀉占26．1%[4]，因此微生物實驗室要加強真菌檢測，做好糞便的菌群分析，及時發現菌群失調，減少抗生素相關腹瀉的發生。
3．3 從396株酵母樣真菌在科室的分布可以看出，以危重患者多、有慢性消耗性疾病的呼吸消化科、腫瘤科、內分泌腎內科多見，其原因是：(1)這些科室由於老年患者人多，老年人免疫功能低下，抵抗力差，往往病程長，感染頻繁，常常出現多重耐藥的耐甲氧西林葡萄球菌、不動杆菌等難治性細菌感染，發生真菌感染的機會增多，並且隨著年齡增大，咳嗽反射減弱，支氣管腺體增生，分泌物增多，黏膜纖毛清除功能降低，痰不易咳出，使上呼吸道疾病向下呼吸道蔓延，易造成真菌感染[5]。(2)腫瘤晚期反複化療的患者免疫力下降，易繼發真菌感染。(3)長期反複使用廣譜抗生素或激素，引起菌群失調或機體免疫力下降，也易引起真菌感染。
3．4 本組資料顯示，387株假絲酵母菌對5FC、AMB敏感率高達98%以上，而對氟康唑、依曲康唑敏感性較低(77%)，其原因可能與藥物的用藥機會有關。AMB可致寒戰、發熱，並且有嚴重的心腎毒性，臨床應用受到一定限製，這可能是敏感性較高的原因，但由於其抗菌譜廣，仍然是目前治療深部真菌感染較好的藥物。5FC敏感性高的原因可能是其抗菌範圍較窄，用量大，療程長，單獨使用容易產生耐藥，臨床較少使用；該藥一般應與AMB聯合使用。FCZ，ICZ敏感性較低，可能因其抗菌譜廣、毒性低、半衰期長，在臨床上廣泛應用的原因。應注意的是，光滑假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌對FCZ幾乎天然耐藥[6]，這與我們的實驗結果相符。
3．5 藥敏試驗中發現，培養時間對ATB Fungus 2真菌微量稀釋法影響結果較大，孵育時間應由48 h 改為24 h ，因為唑類藥物48 h 判讀結果時容易出現“拖尾“現象，可使MIC值增加128倍，造成假陽性的耐藥株的產生。因此，臨床微生物工作者應加強對真菌的培養、鑒定以及耐藥機製的研究，為臨床提供可靠的用藥依據，減少耐藥菌株的產生，在安全、經濟的條件下獲得最佳療效。
作者：於建華，刁幼林，朱世《臨床軍醫雜誌》
【參考文獻】
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