淋病奈瑟菌的生物危害評估報告

一、淋病奈瑟菌的傳播與致病

淋病奈瑟菌又稱淋球菌，是淋病的病原菌，人類是本菌的唯一天然宿主和傳染源。淋病是淋菌性尿道炎的簡稱，是由淋球菌引起的泌尿生殖係統化膿性炎性疾病，它是人類很古老的，也是當前世界範圍內流行非常廣泛的一種性傳播疾病。

淋病患者是主要傳染源，有症狀或無症狀的患者均可通過性接觸傳播，其中輕症或無症狀的淋病患者是重要的傳染源。其傳播途徑主要包括性交傳染，還可通過非性接觸傳播，如通過接觸患者分泌物汙染的用品（衣褲、床上用品、毛巾、浴盆、馬桶等）間接感染；孕婦淋病患者當羊膜破裂，可繼發羊膜腔內及胎兒感染；新生兒經過患淋病的母體產道時常可引起淋菌性眼炎；另外尚可通過醫護人員的手和器具引起醫源性感染。

 

本病最初多侵犯尿道、宮頸內膜，繼而可波及前列腺、精囊、副睾、子宮內膜及輸卵管。有時肛門、直腸、咽粘膜、眼結膜也可受染。尚可經血行播散引起菌血症、關節炎、心內膜炎及腦膜炎，可引起死亡或不育、不孕、失明及尿道狹窄等後果。由於本病潛伏期短、傳染性強、後果嚴重，因此它是我國當前重點防治的性病之一。

 

二、淋病奈瑟菌的生物學特性

 

淋病奈瑟菌屬奈瑟菌屬，鏡下呈腎形，常成雙排列，鄰近麵扁平或稍凹，像兩瓣黃豆對在一起，大小0.6μm×0.8μm。革蘭氏染色陰性，呈粉紅色，美藍染色呈藍色。急性炎症期細菌多在患者分泌物的少部分中性粒細胞的胞漿中，慢性期則多在細胞外，且有些可呈單個球形或四聯狀。人工培養後形態亦常呈球形、單個、成雙或四聯排列。

 

淋球菌適於潮濕（相對溫度80％～85％）、溫暖（35.5℃～36.5℃）、中性偏堿（pH7.2～7.6）、含5％～10％二氧化碳的條件下生長。最怕幹燥，在完全幹燥環境下隻能存活1～2小時，對溫度變化敏感，超過38℃或低於30℃則不能生長，在培養基上室溫放置1～2天即可死亡，在39℃存活13小時，42℃存活15分鍾，50℃存活5分鍾。如在不完全幹燥的衣褲、被褥、毛巾、玩具上則可存活18～24小時。一般消毒劑容易將它殺滅，在1:4000硝酸銀溶液中7分鍾死亡，1％石炭酸溶液中3分鍾內死亡。  

 

淋球菌較為嬌嫩，酶係統不完整，初代培養普通培養基不易成功，需在含有動物蛋白的培養基上，且含有二氧化碳的條件下才能生長。淋球菌在血瓊脂培養基孵育24小時後，可形成直徑0.5～1mm的圓形稍隆起，濕潤光滑，半透明，邊緣呈花瓣狀，有粘性的露滴狀菌。    

 

淋球菌的生化反應不發達，隻分解葡萄糖，產酸不產氣，不分解麥芽糖及蔗糖。藉助上述生化特性亦可與腦膜炎球菌及其他奈瑟菌相鑒別。淋球菌能產生氧化酶和過氧化氫酶，在診斷上有一定意義。

 

三、淋病奈瑟菌的實驗室檢查及其診斷

 

細菌的實驗室檢查及其它檢查

 

（1） 塗片檢查：取患者尿道分泌物或宮頸分泌物，作革蘭氏染色，在多形核白細胞內找到革蘭氏陰性雙球菌。塗片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者，此法陽性率在90%左右，可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多，敏感性和特異性較差，陽性率僅為50-60%，且有假陽性，因此世界衛生組織推薦用培養法檢查女病人。慢性淋病由於分泌物中淋球菌較少，陽性率低，因此要取前列腺按摩液，以提高檢出率。

 

咽部塗片發現革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病，因為其他奈瑟菌屬在咽部是正常的菌群。另外對症狀不典型的塗片陽性應作進一步檢查。

 

（2）培養檢查：淋球菌培養是診斷的重要佐證，培養法對症狀很輕或無症狀的男性、女性病人都是較敏感的方法，隻要培養陽性就可確診，在基因診斷問世以前，培養是世界衛生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。

 

目前國外推薦選擇培養基有改良的Thayer-Martin（TM）培養基和New York City（NYC）培養基。國內采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養基，均含有抗生素，可選擇地抑製許多其他細菌生長。在36℃，70%濕度，含5%-10%CO2（燭缸）環境中培養，24-48小時觀察結果。培養後還需進行菌落形態，革蘭氏染色，氧化酶試驗和糖發酵試驗等鑒定。培養陽性率男性80%-95%，女性80-90%。培養後需根據菌落形態、革蘭染色、氧化酶試驗和糖發酵試驗做出鑒定。培養陽性率男性為80％～95％，女性為80％～90％。

 

（3）抗原檢測

 

1．固相酶免疫試驗（EIA）：可用來檢測臨床標本中的淋球菌抗原，在流行率很高的地區而又不能作培養或標本需長時間遠送時使用，可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。

 

2．直接免疫熒光試驗：通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗。但目前在男女二性標本的敏感不高，特異性差，加之實驗人員的判斷水平，故該實驗尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。

 

（4）基因診斷

 

1．淋球菌的基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷，所用的探針有：質粒DNA探針，染色體基因探針和rRNA基因探針。

 

2、淋球菌的基因擴增檢測 PCR技術和連接酶鏈反應的出現進一步提高了檢測淋球菌的靈敏性，它具有快速、靈敏、特異、簡便的優點，可以直接檢測臨床標本中極微量的病原體。

 

（5）藥敏試驗 對培養陽性者可進一步用紙片擴散法做藥敏試驗，或用瓊脂平皿稀釋法測定藥物最小抑菌濃度（MIC），以及用紙片酸度定量法檢測β－內酰胺酶（使用Whatman I號濾紙PP-NG菌株能使其顏色由藍變黃，陽性為PPNG，陰性為N-PPNG），以確定淋球菌對抗生素的敏感性，合理選擇用藥。

 

四、淋病的預防

 

淋病奈瑟菌的預防要點如下：

1.避免婚外性行為。

2.在性生活中提倡使用避孕套等理化屏障，以防止淋球菌感染。

3.預防性使用抗生素可減少感染的危險，可應用於已知與淋病患者有性接觸者。

4.按淋病治療方案對病人進行合理治療，徹底消滅傳染源。

5.對性伴侶應進行檢查和治療。

6.患者宜注意個人衛生與隔離，不與家人、小孩（尤其女孩）同床、共浴。

7.執行對新生兒硝酸銀溶液或紅黴素溶液預防滴眼的規定，防止新生兒淋病性眼炎發生。

8.病人需經徹底治愈後，方可結婚、生育和安排工作。

五、淋病奈瑟菌的生物安全防護

根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規定，人間傳播的微生物名錄（待頒布）霍亂弧菌屬於三類，BSL-2。相關的防護事宜包括：

（1）操作要求

1、實驗時，未經實驗室主任同意，限製或禁止進入實驗室。

2、不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區域以外專用櫥櫃或冰箱中。

3、對於汙染的銳器，必須時刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器等。

4、注射和吸取感染材料時，隻能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進行人工處理，要不將之小心放入不會被刺穿的、用於收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。

5、打碎的器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛汙染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照相關的規定進行消毒。

6、所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實驗室消毒的物料應置於耐用、防漏容器內，密封運出實驗室。離開該係統進行消毒的物料，在轉移前應包裝，其包裝應符合有關的法規。

7、濺出或偶然事件中，明顯暴露於傳染源時，要立即向實驗室主任報告。進行適當的醫學評估、觀察、治療，保留書麵記錄。

8、按日常程序、在有關傳染源的工作結束後、尤其是傳染源濺出或灑出後、或受到其他傳染源汙染後，實驗室設備和工作台麵應當使用有效的消毒劑消毒。汙染的設備在送去修理、維護前，要按照相關的規定消毒；在離開設施轉移前，要按照相關的規定打包運輸。

（2）安全設備

1、正確使用和保養生物安全櫃、最好是二級生物安全櫃、或其他合適的人員防護設施、或物理遏製裝置。

 

2、確定可能形成傳染性濺出物的實驗過程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。

 

3、涉及高濃度或大體積的傳染源時，若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機，若轉頭或安全罩僅在生物安全櫃中打開，則可在開放實驗室內離心。

 

4、當必須在生物安全櫃外處理標本時，需采取麵部保護措施（跟鏡、口罩、麵罩、或其他防濺裝置），以免傳染源或其他有害物濺或灑到麵上。

 

5、在實驗室內，必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或製服。人員到非實驗室區域時，防護服必須留在實驗室內。防護服可以在實驗室內處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。

 

6、可能接觸潛在傳染源、被汙染的表麵或設備時，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重複使用，不能用於接觸“潔淨”的表麵（鍵盤、電話等），也不應當戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套後，要洗手。