腦膜炎奈瑟氏菌的生物危害評估報告

一、細菌的傳播與致病

 

腦膜炎奈瑟氏菌(N. meningitidis)又名腦膜炎雙球菌,是致流行性腦膜脊髓炎的病原菌。人類是腦膜炎奈瑟氏菌的唯一宿主。.腦膜炎奈瑟氏菌作為條件致病菌,常存在於患者或帶菌者的鼻咽腔黏膜中,主要通過飛沫直接從空氣中傳播,無論是在發展中國家或是發達國家均可以引起較高的流腦發病率和死亡率。但對腦膜炎奈瑟氏菌的致病機製目前尚未完全清楚。

 

流行性腦脊髓膜炎是由腦膜炎奈瑟菌引起的急性化膿性腦膜炎，為急性呼吸道傳染病。主要臨床表現為發熱、頭痛、嘔吐、皮膚粘膜瘀點、瘀斑及腦膜刺激征。重者可有敗血症性休克和腦膜腦炎。腦脊液可呈化膿性改變。

 

二、細菌的生物學特性

 

腦膜炎奈瑟菌屬奈瑟氏菌屬，革蘭染色陰性，呈腎形雙球菌，又稱“腦膜炎雙球菌”。存在於人體中性粒細胞內、外，可從帶菌者、病人的鼻咽部和病人的血液、腦脊液、皮膚瘀點、瘀斑中發現。培養的營養要求較高,普通培養基上不生長,在含有血清,血液等培養基上才能生長.專性需氧,大氣中含有5-10% CO2時生長更好,最適pH 7.4~7.6,最適溫度37℃,低於30℃不能生長。

 

腦膜炎奈瑟菌按表麵特異性多糖抗原之不同分為A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、H、I、K、L13個亞群（90%以上為A、B、C3個亞群）。我國流行菌群以A群為主，但近年屢有B、C、W135等亞群局部流行或暴發。

 

腦膜炎奈瑟菌在體外生活力、抵抗力極弱，對幹燥、寒冷、日光極為敏感。溫度低於30℃或高於50℃皆易死亡，故細菌學檢測應注意采集標本後及時送檢。對常用消毒劑亦極為敏感。

 

三、細菌的實驗室檢查及其它檢查

 

1、血常規：白細胞總數明顯增加，一般在（10－20）×109/L，中性粒細胞升高在80％－90%以上。

 

2、腦脊液檢查：病初或休克型病人，腦脊液外觀多為澄清，細胞數、蛋白和糖量尚無改變，可表現為壓力增高。典型的流腦腦膜炎期，壓力常增高至200毫米水柱以上，外觀呈渾濁米湯樣甚或膿樣；白細胞數明顯增高至1000×106/L以上，並以多核細胞增高為主；糖及氯化物明顯減少，蛋白含量升高。 對臨床有明顯顱壓增高表現者，宜在應用甘露醇脫水降低顱壓後再行腰穿；腰穿時應使腦脊液緩慢流出，必要時腰穿針芯不要全部拔出，以免因腦脊液流出過快、過多而發生腦疝。

 

3、細菌學檢查：

 

（1）塗片：取皮膚瘀點處的組織液或離心沉澱後的腦脊液做塗片染色。可在中性粒細胞內、外，有革蘭陰性腎形雙球菌，陽性率約60％－80%。

 

（2）培養：取瘀斑組織液、血或腦脊液，進行培養。應在使用抗菌藥物前培養。

 

4、血清免疫學檢查：常用對流免疫電泳法、乳膠凝集試驗、反向間接血試驗、ELISA法等進行抗原檢測，主要用於早期診斷，陽性率均在90%以上。       　　

 

四、細菌的防治

 

流腦，尤其是暴發型流腦病情進展迅速，主要死因為敗血症導致的休克、DIC和腦水腫腦疝。因此，及早的診斷、嚴密的病情觀察是本病治療的基礎。對疑似病例要按呼吸道傳染病隔離。

 

1、普通型的治療

 

（1）病原治療：盡早應用敏感並能透過血腦屏障的抗菌藥物。

 

①青黴素G：尚未發現明顯耐藥。為治療流腦首選抗菌藥物，宜大劑量使用，以使腦脊液含量達到有效濃度。成年人：20萬IU/kg/d（可用320萬IU－400萬IU/次，靜脈滴注，q8h）；療程5－7天。兒童：20萬IU－40萬IU/kg/d，分3－4次靜脈滴注；療程同成人。

 

②氯黴素：成年人：2－3g/d，兒童40－50mg/kg/d分次靜脈滴注；療程5－7天。重病人可聯合應用青、氯黴素。在應用過程中應注意其對骨髓造血功能的抑製作用。

 

③頭孢菌素：首選頭孢曲鬆鈉。抗菌活性強，療效類似於青黴素，但價格較高，宜用於不能應用青黴素的重症病人。成年人和12歲以上兒童：2－4g/d，分1－2次靜脈滴注。兒童：75－100mg/kg/d。療程均為3-5天。應用過程中，應注意二重感染的發生。也可選用頭孢呋齶，劑量3－9g/d，兒童200mg/kg，可分4次靜脈滴注，療程3－5天。

 

（2）對症治療：應保證熱量及水電解質平衡。高熱時可用物理降溫和藥物降溫；顱內高壓時予20%甘露醇1－2g/kg，快速靜脈滴注，根據病情4－6小時一次，可重複使用，應用過程中應注意對腎髒的損害。

 

2、暴發型流腦的治療

 

（1）休克型治療

 

①盡早應用抗菌藥物：可聯合應用青、氯黴素，或頭孢曲鬆鈉，頭孢呋齶用法同前，但首劑應加倍。

 

②迅速糾正休克：

 

a.擴充血容量及糾正酸中毒治療：最初1小時內成年人1000ml，兒童10－20ml/kg，快速靜脈滴注。輸注液體為5%碳酸氫鈉液5ml/kg和低分子右旋糖酐液。此後酌情使用晶體液和膠體液，24小時輸入液量2000－3000ml之間，兒童為50－80ml/kg，其中含鈉液體應占1/2左右，補液量應視具體情況。原則為“先鹽後糖、先快後慢”。根據監測血pH值或CO2結合力，用5％碳酸氫鈉液糾正酸中毒。

 

b.血管活性藥物應用：在擴充血容量和糾正酸中毒基礎上，正確使用血管活性藥物以糾正異常的血液動力學改變和改善微循環，常用的藥物為山莨菪堿、多巴胺、間羥胺等。

 

③DIC的治療：如皮膚瘀點瘀斑迅速增多及擴大融合成大片瘀斑，且血小板急劇減少，凝血酶原時間延長，纖維蛋白原減少時應高度懷疑有DIC，宜盡早應用肝素，劑量為0.5－1.0mg/kg，加入10%葡萄糖液100ml靜脈滴注，以後可4－6小時重複一次。應用肝素時，用凝血時間監測，調整劑量。要求凝血時間維持在正常值的2.5－3倍為宜，如在2倍以下，可縮短間隔時間，增加劑量，如超過3倍，可延長間隔時間或減少劑量。如有明顯出血，可輸入有肝素抗凝的新鮮血。肝素治療持續到病情好轉為止。

 

④腎上腺皮質激素的使用：適應症為毒血症症狀明顯的病人。有利於糾正感染中毒性休克。氫化考的鬆200－500mg/日，兒童劑量為8－10mg/kg/d。靜脈注射，一般不超過3天。

 

（2）腦膜腦炎型的治療

 

①抗菌素的應用：同上。

 

②及時發現和防治腦水腫、腦疝：治療關鍵是及早發現腦水腫，積極脫水治療，預防發生腦疝。可用甘露醇治療，用法同前，此外還可使用白蛋白、速尿、激素等藥物治療。

 

（3）防治呼吸衰竭：在積極治療腦水腫的同時，保持呼吸道通暢，必要時氣管插管，使用呼吸機治療。

 

3、混合型的治療 此型病人病情複雜嚴重，治療中應積極治療休克，又要顧及腦水腫的治療。因此應在積極抗感染治療的同時，針對具體病情，有所側重，二者兼顧。

 

五、細菌的生物安全防護

 

根據《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規定，人間傳播的微生物名錄（待頒布）腦膜炎奈瑟氏菌屬於二類，BSL-2。相關的防護事宜包括：

 

（1）操作要求

 

1、實驗時，未經實驗室主任同意，限製或禁止進入實驗室。

2、不許在工作區域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區域以外專用櫥櫃或冰箱中。

3、所有的操作過程應盡量細心，避免產生和濺出氣溶膠。

4、對於汙染的銳器，必須時刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器等。

5、注射和吸取感染材料時，隻能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進行人工處理，要不將之小心放入不會被刺穿的、用於收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，轉移至處理區消毒，最好高壓殺菌。

6、打碎的器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛汙染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，應按照相關的規定進行消毒。

7、所有的培養物、儲存物及其它規定的廢物在釋放前，均應使用可行的消毒方法進行消毒，如高壓滅菌。轉移到就近實驗室消毒的物料應置於耐用、防漏容器內，密封運出實驗室。離開該係統進行消毒的物料，在轉移前應包裝，其包裝應符合有關的法規。

8、濺出或偶然事件中，明顯暴露於傳染源時，要立即向實驗室主任報告。進行適當的醫學評估、觀察、治療，保留書麵記錄。

9、按日常程序、在有關傳染源的工作結束後、尤其是傳染源濺出或灑出後、或受到其他傳染源汙染後，實驗室設備和工作台麵應當使用有效的消毒劑消毒。汙染的設備在送去修理、維護前，要按照相關的規定消毒；在離開設施轉移前，要按照相關的規定打包運輸。

（2）安全設備

 

1、正確使用和保養生物安全櫃、最好是二級生物安全櫃、或其他合適的人員防護設施、或物理遏製裝置。

2、確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。

3、涉及高濃度或大體積的傳染源時，若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機，若轉頭或安全罩僅在生物安全櫃中打開，則可在開放實驗室內離心。

4、當必須在生物安全櫃外處理標本時，需采取麵部保護措施（跟鏡、口罩、麵罩、或其他防濺裝置），以免傳染源或其他有害物濺或灑到麵上。

5、在實驗室內，必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或製服。人員到非實驗室區域時，防護服必須留在實驗室內。防護服可以在實驗室內處理，也可以在洗衣房中洗滌，但不能帶回家中。

6、可能接觸潛在傳染源、被汙染的表麵或設備時，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重複使用，不能用於接觸“潔淨”的表麵（鍵盤、電話等），也不應當戴著到實驗室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套後，要洗手。