輪狀病毒腸炎導致腸道菌群失調臨床分析

【摘要】  目的 探討嬰幼兒輪狀病毒腸炎與腸道菌群紊亂的關係，為臨床診斷和合理治療提供重要意義。方法對廣州市越秀區兒童醫院2008年9月至2009年2月住院的嬰幼兒腹瀉病的糞便標本進行輪狀病毒的檢測和大便細菌培養及藥敏試驗。結果本調查在346例嬰幼兒中測得輪狀病毒(RV) 陽性共120例(34.7%)，其中6~12月齡嬰兒發病率占44.2%。在RV陽性組中檢測出條件致病菌菌株12株(10.0%); 在RV陰性組中檢測出9株(3.98%)，陽性組顯著高於陰性組(χ2 = 4.979,P<0.05)。其中在以上的21株菌株中1歲以內小兒發現14例,占66.6%。對該21株腸杆菌科病原菌的藥敏結果顯示，對大部分常用抗生素均有較嚴重的耐藥。結論 RV陽性嬰幼兒腹瀉較RV陰性嬰幼兒更易發生腸道菌群紊亂並發條件致病菌感染，且以1歲以內消化道屏障防禦功能發育未完善的小兒多發。為不疏忽內源性條件致病菌引起的嬰幼兒腹瀉，建議均要及時進行糞便培養，根據藥敏試驗合理選用抗生素指導臨床用藥。

【關鍵詞】  嬰幼兒腹瀉;輪狀病毒;條件致病菌;腸道菌群紊亂

　　[Abstract] Objective To investigate relationship between the rotavirus gastroenteritis in infants and the intestinal flora disorder,for clinical diagnosis and rational therapy of significance.Methods To check the hospitalized infants and young children diarrhea rotavirus stool samples，stool bacterial culture and drug sensitivity test in Yuexiu District Guangzhou Children's Hospital from September 2008 to February 2009.Result This survey was from 346 cases of infants and young children detected rotavirus (RV) positive for a total of 120 cases (34.7%),of which 6 to 12 months of age accounted for 44.2% of infant morbidity.RV-positive group is detected opportunistic pathogenic strains in 12 (10.0%);in the RV-negative patients detected 9 (3.98%),positive group was significantly higher than the negative group(χ2 = 4.979,P<0.05)。Among these whole 21 strains within 1 year of age was found in 14 cases,accounting for 66.6%.Of the 21 enterobacteriaceae pathogen susceptibility results showed that the majority of commonly used antibiotics are more serious resistance.Conclusion RV-positive infants and children with diarrhea in infants and young children more susceptible to intestinal flora disorder and complicated infection by opportunistic pathogen than RV-negative,and more multiple for the children within a year whose development of the digestive tract barrier defense function is not yet perfect.The conditions for non-negligence of endogenous pathogenic bacteria caused diarrhea in infants,it is recommended stool cultures have to be in a timely manner,according to a reasonable selection of antibiotic susceptibility testing to guide clinical practice.

　　[Keywords] infantile diarrhea;rotavirus;opportunistic pathogen;intestinal flora disturbance

　　輪狀病毒( RV)是全世界嬰幼兒重症腹瀉重要的病原之一，其屬於呼腸病毒科RV屬，輪狀病毒腸炎是消化係統常見病、多發病，威脅嬰幼兒的生長發育， 甚至引起死亡。人體腸道內存在固有的微生物群是機體重要的生物和化學屏障，有助於阻止病原體侵入胃腸道。RV 侵襲宿主導致腹瀉後， 腸道內菌群結構組成發生變化，引起菌群失調，人體固有微生物保護屏障遭到破壞，人體免疫功能受到影響[1]，從而使腹瀉遷延，病情加重。本文分析2008年至2009年秋冬季節120例RV感染個體在發病時腸道菌群的變化情況，使用傳統的細菌培養方法來獲得條件致病菌菌株，並與非RV感染的252例腹瀉病個體進行比較分析，探討嬰幼兒RV腸炎與腸道菌群紊亂的關係， 對於臨床診斷和合理治療將具有重要的意義。

　　1 資料與方法

　　1.1 一般資料 在2008年9月至2009年2月輪狀病毒腸炎流行期間，單純因腹瀉伴或不伴發熱、嘔吐，在我院住院治療的1個月~3歲的小兒為觀察對象，均無其他基礎疾病。大便次數每天5～15 次，平均6~8次，大便外觀呈多樣化，以蛋花樣便、水樣便、綠色樣便、黏液便為主，少數病例發生代謝性酸中毒、中度以上脫水等症狀，已排除外源性腸道細菌侵襲感染性腹瀉，共納入的嬰幼兒腹瀉例數為346例，均在入院當天即進行RV的檢測和大便細菌培養，分為RV陽性組120例和RV陰性組226例。RV陽性組男79例，女41例，性別比例1.93∶1;年齡1個月~3歲,平均(1.15±0.71)歲;RV陰性組男134例，女92例，性別比例1.46∶1,年齡1個月~3歲,平均(1.28±0.81)歲,見表1。

　　1.2 方法

　　表1 RV陽性組與RV陰性組性別、年齡分布

　　1.2.1 RV檢測方法 采用快速一步法病RV抗原檢測試劑盒(96孔) 進行酶聯免疫吸附試驗(ELISA ) ，檢測RV抗原，試劑由 A組RV的單克隆抗體製成，具體方法及步驟按說明書進行。

　　1.2.2 細菌培養與鑒定方法 所有病例均由醫護人員用直腸拭子采集糞便，送檢後接種於SS及麥康凱瓊脂、伊紅美藍瓊脂平板上，必要時接種沙一保羅培養基。挑取可疑菌落(優勢生長或單純培養之菌落)進行生化鑒定，並連續培養2~3次35 ℃孵育，所有標本按常規方法進行沙門菌、誌賀菌及致病菌性大腸埃希菌等致病菌的分離鑒定。

　　1.3 統計學分析 采用χ2檢驗。

　　2 結果

　　2.1 RV陽性組和RV陰性組出現腸道條件致病菌菌株的分布見表2。兩組總有效率比較:χ2 = 4.979,P= 0.0252,P<0.05，差異具顯著性。我們發現在以上合並內源性腸道條件致病菌感染的患兒中1歲以內小兒有14例,占66.6%。表2 RV陽性和陰性組條件致病菌分布情況

　　2.2 細菌藥敏試驗 從346例嬰幼兒腹瀉糞便中共檢出大腸埃希菌株11株，對頭孢吡肟敏感率是100%， 頭孢呱酮和頭孢曲鬆敏感率是72.7%,頭孢呋肟敏感率是54.5%,頭孢拉定敏感率是45.5%,氨苄西林敏感率是9.1%。檢出弗勞地枸櫞酸杆菌菌株4株，對頭孢吡肟、頭孢呱酮敏感率是100%，頭孢曲鬆敏感率是75%，頭孢呋肟、頭孢拉定和氨苄西林敏感率是0%。陰溝腸杆菌株共5例，對頭孢吡肟、頭孢呱酮敏感率是100%，頭孢曲鬆敏感率是40%，頭孢呋肟、頭孢拉定和氨苄西林敏感率是0。產氣腸杆菌1株，對頭孢吡肟、頭孢呱酮敏感，對頭孢曲鬆、頭孢呋肟 、頭孢拉定和氨苄西林敏感率是0。

　　在秋季腹瀉流行季節中，RV腸炎在嬰幼兒腹瀉病中高居第一,本調查中占34.7%,其中以6~12月齡嬰兒發病率最高，並且在346例中有6.07%出現了腸道條件致病菌感染，其中以1歲以內小兒占多數。其發生的主要因素可能與嬰兒胃內酸度低、大腸蠕動弱及腸微絨毛的成熟度較差而影響腸內菌群繁殖有關[2]，且嬰兒血清免疫球蛋白和胃腸道分泌型 IgA均較低，消化道的免疫屏障防禦功能發育未完善，在原有腹瀉病基礎上，腸道微生態的生物屏障又易遭到破壞，腸道中菌群的數量和(或)定位發生改變，比如在腸道微生態平衡時是無害的條件致病菌，包括腸球菌、大腸埃希菌、變形杆菌等大量繁殖,且具有侵襲性，同時抑製了雙歧杆菌、乳酸杆菌等厭氧益生菌的正常繁殖,從而引起了菌群失調，易並發條件致病菌感染引起的嬰幼兒腹瀉[3]。

　　目前,在國內外 RV的研究主要集中在RV流行病學調查、 病毒血清型分析上,對腸道菌群的變化研究還很少。我們在RV陽性組與RV陰性組間並發條件致病菌感染具明顯差異,RV陽性組更易發生腸道菌群紊亂,出現條件致病菌的侵襲與定植。張琳等[4]曾用培養的方法對嬰幼兒輪狀病毒(RV) 腸炎患兒的腸道菌群進行過動態研究，結果也提示在發病早期就出現了菌群失調，且腸炎症狀越重，則腸道雙歧杆菌數量下降越明顯;其原因是由於RV感染時直接侵襲小腸黏膜， 使其小腸絨毛縮短， 腸黏膜細胞結構破壞，加之腹瀉時腸內容物快速通過而導致腸道內環境變化，使正常微生物菌群賴以生存的環境遭到破壞，這就是RV腹瀉時腸道共生的生理性細菌，即專性厭氧菌如雙歧杆菌、 類杆菌、 優杆菌和消化球菌等數量減少的主要原因，從而有利於腸道共棲的條件致病菌的侵襲與定植，加重腹瀉發生，腹瀉後又進一步加重腸道菌群的紊亂形成惡性循環。隨著腹瀉症狀的好轉，損傷腸黏膜的修複而腸道雙歧杆菌也逐漸恢複正常，腸道菌群失調也逐漸糾正。

我們在21株條件致病菌的細菌藥敏結果顯示，檢出的腸道內源性腸杆菌科病原菌對大部分常用抗生素均有較嚴重的耐藥，且部分為多重高度耐藥。故對嬰幼兒腹瀉，包括輪狀病毒腸炎，建議均要及時進行糞便培養,在注意對誌賀菌、沙門菌、病原性弧菌和致病性大腸埃希菌等病原菌進行檢測的同時，也不要疏忽對內源性條件致病菌的檢測，以免造成嬰幼兒腹瀉病原菌的漏診和誤診。由於引起嬰幼兒腹瀉的條件致病菌種類繁多，所以在進行糞便培養時，要多選幾種培養基，有的甚至主張增加血平板，這樣可以提高條件致病菌感染的檢出率[5]，以便了解細菌種類及耐藥情況，指導臨床應用，有效地控製和治療嬰幼兒腹瀉。

作者：張翊，賴誌光，黃仰鑾，朱靄紅

【參考文獻】
  　1 Michaud D，McKay L，Pfefferle P，et al.Therapeuticplasmaexchange.Dynamics，2001，12(4)：18-24.
　　2 黃永坤，楊關芬，李海林.常見胃腸病患兒胃腸道茵群變化研究進展.實用兒科臨床雜誌,2007,22(7):481-484.
　　3 王忠堂,姚詠明,肖光夏等.解放軍醫學雜誌,2002,27(9):770-773.
　　4 張琳，邱學瀲，李素娥.嬰幼兒輪狀病毒腸炎腸道菌群的動態變化.中華兒科雜誌，1994,32(5):282-284.
　　5 徐承傑，呂蘭風.大便培養建議增種血平皿.齊魯醫療檢驗，1999，10(3)：41.