【摘要】 目的 測定實驗藥物塞克硝唑對口腔厭氧病原菌的體外抗菌作用。方法 本試驗采用美國國立臨床實驗室標準化研究所(CLSI/NCCLS)推薦的厭氧菌藥物敏感試驗-瓊脂稀釋法，檢測塞克硝唑對6株模式株和參考株及35株口腔臨床分離株的體外抗菌活性，並與同類藥物甲硝唑進行比較。結果塞克硝唑和甲硝唑對6株模式株和參考株的MIC值分別是0.062～0.5μg/ml、0.125～0.5μg/ml；對35株臨床分離株的MIC值分別是0.031～0.5μg/ml、0.031～1.0μg/ml。結論 塞克硝唑與甲硝唑相比體外抗厭氧菌活性相似或略強。
【關鍵詞】 塞克硝唑； 抑菌實驗； 厭氧菌； MIC
口腔臨床常見的感染性疾病如牙周炎、冠周炎均為厭氧菌感染為主的疾病，厭氧菌檢出率在95%左右。5-硝基咪唑類藥物［如甲硝唑(MTZ)等］被認為是抗無芽孢厭氧菌感染效果較好的藥物。塞克硝唑(secnidazole，SNZ)是近年來國外臨床廣泛使用的安全、有效的抗脆弱擬杆菌、幽門螺杆菌、陰道滴蟲及腸道阿米巴的5-硝基咪唑類藥物［1，2］。與其它5-硝基咪唑類藥物相比，具有有效血藥濃度維持時間長(17～29h)［3］、不良反應少等優點［4，5］。目前國內塞克硝唑僅應用於婦科感染性疾病的治療，還未見用於口腔感染性疾病的治療，為進一步了解塞克硝唑對口腔厭氧菌株的敏感性，本文對塞克硝唑進行體外抑菌實驗，為本品在口腔臨床抗厭氧菌感染中的應用提供有意義的實驗數據。
1 材料與方法
1.1 材料
(1)實驗藥和對照藥
實驗藥 塞克硝唑原藥粉，白色粉劑，批號20041216，由浙江南洋藥業股份有限公司提供。
對照藥 甲硝唑原藥粉，白色粉劑、批號HEC-ME-040634，由浙江南洋藥業股份有限公司提供。
(2)實驗菌株 選擇口腔臨床常見的厭氧病原菌菌株作為本實驗的實驗菌株，其中模式株和參考菌株6株，臨床分離株35株，均從口腔臨床牙周炎患者的病灶位點分離。質控株脆弱擬杆菌ATCC25285；實驗菌株(模式株和參考菌株)6株：牙齦卟啉單胞菌(Porphynomonas gingivalis)ATCC33277，牙齦卟啉單胞菌381，牙髓卟啉單胞菌(Porphyromonas endodentalis)ATCC34506，中間普雷沃菌(Prevotella intermedia)ATCC25611，產黑素普雷沃菌(Prevotella melaninogenica)ATCC13040，具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)ATCC10953。
(3)培養基 Brain-heart infusion-S(BHI-S)，Bio-Merieux產品，批號51009。
(4)厭氧孵育箱 DYII型，浙江義烏。
1.2 方法
采用美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI/NCCLS)推薦的厭氧菌藥物敏感試驗(Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobes) 瓊脂稀釋法(Agar Dilution Method)測定實驗藥物和對照藥物的抗菌活性，用最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration，MIC)表示。
(1)藥物實驗液和含藥瓊脂平皿的配製
藥物實驗貯存液的配製 實驗藥和對照藥均用無菌蒸餾水配製成藥物濃度為5120μg/ml的貯存液(
含藥瓊脂平皿的配製 采用對倍稀釋法，用BHI液體培養基分別將實驗藥和對照藥的貯存液(5120 μg/ml)配製成係列濃度的實驗藥液： 2560、1280、640、320、160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.62和0.31μg/ml。分別取上述不同濃度的藥物實驗液2ml加18ml濃度為48～
(2)實驗細菌液的準備 在BHI-S瓊脂表麵接種實驗菌株，置厭氧培養箱內(80% N2+10% CO2+10% H2)培養48h，取48h純培養物接種BHI-S肉湯後放置厭氧培養箱內(80% N2+10% CO2+10% H2)培養48h，校正實驗菌液的濃度為0.5McFarland(108CFU/ml)備用。
(3)MIC測定 在係列含藥平皿表麵用微量加樣器分別點種細菌濁度為108CFU/ml(0.5 McFarland標準)的實驗菌液，點種量為7μl。將點種細菌的實驗平皿放置在厭氧箱內(80% N2+10% CO2+10% H2)培養48h。實驗菌對照：將實驗菌液點種在不含藥液的BHI-S瓊脂表麵。厭氧培養(80% N2+10% CO2+10% H2)48h後觀察MIC結果。
2 結果
由表1可見塞克硝唑和甲硝唑對質控菌株脆弱擬杆菌ATCC25285的MIC的測定值與CLSI/NCCLS公布的參考值接近。對6株模式株和參考株的MIC值分別為0.062～0.5μg/ml、0.125～0.5μg/ml，對35株臨床分離株的MIC分別為0.031～0.5μg/ml、0.031～1.0μg/ml。結果提示，與甲硝唑相比較，塞克硝唑對這幾種厭氧菌的體外抗菌活性相似或略強。表1 塞克硝唑(SNZ)和甲硝唑(MTZ)對實驗細菌的
3 討論
塞克硝唑與甲硝唑同屬5-硝基咪唑類藥物，其抗菌譜與硝基咪唑類其它抗菌藥物沒有明顯差異。與甲硝唑相比，塞克硝唑的藥動學特性如生物利用度、存在活性代謝物和終末消除半衰期(塞克硝唑t1/2β為17～29h，甲硝唑為7～8h)主要表現量的差異，出現差異的原因是由於氮環上結合於硝基鄰近的取代基決定的。國外塞克硝唑主要用於治療阿米巴、賈第鞭毛蟲、滴蟲和細菌性陰道炎，絕大多數都是使用單劑方案［5，6］，單劑治療是塞克硝唑的最大特點，有報道塞克硝唑在牙齦組織內藥物濃度與血藥濃度大體平行［7］，說明該藥對牙齦組織有較好的穿透作用，同時該藥在牙齦組織的半衰期長達28.8h。該藥口服吸收好，口服和靜脈給藥差異無顯著性［8］口腔臨床常見的牙周炎和冠周炎均以厭氧菌感染為主，本實驗通過塞克硝唑和甲硝唑對6株模式株和參考株及35株臨床分離株的測定表明，塞克硝唑的體外抗厭養菌活性相似或略強於甲硝唑。鑒於塞克硝唑的血液維持濃度較長，胃腸道不良反應小，耐受性良好，單劑口服方便等特點，塞克硝唑在治療口腔厭氧菌感染方麵有較大的應用前景。
作者：於佳輝 李淼 肖麗英 丁一 肖曉蓉 朱珠 龔其美《中國抗生素雜誌》
【參考文獻】
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