藏藥翁布不同提取物的體外抑菌實驗研究

摘要：目的研究藏藥翁布不同提取物的體外抑菌作用。方法采用濾紙片擴散法對藏藥翁布Myricaria germanica (L.) Desv.水提物和醇提物分別進行了體外抑菌實驗研究。結果藏藥翁布水提物和醇提物對大腸杆菌的最低抑菌濃度分別為70%和50%，對其他8種菌的最低抑菌濃度均在5%以下，有顯著的抑菌作用。結論翁布水提物的抑菌效果好於醇提物。

　　關鍵詞：翁布；  水提物；  醇提物；  抑菌

　　Bacteriostasis Study of the Different Extracts from the Traditional Tibetan Herb Myricaria germanica (L.) Desv in vitro

　　Abstract：ObjectiveTo study the bacteriostasis in vitro of aqueous extract and alcohol extract from the Tibetan herb Myricaria germanica. MethodsFilter paper dispersion Result: The MIC of aqueous extract and alcohol extract to E. coli were 70% and 50% respectively, and the MIC of the other eight bacteria was under 5%. ConclusionThe extracts has obvious bacteriostasis effects, and the bacteriostasis effect of aqueous extract is better than that of alcohol extract.

　　Key words：Myricaria germanica (L.) Desv;   Aqueous extract;   Alcohol extract;   Bacteriostasis

   

　　藏藥翁布原植物為檉柳科Tamaricaceae水柏枝屬Myricaria Desv，水柏枝Myricaria germanica (L.) Desv.，灌木，高達2.5 m，莖直立且多數分枝，枝紅棕色；葉小，線形或線狀長圓形，分布於西藏、青海、四川、雲南、甘肅、陝西、山西，生長於海拔2 000～2 900 m的河灘環境［1］，為傳統藏藥，據《晶珠本草》記載，翁布有清熱解毒，發散透疹，治黃水病的功效［2］。清熱解毒中草藥對多種細菌或病毒所致的感染性疾病有良好的治療效果［3］，本文分別采用翁布的水提物和醇提物對多種菌進行體外抑菌實驗，擬觀察翁布體外的抑菌效果，為藏藥翁布的開發和應用提供基礎理論依據。

　　1  材料與儀器

　　1.1  藥物藏藥翁布采自青海省祁連縣海拔2 900 m的河灘，由青海師範大學生命與地理科學學院吳學明教授鑒定。

　　1.2  菌種枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus、梭狀芽孢杆菌Clostridium sp.、變形杆菌Proteus vulgaris、大腸杆菌Escherichia coli、痢疾杆菌Shigella dysenteriae、巨大芽孢杆菌Bacillas megaterium、八疊球菌Sarcina maxima、四聯球菌Tetracoccus sp.，由青海師範大學生命與地理科學學院微生物實驗室提供，以牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基培養［4］。

　　1.3  儀器HH・S114電熱恒溫水浴鍋，XMTA7000水夾套培養箱，YX280B手提式壓力蒸汽消毒器，ZHJH1115無菌操作台。

　　2  方法

　　2.1  藏藥翁布的水提法［5］將陰幹翁布嫩枝剪碎，稱取50 g，置燒杯中加蒸餾水浸泡30 min後加熱煮沸，再用文火加熱30 min，過濾得第1次水提取物，將濾渣用同樣方法得第2次、第3次水提取物，合並3次濾液，置於燒杯中，在70℃恒溫水浴鍋中蒸發濃縮至50 ml，得到翁布水提物（含生藥量1 g/ml）。

　　2.2  藏藥翁布的醇提法［5］將陰幹翁布嫩枝剪碎，稱取50 g，加70％的乙醇150 ml回流提取1 h後，過濾得第1次乙醇提取物，將濾渣再次回流得第2次、第3次乙醇提取物，合並3次濾液，減壓蒸餾除去乙醇至50 ml，得到翁布醇提物（含生藥量1 g/ml）。

　　2.3  菌種活化培養［3］將各菌株接種到牛肉膏蛋白腖斜麵培養基中，37℃培養24 h後，利用血球板計數法將各菌株用無菌水配製成濃度約為107個/ml的菌懸液，備用。

2.4  最低抑菌菌濃度（MIC）的測定［6］將上述藏藥翁布水提物和醇提物（濃度100％）用蒸餾水稀釋配製成濃度為1%，2%，3%，4%，5%，10%，20%，30%，40％，50％，60％，70％，80%的試液，采用濾紙片擴散法測定各種菌的最低抑菌濃度。用打孔器將新華濾紙打成8 mm的圓片，濾紙經高壓滅菌後，放在試液及空白對照的生理鹽水中浸泡30 min，瀝去多餘試液，用無菌鑷子放在塗好菌液的培養基上，25℃培養24 h，以濾紙片周圍剛出現抑菌圈的濃度為最低抑菌菌濃度（MIC），各濃度設3個重複，取其平均值。

　　2.5  藏藥翁布提取物的抑菌實驗［6］將上述藏藥翁布水提物和醇提物（濃度100％），以生理鹽水作為對照，采用濾紙片擴散法測量濾紙片周圍形成的抑菌圈直徑，重複3次，取其平均值。比較翁布水提物和醇提物的抑菌作用。

　　3  結果

　　3.1   藏藥翁布最小抑菌濃度（MIC）測定藏藥翁布不同提取物對各菌的最小抑菌濃度（MIC）測定結果見表1。由表1可知，藏藥翁布水提物和醇提物對大腸杆菌的抑菌作用不明顯，最低抑菌濃度分別為70％和50％，對其他8種菌均有明顯的抑菌作用，最低抑菌濃度均為5％以下，有顯著的抑菌作用。

　　3.2   藏藥翁布不同提取物抑菌效果藏藥翁布水提物和醇提物的抑菌結果見表2。

　　表1  翁布不同提取物對各菌的最小抑菌濃度(略)

　　表2  藏藥翁布不同提取物對各菌的抑菌圈直徑(略)

　　由表2可知，藏藥翁布水提物和醇提物都有很強的抑菌作用，從抑菌圈直徑看，醇提物對四聯球菌的抑菌效果好於水提物，而水提物對其它菌的抑菌效果較好。

　　4   討論

臨床資料表明，清熱解毒中草藥對多種細菌所致的感染性疾病有良好的治療效果。現代實驗研究顯示，清熱解毒類中草藥能抑製細菌的糖、蛋白質、核酸代謝，抑製細菌繁殖，提高巨噬細胞、中性白細胞吞噬功能［3］。本實驗所用藏藥翁布具有清熱解毒作用，其水提物和醇提物對本實驗提供的常見菌種都有相近最低抑菌濃度（大腸杆菌除外）和不同程度的抑菌作用，如金黃色葡萄球菌能引起皮膚粘膜、多種組織器官的化膿性炎症，是最常見的化膿性球菌［7］，因此，本實驗結果可為開發藏藥翁布作為治療化膿性感染的藥物提供基礎研究數據。藏藥翁布對其他致病菌有無抑製作用有待於進一步研究。

作者：鮑敏  曾陽 米琴陳振寧《時珍國醫國藥》

　　參考文獻：

　　［1］  中國科學院西北高原研究所.藏藥誌［M］.西寧：青海人民出版社，1991：318.

　　［2］  毛繼祖，羅達尚，王振華，等.晶珠本草（蒂馬爾、丹增彭措著）［M］.上海：上海科學技術出版社，1986.

　　［3］  夏稷子，千裏光.五種中草藥的體外抑菌實驗［J］.中國微生態學雜誌，1997，9（4）：50.

　　［4］  沈  萍，範秀容，李廣武.微光揚學實驗［M］.北京：高等教育出版社，2000：214.

　　［5］  陳  奇.中藥藥理實驗方法學［M］.上海：上海科技出版社，1996：67.

　　［6］  黃秀梨.微生物實驗指導［M］.北京：高等教育出版社施普林格出版社，2001:62.

［7］  陸德源.醫學微生物學，第5版［M］.北京：人民衛生出版社，2001:93.