藏藥濕生扁蕾的抑菌作用研究

摘要：目的探討濕生扁的體外抑菌作用。方法用KB紙片擴散法和生長速率分別研究了濕生扁蕾對細菌和真菌的抑製作用。結果濕生扁蕾的提取物和各部位對供試菌都有一定的抑製作用，其中對辣椒疫黴的抑製作用最強；氯仿部位的抑菌作用則最好。結論濕生扁蕾在體外有明顯的抑菌作用。

　　關鍵詞：濕生扁蕾；  抑菌作用

　　Studies of the Antimicrobial Activity of Gentianopsis paludosa

　　　Abstract:ObjectiveTo study the antimicrobial activity of Gentianopsis paludosa.MethodsKB paper diffusion and mycelial growth rate methods were used to determine antibacterial activity, respectively.ResultsThe ethanol extraction and fractions of Gentianopsis paludosa showed inhibitory effects on the tested microbe,and the inhibitory effect on Phytophthora capsici was the strongest. Futhermore,the chloroform fraction showed the best activity.ConclusionGentianopsis paludosa has significant antimicrobial activity.

　　Key words:Gentianopsis paludosa;  Antimicrobial activity

   

　　濕生扁蕾Gentianopsis paludosa Ma為龍膽科扁蕾屬植物，具有清熱解毒的功效，主治急性黃疸肝炎、結膜炎、高血壓病、急性腎盂腎炎、痔瘡腫毒、腸胃炎、腹瀉等。藏醫用全草治療流行性感冒及膽病引起的發燒［1，2］。雖然濕生扁蕾在民間的藥用價值很大，但關於其生物活性的研究卻很少。因此，我們對濕生扁蕾活性進行了研究，為其開發利用提供科學的依據。

　　1  材料

　　以下菌種均為本實驗室保存。細菌：枯草芽孢杆菌，白菜軟菌病菌，柑桔潰瘍菌，金黃色葡萄球菌。真菌：毛黴，辣椒疫黴，玉米大斑病菌，番茄早疫病菌，煙草炭疽。瓊脂粉購於北京奧博星生物技術責任有限公司。濕生扁蕾采自青海，由西北高原生物研究所張寶琛研究員鑒定為Gentianopsis paludosa Ma。

　　2  方法

　　2.1  濕生扁蕾乙醇提取物及各部位的製備濕生扁蕾用75%乙醇回流提取3次，合並提取液，減壓蒸餾得粗提物。粗提物懸浮在水中，依次用石油醚，氯仿，正丁醇反複萃取，減壓蒸餾得到石油醚部位，氯仿部位，正丁醇部位，水部位。

　　2.2  藥液的製備抑製細菌的藥液：分別取濕生扁蕾粗提物（E），石油醚部位（P），氯仿部位（C），正丁醇部位（B），水部位（W）適量溶於DMSO中配成20 mg/ml的藥液備用。抑製真菌的藥液：分別取濕生扁蕾粗提物，各部位適量加到滅菌後的PDA固體培養基中，配成不同濃度的懸濁液。

　　2.3  KB紙片擴散法製備LB培養基［3］，將上述細菌菌種在LB液體培養基中活化後，以無菌操作用移液槍移取致平鋪到平板表麵，將在藥液中浸泡過的濾紙片（直徑6 mm）貼到培養基上，用DMSO浸泡過的濾紙片作為對照。在溫箱中培養24 h（金黃色葡萄球菌在37℃下培養），觀察並測量抑菌圈直徑。

　　2.4  生長速率法製備PDA培養基［3］，將不含藥物的，含藥物的培養基分別平鋪在夾板上，上述真菌菌種活化後，在無菌條件下，將供試菌種用直徑6 mm的打孔器打出一定數量的菌餅。將菌餅移至培養基上，菌絲麵朝下，每皿中央放一塊菌餅，置28℃溫箱中培養。將不含藥物的培養基作為對照。待對照皿中菌落長滿皿時，測量其餘處理的菌落直徑，求出抑菌率。

　　抑製率=對照皿中菌落直徑處理皿中菌落直徑     對照皿中菌落直徑打孔器直徑直徑×100%

3  結果

　　3.1  濕生扁蕾對細菌的抑製作用從表1中可以看出，除了枯草芽孢外，濕生扁蕾75%的乙醇提取物、氯仿、石油醚、正丁醇對其它3種細菌都有抑製作用，對柑桔潰瘍的作用最顯著。而氯仿部位的活性要好於其他部位。水部位隻對柑桔潰瘍有作用。DMSO對細菌無作用。

　　表1  濕生扁蕾對細菌的抑製作用（略）

　　3.2  濕生扁蕾對真菌的抑製作用濕生扁蕾提取物對所測的真菌都有抑製作用，且對辣椒疫黴的作用最強。結果見表2。EC50（mg/ml）分別為0.967，0.297，0.941，2.985，0.562，0.839。對濕生扁蕾的部位隻測定了對毛黴和辣椒疫黴的作用，從表3中可以看出，石油醚和氯仿部位的作用比較明顯，且對辣椒疫黴的作用比對毛黴要強。在1.0 mg/ml時，氯仿部位對辣椒疫黴的抑製作用達到了95%。

　　表2  濕生扁蕾75%乙醇提取物對真菌的抑製作用（略）

　　表3  濕生扁蕾各部位對真菌的抑製作用（略）

　　4  討論

從以上結果可以看出，濕生扁蕾對供試菌都有一定的抑製作用（枯草芽孢除外），且對辣椒黴的作用最強；氯仿部位的抑菌效果最好。供試菌中除金黃色葡萄球菌外都為植物致病菌，這就提示了濕生扁蕾對一此植物致病菌有一定的抑製作用。本實驗為擴大濕生扁蕾的應用提供了科學依據，使其開發更具有廣闊的前景。

 

作者：王煥弟，譚成玉，白雪芳，杜昱光，林炳承 《時珍國醫國藥》

　　參考文獻：

　　［1］  張寶琛，甄潤德，胡柏林，等.濕生扁蕾化學成分的研究［J］.中草藥，1980，11（4）：149.

　　［2］  屠蘭英，曹長年，趙啟英.正交設計法研究濕生扁蕾藥效成分的優化提取工藝［J］.青海師範大學學報（自然版），2005，1：69.

     ［3］  方中達.植病研究方法［M］.北京：中國農業出版社，1996：46.